北京柱式凝固血液DNA提取试剂盒价格

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北京柱式凝固血液DNA提取试剂盒价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多柱式凝固血液DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：北京柱式凝固血液DNA提取试剂盒价格
编号：BTN71204
品牌：百奥莱博
规格：50次
产地：国产|进口
本试剂盒是凝固血液DNA提取试剂盒(BTN71002)的升级产品，专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组DNA。

产品特点：
1. DNA更加纯净，OD260/280在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作更加简单快捷，比凝固血液DNA提取试剂盒快十分钟以上。
3. 每克新鲜凝固全血DNA产量为20-50μg DNA。
4. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取1mL到10mL或15mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2. 称取凝固血液0.1-0.5 g，加入到预热的溶液A中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
 注意：如果是干的血块，用量不要超过0.2g，但需将干血块剪成微小的碎片。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟，然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。
 注意：尽量不要转移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5分钟。
5. 12000～15000g室温离心3分钟，将上清液转移到新的1.5mL离心管中。
 注意：如果上清液呈红色，属于正常现象。
6. 加入0.2mL的自备*仿，震荡器上充分振荡30秒混匀。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物。将不超过0.6mL的上清液小心转移到新的1.5mL离心管中。
8. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀后分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要12000～15000g离心半分钟并弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟。
10.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
11. 12000～15000g离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意：此步不能省略，否则残留的通用洗柱液会影响DNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中，加入100μL 通用洗脱液，12000～15000g离心半分钟，管底溶液即DNA溶液，可立即使用或放冰箱长期保存。

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·包涵体大量纯化试剂盒
编号：BTN90510
英文名称：Inclusion Body Maxiprep Kit
规格：2次
本产品是包涵体微量纯化试剂盒的大提升级产品，用于大量，快速的提取高质量的包涵体。

产品特点：
1.大量提取，1次可处理多达5升的菌液，相当于50次中量提取。
2.适合制备级别的包涵体纯化，需在50mL以上的离心管或离心瓶中完成。
3. 能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白在包涵体中所占比重达到60%以上。
4. 即可以选择高压裂解法，也可以采用酶学裂解法裂解细菌。
5. 得到的包涵体可以用于重折叠，也可以用于凝胶层析和动物免疫。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100mL
溶液B	250mL×2
包涵体溶解液	100ml
溶菌酶	100mg
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存(溶菌酶需要-20℃保存，包涵体溶解液可以室温保存)，有效期一年。

自备试剂：如果得到的重组蛋白确有降解则需要自备蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。

使用方法：

一．细胞沉淀：
1．转移1-5升菌液到干净的、预称重量的塑料离心瓶中。如果离心瓶体积不够大，可以分多次反复离心收集。
2．5000g(相当于Sorvall GSA转头5500rpm)4℃离心15-30分钟，小心弃上清。
3．复称重量，差值就是细菌的湿重。1升的过夜培养的大肠杆菌湿重一般为3克，所以1-5升菌液一般能得到3-15克细菌。注意：后续操作的很多溶液都是按此步得到得细胞湿重添加。
4．细胞沉淀可以立即使用或存放在-80℃待用。

二．细胞裂解(下面两法中选其一)：
 高压破碎法(French Press)+超声法(推荐方法)
1．按每克细菌湿重加入3mL溶液A重悬细胞，可以用玻璃棒搅拌或用Waring捣碎机匀浆(如果细菌湿重超过10克)使细菌悬浮，直到检测不到成块的细胞为止。如有必要，可以加入溶菌酶干粉，使其终浓度为0.2mg/mL。
2．让细胞通过压力为16000-18000 lb/in2的高压细胞破碎仪，收集的细胞裂解液需放冰上。
3．重复上步操作一次或多次，直到绝大部分细菌都被裂解。注意：每次处理后最好在显微镜下检查细菌裂解的比例。
4．将细胞裂解液置于冰浴中，用超声破碎仪满功率下超声处理5分钟，工作状态为50%(开0.5秒，关0.5秒)。此过程中最好将细胞裂解液放冰上并用磁力搅拌器搅拌，否则产生的热量会使包涵体蛋白变性，在纯化中丢失。
 酶法+超声法(在没有高压破碎仪器时首选方法)
1．按每克细菌湿重加入3mL的含溶菌酶的溶液A重悬细胞，可以用玻璃棒搅拌细菌沉淀使之悬浮。
2．在细菌悬浮液中加入溶菌酶干粉，使其终浓度为0.2mg/mL，搅拌混匀后37℃放置30分钟裂解细菌，其间不时需要用玻璃棒混匀。细菌释放出的DNA将使裂解物变得十分粘稠。如果不粘稠，说明裂解不充分，需要继续裂解，否则完整细菌将和包涵体一起沉淀，影响包涵体的纯度。由于处理量大，最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
3．将细胞裂解液置于冰浴中，用超声破碎仪满功率下超声处理5分钟，工作状态为50%(开0.5秒，关0.5秒)。此过程中最好将细胞裂解液放冰上并用磁力搅拌器搅拌，否则产生的热量会使包涵体蛋白变性，在纯化中丢失。

三．包涵体纯化：
1．将超声处理的细胞裂解液转移到离心瓶中，22000g 4℃下高速离心60分钟(注意：转子不同其对应的离心速度不同)，小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白，可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
2. 将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在预冷的溶液B中。每克细菌需要5mL溶液B，1升细菌的湿重约3克，大约需要15mL溶液B，用玻璃棒或匀浆器搅拌混匀后室温放置5分钟。
3．22000g 4℃下高速离心30分钟，沉淀将出现三层，最下面的是未彻底破裂的细胞碎片，其上是包涵体，最上层的松软沉淀是细胞壁和细胞外膜。如果处理过程中使用过溶菌酶，则此层较薄。小心收集上清，可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
4．重复第8-第9步直到上清变清和最上层细胞壁和细胞外膜松软沉淀消失，此过程一般需要重复洗涤2次(共3次洗涤)，小心收集上清作为包涵体第二次洗涤和第三次洗涤的对照样品。本试剂盒提供的溶液B足够一次5升规模的提取洗3次，如需更多溶液B请单独购买。
5．上步得到的沉淀即为包涵体，其中重组蛋白一般占60%重量，其余40%为其他蛋白质。此沉淀可以长期放置在-80℃冰箱待用，也可以直接用于免疫动物制备抗体，还可以直接进入下面得包涵体的溶解步骤。
6．估计重组蛋白的产率：首先需要通过预实验知道重组蛋白的表达水品，如果表达水平为1%，则1克湿重的细菌中将含有1mg重组蛋白质。此法得到的重组蛋白质的回收率一般在75%，即1mg重组蛋白质能得到0.75mg，丢失0.25mg。

四．包涵体的溶解：
1．在室温下，将包涵体溶解液加入到包涵体沉淀中，用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果需要将溶解的包涵体直接用于凝胶过滤层析进一步纯化，则按每克原始细胞湿重加入1mL包涵体溶解液，重组蛋白的浓度约为4-5mg/mL；如果需要将溶解的包涵体直接用于蛋白质折叠，则按每克原始细胞湿重加入3mL包涵体溶解液，重组蛋白的浓度约为1-2mg/mL；注意：包涵体溶解液低温放置会产生沉淀，必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2．室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3．100,000g 4℃离心60分钟(转速需要根据离心机转子的大小换算)，小心收集上清，保留不溶性沉淀。注意：检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有，说明包涵体没有完全溶解，需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4．将上清(溶解的包涵体)分成10-20mL一份，放于塑料离心管中(不要超过离心管容量的70%)置-80℃长期保存或直接用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件，需要用户自己摸索。包涵体纯化过程中引入了溶菌酶，在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。


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·姬姆萨染色液(吉姆萨染液)
编号：BTN170502
英文名称：Giemsa Staining Solution
规格：250mL
本产品由溶液A(Giemsa Stain 储存液,10×)和溶液B(磷酸盐缓冲液)组成,溶液A：溶液B=1：9混合成工作液后使用；亦可以分开使用,即先用Giemsa Stain染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。

姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。本产品以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含本公司特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。

产品组成：

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输,室温避光保存,有效期一年。

使用方法：(仅供参考)

一、一步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制：
按照溶液A：溶液B=1：9 混合,即取1 份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1～3min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15～30 min。
4. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
5.(可选)0.1%乙酸分化数秒。
6.干燥,镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

二、两步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制：
按照溶液A：溶液B=1：4混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到4份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1～3min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染10～15min。
4. 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置15min。
5. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
6.干燥,镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

三、组织切片染色
1．Giemsa工作液的配制：
按照溶液A:溶液B=1:9混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2．新鲜组织立即置于Regaud固定液(按3%重铬酸*:甲醇=4:1 配置,用前混匀,1-2天即失效)固定2天,期间更换1次固定液。
3．3%重铬酸*固定1天。
4．流水冲洗16个小时或过夜。
5．照常规脱水、包埋。
6．切片厚度约为5μm,常规脱蜡至水。
7．蒸馏水清洗2次,每次1～2min。
8．入含Giemsa工作液染缸,浸染18～24h。
9．蒸馏水稍清洗。
10．0.5%乙酸清洗1～2min。
11．自来水稍微冲洗。
12．用无水乙醇迅速脱水3次,每次5～10s。
13．二甲*透明,中性树脂封固。

染色结果：

细胞核	蓝色至紫色
细胞质	淡蓝色
嗜铬细胞	黄绿色
结缔组织	淡红色

注意事项：
1．血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
2．涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3．如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
4．Giemsa涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,否则影响染色效果。
5．染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6．Giemsa组织切片染色中,染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
7．0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8．组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片亦褪色。
9．本染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。


北京柱式凝固血液DNA提取试剂盒价格关键词：柱式凝固血液DNA提取试剂盒,BTN71204,Coagulated blood DNA column extraction kit

PY02-281  靛基质培养基  250克  
精子形态学染色液(Shorr法)   3×20ml|3×100ml
ARB10836 人抗环胍*酸肽抗体(CCP)酶标法分析 Human anti-cyclic citrullinated Peptide,ccp ELISA KIT
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硅烷偶联剂KH550 Tetracosane 919-30-2
脂蛋白a(Lp-a)检测试剂盒(免疫比浊比色法)   100T
ARB10319 人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)酶联免疫定量检测 Human neutrophilic alkaline phosphatase,nap ELISA KIT
ARB12591 大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)尿液中含量检测 Rat matrix metalloproteinase 7,mmp-7 ELISA KIT
ARB12043 大鼠乙酰胆碱脂酶(AChE)elisa测定使用说明书 Rat acetylcholinesterase,ache ELISA KIT
PY02-187  0.5%乳糖发酵培养基  250克  
PBS-EDTA缓冲液(pH7.4)  4×PE 500ml
BL0959 胶体金标记兔抗猪IgG抗体
BOC-D-*丙*酸 Cedarwood oil 18942-49-9
107021-38-5 x-α-gal
β-羟丁酸脱*酶 SPS 9028-38-0
BL1400 细胞核提取试剂盒
D-正亮*酸 DL-Trytophan 327-56-0
F030842 BIOTIN标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY*BIOTIN
亚苄基丙*(代"酮") Acid alizarin blue B 122-57-6

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