北京真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的北京真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂说明书用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：北京真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂说明书
英文名：Protease Inhibitor for Yeast
规格：1mL
编号：BTN130529
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液，溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时，抑制各种内源和外源蛋白酶活性，防止蛋白质降解。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广，能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容，在裂解液中加入1/100体积即可。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

关于北京真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·茜素红S染色试剂盒
编号：BTN121105
英文名称：Alizarin Red S Staining Kit
规格：100mL
茜素红S染色试剂中的茜素红S可通过与*离子和其他金属离子发生鳌和反应而形成可以在显微镜下直接观察的带颜色的复合物。本产品就是基于此原理而开发。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要单独准备各种溶液。
2．操作简捷，性能稳定，显色清晰。
3．可用于组织切片中的*沉积，尤其适用于骨细胞或组织的病理和生理研究。
4．可用于检测动物原生代或培养细胞的*沉积。
5．本产品为通用型，不但用于*离子的检测，还可用于FeCl2和CdCl2的检测。

试剂盒组成：

 

成分	规格
茜素红S染色	100ml
茜素红S pH调节液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
注意：试剂具有腐蚀性，操作时须带手套。实验时可以用含金属离子的切片或培养细胞作为阳性对照。可溶性蛋白会干扰茜素红S与*的相互作用，所以样品必须经过固定处理(以去除细胞中的可溶性蛋白)。对培养细胞，还必须洗涤去掉培养基(含血清等蛋白成分)。茜素红S与*的螯合反应需要在水相发生，因此加入茜素红S 前最好用水溶液洗涤掉前面操作所残留的有机溶剂。

一、茜素红S染色液的准备
1、根据所需检查的金属离子按下表选择茜素红S染色液的最佳pH。

金属离子	最佳PH	呈现的颜色
CaCl2，CaPO4、CaCO3	4.28-6.75	橙红
FeCl2	5.62-8.05	深紫
CdCl2	5.11-5.78	品红

2．用茜素红S pH调节液将茜素红S染色液调到所需的pH值。

二、染色载片上细胞
3．用缓冲中性福尔马林、福尔马林-乙醇混合液或乙醇作为固定剂固定铺在载玻片上的细胞(本试剂盒不提供上述固定剂)。
4．将细胞放入95%乙醇中处理。
5．将载玻片在空气中干燥。
6．将载玻片放在装有茜素红S染色液的染色缸中染色1-5分钟。注意：此步需要密切控制，最好每隔一分钟放在显微镜下检测，最佳时间随样品中盐离子的多少不同而不同。
7．用蒸馏水洗涤载片一次。
8．用丙*(代"酮")浸泡载波片30秒。
9．用丙*(代"酮")-二甲*混合液(50：50)浸泡浸泡载波片15秒。
10．肉眼可见红色或紫色(取决于所检查的离子)即可终止染色，放光学显微镜观察。*沉积阳性细胞将呈现桔红色。

三、染色石蜡包埋切片
11．按常规方法进行固定、包埋、切片、脱蜡和水化等操作，直到70%乙醇处理这步。注意：固定剂最好使用4%的副甲醛或10%福尔马林，切片厚度最好在0.4μm。
12．将切片浸入蒸馏水中。
13．将切片浸泡在茜素红S染色液中30秒-5分钟，具体时间以肉眼或显微镜下可见桔红色斑点为准。
14．用滤纸吸尽染色液后浸入丙*(代"酮")20次。
15．再进入丙*(代"酮")-二甲*混合液(50：50)20次。
16．最后用二甲*处理并用封固剂封片。

四：染色细胞培养(最好是26或6孔培养板培养的细胞，便于在显微镜下观察)
17．小心抽去培养液，注意不要吸走细胞。
18．沿壁上缓慢加入1-2mL自备的1×PBS或HBSS缓冲液，然后再小心将加入的液体吸出。
19．每孔中加入自备的无水乙醇直到全部覆盖细胞，室温放置30分钟后小心移弃无水乙醇，室温晾干。此步用于固定细胞。也可用10%甲醛代替无水乙醇，但固定时间只需要15分钟，同时还需要用蒸馏水洗涤3次才能进入下一步。每次洗涤时，先加入蒸馏水，再浸泡5-10分钟，然后小心吸走蒸馏水。注意：操作时不要破坏细胞单层。
20．每个细胞培养孔中加入1mL 茜素红S染色液，在室温下孵育至少20分钟，最后小心吸走茜素红S染色液。
21．加入1mL蒸馏水，然后小心吸走蒸馏水。此为洗涤步骤。注意：洗涤一定不要震荡以避免形成的*沉积物脱落。
22．重复上步操作3次(共洗涤4次)。
23.样品可立即用于显微镜检测。有*沉积的细胞将呈现桔红色。


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·无内毒素水
编号：BTN130502
规格：50mL

·酸洗玻璃珠(100μm)
编号：BTN100307A
英文名称：Acid-Washed Glassbeads(100μm)
规格：10g
本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠，它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分，主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子，因为用其他方法，包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。

产品特点：
1. 经过充分的酸洗，免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞，属于物理方法，不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好，同时不需要使用酶，因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间，非常快捷。注意：本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5mL的微生物样品。
5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表：

编号	玻璃珠直径	最适用途
BTN100307A	100μm	作为超声破碎细菌时的添加物
BTN100307B	200μm	破碎细菌
BTN100307C	400μm	破碎酵母(如酿酒酵母)
BTN100307D	800μm	破碎霉菌、孢子等

储存条件：常温运输及保存，保存期为两年。

使用方法：
以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例：离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞，加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克)，振荡器上以最高速度振荡10分钟，，再加入0.5mL溶液B，震荡2分钟，2000rpm离心2分钟，在上清中加入3倍体积的溶液C，上柱，用通用洗涤液洗两次，干甩一次，最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。

使用效果：

图注：使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液，最后用50μl DNA洗脱液洗脱，5μl用于琼脂糖电泳。电压300V，电泳时间5分钟，染料为绿如蓝，缓冲液为SuperBuffer。


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谷胱甘肽还原酶 Sepharose 6FF 9001-48-3
BL1244 10×MOPS 缓冲液
三磷酸腺苷酸 I-Carrageenan IOTA Type 56-65-5
ARB12742 小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)Elisa定量检测 Mouse n-terminal procollagen Ⅲ proPeptide,pⅢnp ELISA KIT
FPA固定液   500ml
ARB10682 人全段甲状旁腺素(I-PTH)Elisa方法检测 Human intact paRathormone ,i-pth ELISA KIT
CV0401 pBLUE-T 载体连接试剂盒
ARB11260 人胃癌标志物代做ELISA实验 Human gastric carcinoma marker ELISA KIT
DP320 新型植物基因组提取试剂盒
PY02-243  亚利桑那菌琼脂(SA)  100克  
单硬脂酸甘油酯 Actin from rabbit muscle 123-94-4
C1301 豚鼠血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
PY02-275  营养琼脂(GB)  250克  
精子稀释液(计数液)   100ml
ARB10833 人抗卵巢抗体(AOAb)酶标法分析 Human anti-ovary antibody,aoab ELISA KIT
206752-36-5 Benzamidine  苄眯
ARB10946 人谷*酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)检测服务 Human glutamic acid decarboxylase autoantibody,gad-ab ELISA KIT
ARB11712 人链球菌(Streptococcus)ELISA检测服务 
4-甲基七叶亭 Grease of high temperature Ⅲ 529-84-0
ARB10875 人抗胰蛋白酶(AT)酶免分析 Human anti-trypsin,at ELISA KIT
ARB10170 人T细胞活化连接蛋白(LAT)酶标法分析 Human linker for activation of t cell,lat ELISA KIT
DL-组*酸 Fmoc-Glu(OtBu)-OH 4998-57-6

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