miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)品牌，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)品牌
产地：国产|进口
英文名：miRNA isolation Kit(Gel method)
品牌：百奥莱博

miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
编号：BTN80806
英文名称：E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。

菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·T3 RNA聚合酶
编号：BTN120309
英文名称：T3 RNA Polymerase
规格：1000U
本酶是噬菌体T3 DNA编码的酶，对T3启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5´→3´的RNA聚合酶活性，以含有T3启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。

产品用途：
1．为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2．制作 RNA 剪接反应的前体。
3．以帽类似物为引物，制作Capped mRNA。

产品组成：

 

成份	规格
T3 RNA聚合酶	50μL(20U/μL)
5×转录缓冲液	0.25mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。

·Levaditi硝酸*(代"银")法螺旋体染色试剂盒
编号：BTN160655
英文名称：Spirochaeta Staining Kit(Levaditi silver nitrate method)
规格：3×50ml
本产品是利用螺旋体具有的嗜银性，在一定条件下螺旋体可从银液中吸附银离子，经还原液处理后，螺旋体内吸附的银离子被还原为黑色的金属银而显色。该染色液主要用于显示梅毒螺旋体，亦可显示钩端螺旋体，但较少显示热回归螺旋体，对肝脏梅毒树胶肿和肝脏钩端螺旋体具有鉴别作用。

螺旋体是一类细长、弯曲呈螺旋状、运动活波的原核细胞型微生物，具有细菌的基本结构，细胞壁有脂多糖和壁酸。螺旋体分为密螺旋体(如梅毒螺旋体)、疏螺旋体(如回归热螺旋体)、钩端螺旋体等。梅毒螺旋体有8～12均匀的螺旋，两端尖直；钩端螺旋体细长，数目较多而且细密，一端或两端弯曲呈钩状，菌体亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋体和钩端螺旋体可用镀银法进行显色，如Levaditi法、Warthin-Starry法。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	2×50ml
溶液B1	25ml
溶液B2	25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃避光保存，其中溶液B1、B2室温避光保存，有效期3个月。

使用方法：(以下步骤仅供参考)
1．临用前，将溶液B1与溶液B2 按照1:1 比例混合成溶液B，即用即配。
2．组织切片厚度1～2mm 为佳，置于10%福尔马林中固定2～4天。
3．流水冲洗过夜。
4．95%乙醇浸泡24h。
5．蒸馏水浸洗并不停摇动，直至组织下沉为止。
6．更换新的蒸馏水浸洗10min。
7．入溶液A，加盖置于37℃恒温箱孵育1 天，更换新的溶液A，继续37℃恒温箱孵育2天。
8．蒸馏水浸洗3次，每次10min。
9．入配制好的溶液B，加盖室温避光孵育2 天。
10．蒸馏水浸洗3次，每次2min。
11．常规脱水透明，浸蜡包埋。
12．切片厚度6～8μm，贴片，烤干。
13．二甲*脱蜡2次，中性树胶封固。

染色结果：

梅毒螺旋体、钩端螺旋体	黑色或棕黑色
背景	淡黄至棕黄色

注意事项：
1．实验所用器皿需用硫*(代"酸")洗液浸泡，洗干净。
2．步骤5、6的洗片步骤很有必要，一定要把组织中的甲醛和乙醇彻底清除，否则易导致组织内银盐的沉淀。
3．某些细菌和真菌菌丝也会被该染液染成黑色，应注意螺线体为螺旋状形态，并加以鉴别。
4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞
编号：BTN130562
英文名称：E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Tuner(DE3)为常规表达宿主菌，用于一般蛋白表达，lac 透性酶突变，可以精细控制表达水平。无抗性。

基因型：F–omp T hsd SB(rB– m–)gal dcm lacY1(DE3)

储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。

·动物细胞核蛋白微量制备试剂盒
编号：BTN90613
英文名称：Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
规格：25次
DNA只存在于细胞核内，因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中，要研究蛋白质与DNA的相互作用，首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐，一次处理大量样品时尤其不便，为此本公司开发了本产品，用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取。

产品特点：
1. 提取制备过程简便，只需要一小时。
2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜组织细胞。
4. 制备的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。
 

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	2.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
实验前准备：取适当量的溶液A和溶液B置于冰上，在使用前数分钟内分别向溶液A和溶液B中加入自备的PMSF和DTT，使PMSF的最终浓度为0.2mM，DTT的最终浓度为1mM。实验中所用试剂均需先预冷。

一、对培养细胞和悬浮细胞：
1. 对培养细胞：将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的胰酶溶液(BTN90306)按标准的胰酶法处理，然后刮到1.5mL塑料离心管中，4℃ 800g离心30秒，小心弃上清。
2. 对悬浮细胞：直接将5×105-7个的悬浮细胞转移到1.5mL塑料离心管中，4℃800g离心30秒，小心弃上清。
3. 用1.5mL自备的预冷的PBS缓冲液洗涤细胞沉淀一次，然后4℃离心后弃上清。
4.在细胞沉淀中加入400μL预加了PMSF和DTT的溶液A，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。
5. 冰浴10分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
6. 4℃ 2500g离心10秒，小心弃上清。
7.在沉淀中加入100μL预加了PMSF和DTT的溶液B，轻轻混匀使沉淀悬浮起来。
8. 冰浴 20分钟。
9. 4℃ 12000-16000g离心10分钟，小心收集上清液(细胞核提取物)，可立即用于后续的凝胶滞后实验、BCA法蛋白浓度测定或活性检测等实验，也可以分装后放-70℃长期保存。
 说明：本方法可以从1×10⁶的细胞中得到50-70ug的核蛋白质。

二、对新鲜组织：
10. 将100-150mg 新鲜组织置于培养皿中，用手术剪将组织尽可能切成非常细小的碎片，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，用自备的预冷的PBS洗涤2次，离心后去上清。在组织沉淀中加入400μl预加了PMSF和DTT的溶液A，冰浴或4ºC下在Dounce或Potter 玻璃匀浆器(BTN101103 ，可向本公司订购)内充分匀浆，一般上下手动匀浆30-50次(匀浆后应镜检，细胞破碎率不小于90%，同时没有明显的组织小块)。
11. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来，冰浴放置10-20分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
12. 接下来按照步骤6-9操作，即得到新鲜组织细胞核蛋白提取物。

注意事项：
1. 所有接触样品的用具和试剂均需预冷，以免蛋白质的降解及失活。
2. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
3. 本试剂盒只适用于新鲜的组织样品，对冻存过的组织抽提效果不是很理想。

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