溶菌酶溶液(10mg/mL)批发

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百奥莱博专业生产供应溶菌酶溶液(10mg/mL)批发，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：溶菌酶溶液(10mg/mL)批发
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：1.5mL
编号：BTN100815
本产品是浓度分别为10mg/mL的蛋清型溶菌酶溶液，可以用于下列分子生物学实验。
➤ 核酸纯化；
➤ 包涵体蛋白纯化；
➤质粒DNA纯化；
➤ 几丁质的水解；
➤细胞壁的水解。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·dGTP溶液(2.5mM)
编号：BTN130914
英文名称：dGTP Solution(2.5mM)
规格：2mL
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2，消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·农杆菌GV3101化学感受态细胞
编号：BTN140384
英文名称：E.coli GV3101 Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
 本产品为GV3101农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和庆大霉素抗性，适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达104cfu/μg。

基因型：C58(rifR)Ti pMP90(pTiC58DT-DNA)(gentR/strepR)Nopaline。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在 28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1μg质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻 5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入50μg/mL kan，20μg/mL rif时，需 28℃培养 60h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要 28℃培养 72-90小时。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10 ；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/μL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有 50μg/mL kan，若所用平板含有 20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止 Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
6.相关抗生素配方：

 

抗生素	配方	原液	工作液
羧苄青霉素(carb)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
硫*(代"酸")卡那霉素(kan)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
链霉素(strep)	双蒸水溶解	10mg/mL	50μg/mL
利福平(rif)	DMSO溶解	10mg/mL	20μg/mL
庆大霉素(gent)	双蒸水溶解	20mg/mL	40μg/mL

溶菌酶溶液(10mg/mL)批发关键词：Lysozyme Solution,BTN100815,溶菌酶溶液(10mg/mL)


·印迹膜抗体稀释液
编号：BTN81208
英文名称：Antibody Dilution Buffer
规格：250mL
本产品用于稀释Western Blot抗体，即开即用，方便快捷。

产品组成：

成分	规格
抗体稀释液成分一	100ml
抗体稀释液成分二	0.5g
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、转膜(湿法电转移，本产品不含相关试剂)
1．制备湿法电转液：将湿法电转液干粉全部溶解在1L去离子水中得20×湿法电转液，用时用去离子水稀释20倍预冷待用。
2．根据PAGE胶的大小剪切同样大小的滤纸和各边都大1mm的硝酸纤维素膜(以下简称膜)。避免手直接接触膜。
3．将切好的膜浸泡在新鲜稀释的1×湿法电转液(下简称转移液)中15-20分钟。
 注意：最好用镊子夹住膜的一边轻轻置于转移液上，只让膜下层不转移液接触，通过毛细管作用使整个膜浸湿。避免让膜沉入转移液中，否则膜不转移液之间形成的气泡会阻止膜的湿润。
4．在容器中将两块海绵垫、六层滤纸用转移液浸湿。
5．在转移夹上依次放上一张浸湿的海绵垫、三层浸湿的滤纸、一块PAGE胶(只要分离胶部分)、一张浸湿的膜、三层浸湿的滤纸、一张浸湿的海绵垫。
 注意：每叠加层一定要用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。膜两边的滤纸绝对不能相互接触，否则电转移时会发生短路，烧坏装置。
6．合起转移夹幵放入转移槽中(一定要注意方向，转印带负电荷的蛋白质时电极方向是膜正胶负；转印带正电荷的蛋白质时，电极方向是膜负胶正)，然后用预冷的转移液灌满转移槽。
7．插上电极，一般在冷却条件下用100V恒压转移30-60分钟或冷室中14V转移过夜。
 注意：一定要检查电流的大小，电流一般在0.1-0.4A。应根据蛋白分子量的大小确定转膜时间，对于小分子量的蛋白，转膜时最好垫2张或更多张膜(最多可10 张)，即使白质已经转过了第一张膜，还会在其它膜上检测到；对于大分子量的蛋白，转膜时电压要高一点，时间也要延长一点，开始最好也用两块或多张膜。转移时间长的时候特别要注意加强降温措施。如果目的蛋白转移效率低，可以在转移液中加终浓度为20%的甲醇或0.1%的SDS。
8．终止转移后，取出膜，幵在膜上剪去一个小角以标记方向。如有必要可用自备的各种染液对胶或膜进行染色以确定蛋白质转移效率。

二、封膜(本产品不含相关试剂)
1．将膜转移至杂交袋中，加5-10mL Western封膜液后热密封杂交袋开口。
2．室温下用脱色摇床摇动杂交袋30-60分钟。

三、与一抗二抗结合
1．用5mL Western抗体稀释液(配制方法：将抗体稀释液成分二干粉到入成分一溶液中，溶解后即可。未用完的抗体稀释液需-20℃保存)将自备的一抗稀释至适当的倍数(一般需要稀释10-100000倍使用，最佳稀释倍数跟一抗效价相关，需摸索)。
2．剪开杂交袋的一角，倒去封膜液，加入5mL新鲜稀释的一抗溶液，加热密封杂交袋开口。
3．室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟。
4．用抗体稀释液将自备的HRP或AP标记的二抗稀释至适当浓度(一般需要稀释500-4000倍。最佳稀释倍数跟二抗效价相关，需摸索)。
5．剪开杂交袋的一角，倒去一抗溶液(可留存)，加入5mL新鲜稀释的二抗溶液，加热密封杂交袋开口。
6．室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟，也可过夜孵育。
7．剪开杂交袋的一角，倒去二抗溶液(可留存)。
8．剪开杂交袋，用镊子取出膜，用Western洗膜液在器皿中洗3次，每次10分钟。
9．根据二抗的标记酶选择下面两种显色方法之一。

四、HRP显色检测(对HRP标记的二抗，本产品A型，本产品不含相关试剂)
1．将膜平放，在吸附了抗原抗体的一面加入100-500μL TMB溶液A和100-500μL TMB溶液B，铺满整个膜表面(具体用量可按膜的大小增减)。
2．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，直至深蓝色条带出现。
3．用镊子夹起膜，放入去离子水中洗膜3次终止反应，每次30分钟。
4．空气中晾干后照相保存。
 注意：膜显色后的颜色在数小时后将会褪色，不能永久存在，故需要及时照相。

五、AP显色检测(对AP标记的二抗，本产品B型，本产品不含相关试剂)
1．用新鲜配制的1×AP缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟。
2．将膜转移到新配制的BCIP-NBT法AP显色液中，每cm2膜需要0.1mL显色液。新鲜配制BCIP-NBT法AP显色液(以10mL为例)的方法：将9mL去离子水、1mL 10×AP缓冲液、50μl BCIP溶液和50μl NBT溶液混匀。此溶液必须在1小时内使用。
3．室温摇晃5-30分钟显色(37℃可加速反应)。
4．显色到合适程度后用自备去离子水洗膜3次终止反应，每次30分钟。
5．用吸水纸吸干膜上的水分，避光干燥保存或在一周内照相。

六、Western抗体清除剂(说明：此处理可能会使蛋白质失去某些表位，本产品不含相关试剂)
1．将膜浸泡在Western抗体清除剂中，70℃摇晃孵育30分钟，去除一抗和二抗。用Western洗膜液洗膜两次，每次10分钟。
2．膜即可用于下一次Western检测的膜封堵步骤。


溶菌酶溶液(10mg/mL)批发关键词：Lysozyme Solution,BTN100815,溶菌酶溶液(10mg/mL)


·Furin蛋白酶
编号：BTN130867
英文名称：Furin Protease
规格：50U
本产品浓度为2000U/mL的Furin蛋白酶溶液，Furin蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶，定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括：凝血因子，血清蛋白和生长因子受体(如：胰岛素样生长因子受体)。最短的切割识别位点是：Arg-X-X-Arg。然而，该酶倾向作用于Arg-X-(Lys/Arg)-Arg位点。在 P6 位置的额外精*酸似乎能增强切割效率。Furin活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精*酸化合物抑制。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指30℃条件下，1分钟内从荧光肽BOC-RVRR-AMC上释放1pmol AMC所需要的酶量。

注意：底物的三维结构以及切割位点周围的*基酸类型会影响 Furin蛋白酶的切割特异性。

·RNA溶解液
编号：BTN130505
英文名称：Buffer that dissolves RNA
规格：10mL
本产品浓度为2000U/mL的Furin蛋白酶溶液，Furin蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶，定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括：凝血因子，血清蛋白和生长因子受体(如：胰岛素样生长因子受体)。最短的切割识别位点是：Arg-X-X-Arg。然而，该酶倾向作用于Arg-X-(Lys/Arg)-Arg位点。在 P6 位置的额外精*酸似乎能增强切割效率。Furin活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精*酸化合物抑制。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指30℃条件下，1分钟内从荧光肽BOC-RVRR-AMC上释放1pmol AMC所需要的酶量。

注意：底物的三维结构以及切割位点周围的*基酸类型会影响 Furin蛋白酶的切割特异性。

·SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒
编号：BTN160684-25A
英文名称：SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。

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