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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
- 库存:
429
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货环状DNA全基因组扩增试剂盒哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货环状DNA全基因组扩增试剂盒哪里卖
规格:30次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN100947
本产品基于WGA的、专门用于环状DNA(如质粒)扩增的全基因组扩增试剂盒,优化后的反应体系对环状DNA全基因扩增有良好的效果,可以方便、简单、快速、经济的得到环状DNA样品的扩增产物。
产品特点:
1. 线状DNA清除剂可以清除残留的线状DNA,保留环状DNA,包括超螺旋DNA、带裂口(nick)的环状DNA和带缺口(gap)的环状DNA。
2. WGA采用基于phi29 DNA聚合酶的MDA法,能得到平均长度在10Kb以上的扩增产物,还具有高产量和高保真性的特点。
3.可以将环状DNA扩增上万倍,是保留珍贵痕量DNA样品的唯一办法。
4.可使用各种环状DNA样品,包括质粒DNA,环状病毒DNA,线粒体DNA等。
5. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
6.产物可用于多种后续试验,包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 线状DNA清除剂溶液A | 100μl |
| 线状DNA清除剂溶液B | 30μl |
| WGA DNA变性液 | 75μl |
| WGA溶液A | 150μl |
| WGA溶液B | 300μl |
| Phi29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 超纯水 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除环状样品中的线状DNA(线状DNA量不超过5μg)
1.在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30μL体系):
| 成分 | 样品 | 正对照 | 负对照 |
| 自备DNA样品(1-10μg) | (样品) | (用环状DNA) | (用线状DNA) |
| 线状DNA清除剂溶液A | 3μL | 3μL | 3μL |
| 线状DNA清除剂溶液B | 1μL | 1μL | 1μL |
| 补水到30μl | 补水到30μl | 补水到30μl |
2. 加200μL石蜡油后,37℃保温16小时。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,所以最好保温16小时。必须加石蜡油,否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4.电泳检测酶切效果。本产品不清除带裂口(nick)和带缺口(gap)的环状DNA(如质粒),所以这些片段将不会消失。如果所含线状DNA超过5μg,则需要用非酶线性DNA清除剂清除或者稀释后用本法处理。
5. WGA扩增需要100pg-100ng的环状DNA,一般环状DNA的浓度都高于此范围,则需用超纯水将DNA稀释到40pg-40ng/μL,稀释过程中线状DNA清除反应中的成分也相应稀释,故一般不会影响后续WGA反应。如果样品中DNA浓度过低,则需要用微量核酸沉淀剂(需另买)沉淀后再溶解到适当体积的超纯水中,沉淀过程中线状DNA清除反应中的成分也被去除。
二、碱变性(对环状DNA,碱变性法一般优于热变性法,推荐用户使用)
6.在PCR塑料管中加入不超过2.5μL环状DNA样品。如果体积不足2.5μL,则用超纯水补齐。最好同时做一个不加样品的阴性对照。
7. 加入等体积(2.5μL)WGA DNA变性液,轻柔吹打混匀。
8.室温放置2分钟变性。
9. 加入5μl WGA溶液A,轻柔吹打混匀后立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。
三、热变性法
10.在PCR塑料管中加入1-5μL纯化好的环状DNA,用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
11. 加入5μL WGA溶液A,轻柔吹打混匀。
12. 如果不足10μL,补水到10μL。
13.在PCR仪器上 95℃加热变性3~5分钟,其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。
14. 热变性结束后短暂离心(将蒸发到管壁的水甩下),然后将样品管在冰上放置至少5分钟,立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。
四、WGA反应
15.在10μL碱变性或热变性的DNA样品中,加入10μL的WGA溶液B,轻柔吹打混合均匀。
16. 加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
17. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
18. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
19. 立即取2-5μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
20.扩增的DNA可以用于后续试验或放冰箱长期保存。
想要了解更多关于北京现货环状DNA全基因组扩增试剂盒哪里卖的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·Oligo快速复性液
编号:BTN130204
英文名称:Oligo Rapid Renaturing Solution
规格:1mL
本产品是精心优化的、专门用于Oligo快速复性的试剂,广泛用于以单链Oligo为材料制备Adaptor、Linker和其他双链Oligo分子,跟各种后续的分子生物学实验兼容,包括文库构建、抑制性差减杂交、AFLP等。本产品即可用于DNA-DNA Oligo复性,也适用于RNA-RNA Oligo和DNA-RNAOligo复性。还适用于带修饰碱基的Oligo的复性。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
·谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)
编号:BTN120101
英文名称:Glutathione Agarose
规格:2mL
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4%浓度的交联珠状琼脂糖基质,可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子,特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。
产品特点:
1.特异性高,不与非GST融合蛋白相结合。
2.高结合量,每毫升基质可结合5~10mg重组GST融合蛋白。
3.高度灵活,可填装任意品牌的柱子。
储存条件:低温运输,4℃保存(切勿冻结),有效期一年。
北京现货环状DNA全基因组扩增试剂盒哪里卖关键词:环状DNA全基因组扩增试剂盒,BTN100947,Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
·碘化丙啶(PI)干粉
编号:BTN130863
英文名称:Propidiumodide,Powder
规格:10mg
PI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测,常用于流式细胞仪分析。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
CAS号:25535-16-4
分子式:C27H34I2N4
分子量:668.39
储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。
·湿法电转液(干粉)
编号:BTN100928
英文名称:Wet Transfer Buffer Powder
规格:20L
本产品配制的溶液适用于湿转时,湿润、浸泡电转膜及垫子和用作电转工作缓冲液。用前直接加入蒸馏水与甲醇混匀即可。不含有机溶剂,便于储存和运输,且操作简便,一般适合分子量在100KD以上的蛋白。本产品可以回收重复使用2-3次,节约研发成本,如果转膜液颜色变成浅棕色或黄褐色,应该丢弃。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
北京现货环状DNA全基因组扩增试剂盒哪里卖关键词:环状DNA全基因组扩增试剂盒,BTN100947,Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
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002011 肝素*抗凝马血 100ml|500ml
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