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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃保存
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
GAL4 luciferase reporter plasmid
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
1ug
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| GAL4 luciferase reporter plasmid (GAL4-Luc萤光素酶报告基因质粒) |
11541ES03 |
1 μg |
3365.00 |
产品描述
GAL4-Luc萤光素酶报告基因(报告基因质粒)(GAL4 luciferase reporter plasmid)是翌圣生物自主研发的用于检测GAL4转录活性水平为目的的报告基因。GAL4是酵母(Saccharomyces cerevisiae)转录激活蛋白Gal4的基因,是酵母半乳糖的代谢相关基因,GAL4/UAS系统被用于基因表达研究的一个有效工具。
GAL4报告基因主要用于检测蛋白质相互作用的酵母双杂交系统,以及在其基础上发展出来的用于检测Protein-DNA相互作用的酵母单杂交系统和酵母三杂交系统。
pGAL4-Luc是翌圣生物改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个GAL4结合位点,可以高灵敏度地检测GAL4的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,在保持原有功能不变的情况下,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得GAL4报告基因质粒更易于转染。

载体元件信息
| GAL4 response element (GAL4) |
32-71 |
| Minimal TA promoter (pTA) |
100-122 |
| Luciferase reporter gene |
154-1816 |
| SV40 late poly(A) signal |
1851-2072 |
| SV40 early promoter |
2120-2538 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region |
2563-3357 |
| Synthetic poly(A) signal |
3382-3430 |
| Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region |
4545-5405 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site |
5510-5663 |
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。保质期1年。
注意事项
1)本质粒未经翌圣生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。
3)本产品仅作科研用途!
使用说明
1)pGAL4-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用萤光素酶检测试剂盒或双萤光素酶检测试剂盒进行检测;
2)首次使用1 µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
参考文献
[1] Goto T, Takahashi N, Kato S, et al. Bixin activates PPARα and improves obesity-induced abnormalities of carbohydrate and lipid metabolism in mice[J]. Journal of agricultural and food chemistry, 2012, 60(48): 11952-11958.
[2] Lucas-Hourani M, Lupan A, Desprès P, et al. A phenotypic assay to identify Chikungunya virus inhibitors targeting the nonstructural protein nsP2[J]. Journal of biomolecular screening, 2013, 18(2): 172-179.
[3] Lim B, Jun H J, Kim A, et al. The TFG-TEC fusion gene created by the t (3; 9) translocation in human extraskeletal myxoid chondrosarcomas encodes a more potent transcriptional activator than TEC[J]. Carcinogenesis, 2012, 33(8): 1450-1458.
[4] Kim J H, Gurumurthy C B, Band H, et al. Biochemical characterization of human Ecdysoneless reveals a role in transcriptional regulation[J]. 2010.
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| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| 11402ES60/80 |
100/1000 T |
|
| 11401ES60/76/80 |
100/500/1000 T |
|
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文献和实验【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
啦! 呵呵,以前看到过有人把NOTCH1的intracellular domain连上GAL4-VP16,然后共转UAS-Reporter。相当于一个直接结合的报告基因系统。UAS-Reporter可以改造pG5Luc载体。 NLS序列在pACT的vp16AD或者pGADT7的gal4AD的上游处,都是SV40NLS,说明书上就有。 呵呵,我不知道常用载体里有没有不带NLS的GAL4序列。GAL4-UAS系统思路及经典文献可以参考93年development





