Percoll促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应Percoll促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：Percoll促销
品牌：百奥莱博
规格：250mL
产地：国产|进口
Percoll是一种常用的低粘度的密度梯度介质，由直径在15-30nm的硅胶颗粒组成，颗粒外包被了聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮(PVP)，为化学惰性，不会影响细胞的活性。

产品特点：
1．Percoll渗透压很低(<20mosm/kg H2O)，粘度也很小，可形成高达1.3g／ml 密度。
2．采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。
3．离心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度，可用于分离各种悬浮的细胞、线粒体、叶绿体和病毒(可小到70S)。
4．由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
5．Percoll溶液高压灭菌，必须进行不添加盐或蔗糖。盐的存在会引起percoll糊化，蔗糖的存在会引起焦糖化。

储存条件：常温运输和保存，有效期五年(未开封状态)。

使用方法：
1．不同浓度(密度)Percoll溶液的制备：先用9 份Percoll与1份 8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。

 

Percoll浓度(％)	70	60	50	40	30	20
比重g/ml	1.090	1.077	1.067	1.056	1.043	1.031

2．不连续密度梯度Percoll层的制备：先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层Percoll 比重相差不大时，可将Percoll液放入注射器中，小针头斜面紧贴管壁，任其自然慢慢流下。
3．装样：样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异，一般加样体积不宜过大，细胞浓度也不可过高，否则会影响细胞的分离和回收。
4．离心：一般采用离心力为400g，时间20～25min。由于多层Percoll 之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
5．取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll 层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

分离纯化细胞举例
1．富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五种不同密度的Percoll,如用10ml 试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2～1.5ml，初步从外周血中分离的PBMC细胞1×10８悬于１ml培基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK 杀伤活性的LGL细胞位于42.5％与45％Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2．纯化淋巴母细胞和除去死细胞：分别叠加50％和30％Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者)，按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞；两层Percoll之间为淋巴母细胞，纯度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。

除Percoll促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·RecA蛋白
编号：BTN130661
英文名称：RecA Protein
规格：200μg
RecA在基因重组中是不可缺少的，它参与DNA 修复和紫外线诱导的突变。RecA促进lexA抑制子、umuD蛋白和lambda抑制子的自裂解。切割LexA能使20多种基因不再受到抑制。体外研究证明，在ATP参与下，RecA促进单链DNA片断与同源双链DNA片断发生链置换。

产品特点：
1．电镜分析DNA结构；
2．D环突变；
3．用RecA蛋白包被的探针来进行文库筛选；
4．切割任意一个预先设计的位点；
5．RecA导全长cDNA克隆的亲合捕获。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·病毒沉淀剂
编号：BTN110810
英文名称：Virus Precipitation Reagent
规格：100mL
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。

产品特点：
1. 能浓缩病毒100倍以上，适合各种病毒。
2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和，回收率更高，并且大部分病毒能保持活性，适合各种后续实验，包括转染实验和核酸纯化。
3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单，不需要大型离心机等设备。
4.适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品100mL可以处理400mL含病毒的溶液，可以将病毒浓缩100倍以上。
5. 已经成功用于coronaviruses 、rhabdoviruses 、parainfluenzaviruses 、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6. 对环境水样，请不要使用本产品，而是使用水体病毒沉淀剂。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：PBS缓冲液或TES缓冲液(用于重悬病毒)

使用方法：
注意：需要尽量减少含病毒溶液中蛋白的浓度。收集培养细胞分泌的病毒前，最好换上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培养基。
1. 将培养细胞刮下，和培养基一起全部转移到干净的离心管中，10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果培养细胞内还有病毒颗粒，并且病毒颗粒可以抵抗冻融，则可以把细胞冻融数次，释放出包浆的病毒，然后再转移到干净的离心管中，10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果病毒溶液不含细胞成分，则直接进入下一步。
2.在含病毒的上清中加入1/4 总体积的本产品(4mL 病毒溶液则加1mL 本产品)，4℃冰箱中放置过夜或12小时以上。病毒在此期间将形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃离心20分钟收集病毒沉淀，尽可能弃掉所有上清(可以暂时保留上清，等确认病毒浓缩成功后再丢弃)。
4. 将离心管放回离心机短暂离心数秒，再次小心去除残留上清。
5. 将沉淀(病毒颗粒)溶于适量预冷的自备的缓冲液(如PBS缓冲液、TES缓冲液和培养基中，取决于后续实验)，立即使用或者-20℃长期保存。


Percoll促销关键词：BTN131134,百奥莱博,Percoll


·DNA去磷酸化试剂盒
编号：BTN130828
英文名称：DNA Dephosphorylation Kit
规格：20次
分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体DNA 两个5´端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5´端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。

产品特点：
1.基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。
2. 把DNA和RNA 5´端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。
3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。
4.处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。

试剂盒组成

成分	规格
10×去磷酸缓冲液	100μl
细菌碱性磷酸酶(0.5U/μL)	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。

使用方法：
注意：dNTP和ATP 也是碱性磷酸酶的底物，所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP，一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶，降低DNA 去磷酸化效率。

1、在微量离心管中配制下列反应液(50μL)：

成分	用量
DNA片段	不超过10pmol
10×去磷酸缓冲液	5μl
细菌碱性磷酸酶	2.5μl
超纯水到	50μl

2、65℃反应30分钟。如果是RNA样品，建议在37℃反应30分钟。
3、酚*仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA 待用(见附)。

附：酚/*仿抽提DNA、乙醇沉淀浓缩DNA(本试剂盒不提供相关试剂，需要从本公司另购相关试剂，下列操作仅供参考)：
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超纯水增加体积，以免纯化过程中DNA 丢失。如果有必须，可以加入和4μL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入100μL 酚/*仿/异戊醇25：24：1 混合液震荡半分钟混匀，室温12000g离心3分钟，转移上清到新离心管中。
3、重复上步操作一次。
4、加0.1倍体积(即10μL)的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍体积(即250μL)的无水乙醇。
6、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
7、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
8、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
9、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。


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·AMPPD
编号：BTN131143
规格：100mg
AMPPD的CAS号是122341-56-4。常用做碱性磷酸酶的化学发光底物，其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时，便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。避免长时间暴露于光线下，请勿冷冻。

·柱式骨骼DNA提取试剂盒
编号：BTN91102
英文名称：Bone DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品，20次规格足够50次微量提取。

产品特点：
1. 微量提取，一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀，一般在20 Kb到100bp之间，具体取决于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50mL
溶液B	15mL
溶液C	30mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液2.0	10mL
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续PCR的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉，转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。(注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C，颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液，然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用，效果更佳。
13. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意：一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围，其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

我公司正在优惠促销细胞及免疫学等系列产品，期待您的咨询选购Percoll促销。