北京现货PCR Mix染料特价优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货PCR Mix染料特价优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货PCR Mix染料特价优惠
规格：10mL
编号：BTN131212
品牌：百奥莱博
英文名：PCR Mix Dye
本产品可加入到PCR反应液中，使PCR产物可直接上样电泳，其分子量相当于50bp大小的DNA片段，不干扰观察。
注：本产品不是PCR荧光染料，是一类可见光染料(类似电泳用的*酚蓝，二甲*蓝等指示剂)

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

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·3M乙酸*溶液(pH5.2)
编号：BTN101202
规格：250mL

·血液细胞核DNA和线粒体DNA共提试剂盒
编号：BTN120810
英文名称：Blood nuclear DNA and mitochondrial DNA extraction kit
规格：25次
本试剂盒是在本公司血液DNA提取试剂盒产品基础上开发的、专门用于从新鲜或冷冻的哺乳动物抗凝全血中同时提取细胞核DNA和线粒体DNA的试剂。

产品特点：
1.一份样品可以同时得到细胞核DNA和线粒体DNA，节约宝贵的实验材料。
2. DNA产率高。细胞核DNA产率一般为30-50μg/mL 新鲜血液，线粒体DNA产率约为1μg/mL 新鲜血液。陈旧血液DNA产率差别较大。
3. DNA 纯净，OD260/OD280在1.8-2.0 之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4.适用于哺乳动物血液，不适用于其他动物血液。
5. 所用试剂安全无毒，健康环保。

试剂盒组成：

 

成分	规格
红细胞裂解液D型	250mL
溶液A	25ml
溶液B	2ml
溶液C	5ml
DNA 洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：

一：白细胞核和线粒体的分离
1. 将3mL 用EDTA 抗凝管收集的新鲜血液转移到一个干净的15mL塑料离心管中。注意：最好使用新鲜血液。对于陈旧血液，由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤，所以DNA 得率会大大减少，具体减少多少根据冻凝时间长短不同而不同。
2. 向血液中加入等体积(3mL)的D型红细胞裂解液；轻柔颠倒数次混匀，室温静置10分钟以裂解红细胞和白细胞的细胞膜，直至溶液变成清澈的红色。注意：D型红细胞裂解液一旦打开后，非常容易污染细菌，未用完的部分最好-20℃保存，下次使用前，要溶解后充分摇匀。
3.室温下1000 g离心10分钟沉淀白细胞核。
4.转移上清(含线粒体)到新的15mL塑料离心管中，注意不要触及白细胞核沉淀。
5.在白细胞核沉淀中加入3mL D型红细胞裂解液。轻柔颠倒数次混匀后，室温下1000 g离心10分钟以沉淀白细胞核。
6.转移上清(含线粒体)到第4 步所得的、已经含有上清的15mL塑料离心管中。
将白细胞核沉淀放置冰上，和即将准备好的线粒体一起用于DNA提取，也可以放置在-20℃待用。
7. 将汇集的含线粒体的上清于4℃下15000g离心30分钟。
8.小心移弃上清，小心将线粒体沉淀重悬在1mL D型红细胞裂解液中，然后转移到1.5mL塑料离心管中，15000g离心5分钟，移弃上清得到线粒体沉淀。
9. 用1mL D型红细胞裂解液洗涤线粒体2次(每次先重悬线粒体，再15000g离心5分钟得沉淀)。
10. 所得线粒体可以直接用于DNA提取，也可放置在-20℃待用。

二：DNA的提取(下面步骤为白细胞核DNA提取和线粒体DNA提取通用)
11.在白细胞沉淀或线粒体沉淀中加入0.5mL溶液A，用移液枪吹打数次混匀后再加入75μL溶液B，混匀后于55℃温育10分钟。注意：溶液将成浑浊状。
12. 再加入0.2mL溶液C充分颠倒混匀。
13.在4℃下13000g离心20分钟后，将上清(含DNA)转入一新的1.5mL塑料离心管中。
14. 加入两倍体积的自备无水乙醇充分震荡混匀后，室温13000 g离心5分钟，去尽上清。
15. 加入1mL 75%乙醇，充分混匀后室温13000g离心5分钟，去尽上清。
16. 重复上步一次。
17. 短暂离心，去尽残留溶液(此步十分重要，不要省略)。
18. 短暂晾干半分钟，加入适量DNA 洗脱液2.0 溶解DNA(对细胞核DNA，可加入500μL DNA 洗脱液2.0，对线粒体DNA，可加入50μL DNA 洗脱液2.0)。
19. 65℃保温15分钟以便彻底溶解DNA沉淀。溶解后的DNA可以立即用于后续的OD 检测、酶切、PCR或其他实验，也可以放置在-20℃长期保存。


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·cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)
编号：BTN90407C
英文名称：Lambda DNA
规格：5μg
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA，是一种常见的DNA底物，分子量为31.5×106Da/48502bp，浓度为200～500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

储存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

纯度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。


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·1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级)
编号：BTN101207
规格：250mL

·3M乙酸*溶液(pH5.2)(RNase-Free)
编号：BTN60703
规格：250mL

·大提柱式动物DNA提取试剂盒
编号：BTN80923
英文名称：Animal DNA Column large-scale extraction kit
规格：4次
本试剂盒在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)基础上改良而得的大提升级产品，主要用于大量快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。

产品特点：
1.处理量是柱式动物DNA提取试剂盒的10-20倍。
2. DNA 纯净，大多数DNA样品的OD260/280 值在1.8-1.9之间，无可见的RNA污染，可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
3. DNA产率一般在0.5-2mg/g(具体跟组织有关)。
4.快速，整个过程室温操作约需20分钟。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
大提离心吸附柱	4套
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

使用方法：
1.溶液A和溶液B在放置在4℃放置可能会产生沉淀，用前需要在65℃水浴中加热直到沉淀全部溶解，用前还需要充分摇匀。
2. 估算组织细胞的用量。每次大量提取一般需要1-5g动物组织、剪切成小块。
3. 先将剪切成小块的动物组织，放入50mL塑料离心管中，加入25mL溶液A，然后用匀浆器匀浆。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。
4. 65℃保温5分钟。
5. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
6.小心将上清液转移到一新的50mL塑料离心管中。
 注意：下面第7-9 步的*仿抽提操作可以省略，直接进入第10 步，但DNA的产量会低30%左右，OD260/280不受影响。
7. 加入5mL的自备*仿，振荡器上充分振荡混均30秒。
8. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
9.小心将上清液转移到一新的离心管中。
10. 加入等体积的溶液B，充分混匀。
11.一次或分两次上柱，每次上柱后室温放置2分钟。12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
12. 加25mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
13. 重复上步一次。
14. 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的50mL塑料离心管中，加入1mL 通用洗脱液。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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