核酸外切酶I厂家价格

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名称：核酸外切酶I厂家价格
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN120410
英文名：Exonulease I
核酸外切酶I是单链特异性3´→5´核酸外切酶，从ssDNA的3´-OH末端分解生成5´-单核苷酸。本酶对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。

产品特点：
➤ PCR反应后残存Primer的分解，对PCR产物进行测序时，如果在反应体系中残存Primer和dNTP，测序反应则不能正常进行。使用Exonuclease I可以解多余的Primer；同时使用SAP(BTN120403)可降解多余的dNTP，之后不需要对 PCR产物进行精制，立即可以进行测序反应。
➤ P在反应液中去除ssDNA fragment。

产品组成：

 

成分	规格
核酸外切酶I(5U/μl)	150μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

贮存Buffer：Tris-HCl(pH7.5)20mM，EDTA 0.5mM，DTT1mM，Glycerol 50%。

反应Buffer(10×)：Glycine-KOH(pH9.5)670mM，DTT 10mM，MgCl2 67mM。

热失活：80℃热处理15分钟

活性定义：以热变性的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH9.5的条件下，30分钟内产生10nmol的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

纯度
1．25U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．25U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．25U的本酶和1μg的M13 mp18 ssDNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
4．25U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

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生理盐水(无菌)  1×NS|10×NS 500ml
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核酸外切酶I厂家价格关键词：BTN120410,核酸外切酶I,Exonulease I

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宽范围彩色预染蛋白Marker 
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*化镧 2,4-D 10025-84-0
肌苷酸二* Floridin 4691-65-0
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BTN130552 碱性磷酸酶,偶联级 Alkaline Phosphatase,Conjugation Grade
人工唾液   500ml|5L
核酸外切酶I厂家价格关键词：BTN120410,核酸外切酶I,Exonulease I


·大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
编号：BTN80806
英文名称：E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。

菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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