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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Tma Endonuclease III
- 库存:
615
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京BTN130637型Tma核酸内切酶III厂家价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京BTN130637型Tma核酸内切酶III厂家价格
编号:BTN130637
规格:500U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
该酶为核酸内切酶III(Nth)的热稳定同源蛋白。既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶位点。AP-裂解酶活性随后对该位点进行切割。Tma核酸内切酶III识别DNA上的无碱基位点、5,6二羟基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇。其反应示意图如
下:

产品用途:
1.碱性析出;
2.碱解旋。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl缓冲液体系中,65℃条件下,1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的60bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
AP位点的创建方法如下:37℃条件下,用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的60bp寡核苷酸双链2分钟。
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北京BTN130637型Tma核酸内切酶III厂家价格关键词:BTN130637,Tma Endonuclease III,Tma核酸内切酶III
·石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
编号:BTN130888
英文名称:FFPE Total Protein Extraction Kit
规格:50次
石蜡包埋组织是很重要的临床材料,研究其正常细胞和疾病相关的细胞,特别是癌细胞中标记蛋白的差异表达水平,对于判断癌化的进展,癌症的类型的判定,以方便于诊断和治疗有重要的意义,然而体外培养的细胞的蛋白差异表达水平并不能够真实反映体内细胞的真实状况,因此从石蜡包埋组织中提取蛋白并且加以研究有很重要的意义,本试剂盒通过特殊的快速脱蜡试剂和蛋白质抽提试剂,在两种不同的温度条件下温育,可以将被铰链的蛋白质释放出来,经过简单的离心步骤,上清中含有的蛋白经过沉淀洗涤和溶解后,可以用于Western Blot 、SDS-PAGE、ELISA、2D电泳或蛋白质芯片分析等,本试剂盒可以使用50次左右。
产品特点:
1. 不含有去污试剂,适用于非染色的标本。
2.可以适用于甲醛浸泡的组织标本。
3. 不需要超速离心,可以同时处理多个标本。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 预处理试剂A | 100mL |
| 预处理试剂B | 5mL |
| 提取试剂 | 5mL |
| 沉淀试剂 | 75mL |
| DTT干粉 | 80mg |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温下运输和保存,但DTT和提取试剂需要4℃保存,盛装预处理试剂A的瓶子已经密封,请在使用后,将剩余的预处理试剂A倒入一个有内盖的瓶中,同时盖紧内外盖,以防止挥发。盛装预处理试剂A,B和沉淀试剂的瓶盖要盖紧,同时避免火源。
使用方法:
1. 取两块大约10-15μm厚,100mm2石蜡包埋组织切片到1.5mL的干净离心管中,加入1mL预处理试剂A,高速涡悬震荡30 sec,室温静置5 min,期间偶尔颠倒离心管数次。
2. 加入100μL预处理试剂B,涡悬震荡10sec,再10000rpm(10000g)离心2min,移去上下两层的液体。
3. 用500μL的超纯水清洗脱蜡的组织两次,离心并尽量吸去液体,保留组织块沉淀。
4. 加入100μL提取试剂(用前需要将DTT全部加入到装提取试剂的瓶中,摇晃混匀,未用完的提取试剂需要4℃放置),盖上盖子,涡悬震荡数秒。
5.在水浴锅中100℃加热20 min,短暂离心一下,再用组织研磨棒将切片组织磨碎。
6.在水浴锅中60℃加热2 hour,期间大约每20 min取出,震荡一次。
7. 4℃,12000rpm(12830 g)离心15 min,小心将上清转移到一个新的1.5mL的干净离心管中。注意:在上清中的蛋白质可以在4℃的环境条件下保存一个星期,如果需要长期保存,请放置在-20℃的环境中,同时避免 反复冻溶,也可以使用我公司生产的非干扰型蛋白浓度测定试剂盒对上清中的蛋白质直接定量。
8. 加入1mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min。
9. 4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀。
10. 加入0.5mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min,再4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀,在通风橱中将试管倒置在滤纸上,让残余的液体挥发干净。
11. 将固体沉淀溶解于合适的自备的缓冲液中,再4℃,12000rpm离心5 min,收集上清,用于SDS-PAGE,Western blot等实验。注意:此上清中含有DNA,RNA 残留,所以溶液有些发粘,加入少量的micrococcal nuclease,benzonase等消化,有助于减少粘性,但是即使不处理一般不会影响后续实验,用枪头将沉淀捣碎。建议使用含有Thiourea ,Urea,NDSB-201或其它强溶解能力的去污试剂的缓冲液有利于沉淀的完全溶解。
注意事项:
1. 为提高石蜡包埋组织中蛋白质的回收效率,必须尽量减少在切片制作过程中甲醛固定时间,同时在石蜡包埋前彻底脱水,甲醛固定的时间越长,蛋白质的提取回收效率越低。
2. 尽量取用从石蜡包埋组织块中切取的薄片,或没有封闭到载玻片上的没有经过苏木精等染色的切片。
3. 材料越新鲜或甲醛固定时间越短,蛋白质的回收效率越高。
4. 提取试剂中含有含有刺激性的化合物,操作时要戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻,沾染皮肤 眼睛后,立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
5. 对于甲醛浸泡的组织样本,每次可以取5-10mg的组织样本,用双蒸水洗涤离心收集后后,直接从步骤4开始操作。
6. 提取的蛋白沉淀如果用于ELISA、RIA等免疫实验,可能需要先进行抗原修复程序,但是如果用Western Blot或Dot blot实验,一般情况下没有必要。
7. 本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
北京BTN130637型Tma核酸内切酶III厂家价格关键词:BTN130637,Tma Endonuclease III,Tma核酸内切酶III
·96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)
编号:BTN131211
英文名称:PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
规格:1次
·Phusion DNA聚合酶
编号:BTN130429
英文名称:Phusion DNA Polymerase
规格:100U
本产品是Phusion DNA Polymerase基因经过原核表达,并经多次纯化分离得到。该酶是由高保真Pfu DNA聚合酶和独特的双链DNA结合蛋白Sso7d融合而成,其结构示意图如下:
产品特点:
1.极强的DNA 持续合成能力,合成DNA 能力分别是Pfu DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的10倍和2倍。
2.快速,相比常用的DNA聚合酶,合成时间大大缩短,延伸速率为15-30s/kb。
3.可以短时间内高效、高保真扩增长片段DNA,最长可以扩增20Kb。
4.具有 5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性,是目前保真度最高的热稳定性聚合酶,保真性是Taq DNA聚合酶的50倍,Pfu DNA聚合酶的6倍。
5.Phusion DNA聚合酶扩增的PCR产物为钝端双链DNA,不能直接用于AT克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Phusion DNA Polymerase,2U/μL | 50μl |
| 5×Phusion HF Buffer | 2×1.5ml |
| 5×Phusion GC Buffer | 1.5ml |
| 50mM MgCl2 Solution | 1.5ml |
| 5×PCR Enhancer | 500μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:DNA 模板、引物、dNTP、超纯水等。
使用方法:(以50μL的PCR反应体系为例)
1.设置PCR反应,在一干净的PCR管中,依次加入下列成分:
| 5×Phusion HF Buffer | 10μL |
| DNA 模板(自备) | <250ng |
| dNTP(2mM each)(自备) | 5μL |
| PCR引物(自备) | 10pmol each |
| 5×PCR Enhancer(选择添加) | 1.5μL |
| Phusion DNA Polymerase | 0.5μL |
| 补超纯水到 | 50μL |
注:
⑴ 如果反应体系不是50μL,各成分需按等比例增加或减少,也可根据PCR特点自行调节Phusion DNA Polymerase、模板和引物的用量,进行体系优化。
⑵ 对于扩增困难或序列较长的模板(如富含GC的或具有复制二级结构的),可用5×Phusion GC Buffer 代替5×Phusion HF Buffer来进行PCR反应。
⑶ 请最后将Phusion DNA Polymerase 加入到反应体系内,防止该酶具有的外切酶活性降解引物。
⑷ 5×Phusion HF Buffer中已含有1.5mM MgCl2。如有需要,可根据PCR反应特点额外添加MgCl2。
⑸ 对于GC含量较高的模板,可选择性加入5×PCR Enhancer。
2.PCR反应参数:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 98℃ | 30s-3min |
| PCR反应(25-35个循环) | 98℃ | 5-10s |
| 45-72℃ | 10-30s | |
| 72℃ | 15-30s/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5-10min |
3.反应结束后取5-10μL反应产物,琼脂糖凝胶电泳分析。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京BTN130637型Tma核酸内切酶III厂家价格。
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文献和实验首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心 肖白 感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等。这些病原体的传统检测方法通常采用形态学检查,体外培养和免疫学试验。但对某些难以培养的病原体,抗原抗体检测不能判断体内病原体 DNA 或 RNAde 复制情况,或存在检测灵敏度低等问题。自聚合酶链反应( PCR )技术
图像分析系统,Alpha Innotech公司; 20. XK96-B微型旋涡混合仪,江苏省姜堰市新康仪器厂; 21.85-2型恒温磁力搅拌器,上海仪表(集团)供销公司; 22. TY-B型多用脱色摇床,上海市新波无线电厂; 23. DEM-III型自动酶标洗板机,北京拓普分析仪器有限责任公司; 24. PVDF膜,美国Millipore公司; 25. Model 550型酶标仪,美国BioRad公司。 实验材料
器、绘图仪,绘出的峰是通过手工测量计算峰面积。后来的高压泵精度很高并可编程进行梯度洗脱,柱填料从单一品种发展至几百种类型,检测器从单波长至可变波长检测器、可得三维色谱图的二极管阵列检测器、可确证物质结构的质谱检测器。数据处理不再用绘图仪,逐渐取而代之的是最简单的积分仪、计算机、工作站及网络处理系统。 目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters公司、Agilent公司(原HP公司)、岛津公司等,国内有大连依利特公司、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。 一、输液泵 1.
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