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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Chinese herbal medicine DNA extraction kit
- 库存:
832
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京中草药DNA提取试剂盒厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京中草药DNA提取试剂盒厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Chinese herbal medicine DNA extraction kit
产地:国产|进口
基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA 比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,我们公司在植物DNA提取试剂盒产品基础上开发了本产品。
产品特点:
1.适合于大多数药材。
2. 得到的DNA 纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR 模板。
3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。
4. 试剂无毒无害,环保卫生。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 15ml |
| 溶液B | 15ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL 加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取20mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。
4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700μl,如果体积超过700μl,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。
6. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。
7. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
9. 重复*仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。
10. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀。
11. 12000~15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
12.沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)溶解沉淀。DNA 即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法彻底去除其中的DNase。
除北京中草药DNA提取试剂盒厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
·动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)
编号:BTN71201
英文名称:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
规格:50次
本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 50T |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
北京中草药DNA提取试剂盒厂家关键词:Chinese herbal medicine DNA extraction kit,中草药DNA提取试剂盒,BTN60805
·Real-Time PCR稀释液
编号:BTN130816
英文名称:Diluent for Real-Time PCR
规格:1mL
本制品是制作标准曲线时用于梯度稀释DNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或模板RNA如果用水或TE稀释时,由于受Microtube的吸附作用等原因的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品稀释DNA或RNA样品时,即使稀释至低浓度也能够准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
注意事项:为避免样品间的交叉污染,最好适量分装或小份后保存。
·6nt随机引物(0.5 ug/uL)
编号:BTN100409
英文名称:Hexamer
规格:5μg
本产品为长度为6nt的随机引物,序列为5´-(NNNNNN)-3´,主要用于以任何RNA为模板合成cDNA,也可以用于DNA探针的随机引物标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:
Q:在合成cDNA时,使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别?
A:只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物,而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。
·核酸浓缩剂
编号:BTN110801
英文名称:Nucleic Acid Concentrate
规格:30mL
稀的核酸溶液一般可以用乙醇沉淀的方法浓缩,此方法的优点是在浓缩核酸的同时还可以去除盐离子等小分子物质,其缺点是操作步骤较长,容易丢失核酸沉淀。本产品是不需要乙醇沉淀的核酸浓缩剂,它通过反复提取,逐渐去除溶液中的水分,使核酸溶液浓缩。
产品特点:
1. 操作简单快捷,只需离心处理。
2. 回收率高,核酸回收率一般都在95%以上,尤其适合回收珍贵的核酸样品。
3.浓缩倍数可以自己决定。
4. 既可用于Oligo,也可用于DNA和RNA分子。
5. 既使用于RNA溶液,也使用于DNA。
6. 既可用于单链核酸,也可用于双链。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 根据核酸的体积加入等体积的本产品,振荡使溶液充分混匀。
2.室温12000 g离心30秒,移弃上清。
3. 剩下的下层溶液即为浓缩后的核酸溶液。
注:一次抽提可以使核酸溶液的体积减少20%(以加入浓缩剂的体积为100%),重复上述浓缩步骤直到核酸溶液达到所需要的体积。
本方法不能除盐,因此核酸溶液中的盐离子,如果有的话,将随核酸的浓缩而浓缩。
北京中草药DNA提取试剂盒厂家关键词:Chinese herbal medicine DNA extraction kit,中草药DNA提取试剂盒,BTN60805
·酿酒酵母EGY48化学感受态细胞
编号:BTN140387
英文名称:E.coli EGY48 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating 操作。Transformation marker为his3,trp1,ura3 ,报告基因为LEU2 。本产品经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA。
基因型:MAT α,ura3,his3,trp1,Lex Aop(x6)-LEU2
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
·填入法DNA末端标记试剂盒
编号:BTN120653A
英文名称:Fill-in DNA End Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5´突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 组份 | BTN120653A | BTN120653B | BTN120653C |
| 填入法标记缓冲液,5× | 50μl | 50μl | 50μl |
| Klenow DN聚合酶(1U/μL) | 5μl | 5μl | 5μl |
| dNTP(2mM) | 25μl | - | - |
| 含Biotin-dUTP的dNTP | - | 25μl | - |
| 含DIG-dUTP的dNTP | - | - | 25μl |
| 超纯水 | 1ml | 1ml | 1ml |
| 说明书 | 一份 | 一份 | 一份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京中草药DNA提取试剂盒厂家。
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