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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli HB101 Chemical Competent Cell
- 库存:
917
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
大肠杆菌HB101化学感受态细胞批发是高品质的克隆与表达产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多大肠杆菌HB101化学感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应大肠杆菌HB101化学感受态细胞批发,产品信息:
类别:克隆与表达
英文名:E.coli HB101 Chemical Competent Cell
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 大肠杆菌HB101化学感受态细胞 | BTN81221 | 0.1mL*10 |
规格:0.1mL*10
品牌:百奥莱博
英文名:E.coli HB101 Chemical Competent Cell
编号:BTN81221
产地:国产|进口
HB101菌株是E.coli K12菌株与E.coli B菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20 背景使HB101缺失内切酶系统,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。本产品是采用大肠杆菌HB101特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 具有链霉素抗性。
2.基因型:F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-)recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-。
3. 不存在 lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。
4. 该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。
注意事项:
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
大肠杆菌HB101化学感受态细胞批发专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:BTN81221,E.coli HB101 Chemical Competent Cell,大肠杆菌HB101化学感受态细胞
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN90610 | 蛋白质研究 | 卵白蛋白标准品(2mg/mL) |
| BTN100839 | 克隆与表达 | 潮霉素B |
| BTN130649 | 工具酶 | 尿嘧啶-DNA糖基化酶(人单链选择性单功能)(hSMUG1) |
| BTN130954 | DNA纯化 | 柱式Ti质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN90707 | 蛋白质研究 | 动植物总蛋白微量提取试剂盒 |
| BTN100908A | 蛋白质研究 | 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD) |
| BTN80102 | DNA纯化 | 柱式粪便DNA提取试剂盒 |
| BTN140391 | 克隆与表达 | 大肠杆菌T1化学感受态细胞 |
| BTN101205 | 其他生化试剂 | 1M Tris-HCl(pH7.5)(DNA级) |
| BTN130895 | 其他培养基 | YPD液体培养基(YPD酵母培养基) |
| BTN81102 | RNA纯化 | 石蜡包埋组织RNA提取试剂盒 |
| BTN80101 | DNA纯化 | 一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒 |
| BTN130614 | 工具酶 | Therminator DNA聚合酶 |
| BTN131209 | 工具酶 | MMLV逆转录酶(无RNase H活性) |
| BTN51104 | 克隆与表达 | B载体 |
| BTN151103 | 核酸电泳和回收 | 超级电泳液 |
| BTN130662 | 蛋白质研究 | Tth RecA蛋白 |
| BTN121122 | 探针标记及检测 | 柱式探针纯化试剂盒 |
| BTN100103A | 克隆与表达 | 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 |
| BTN100947 | 核酸扩增(PCR) | 环状DNA全基因组扩增试剂盒 |
| BTN111009 | 基因结构和功能 | 端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒) |
| BTN130938 | DNA纯化 | 痰液采集器 |
| BTN130912 | 核酸扩增(PCR) | dATP溶液(2.5mM) |
| BTN131099 | 蛋白质研究 | 生物素化的蛋白A |
| BTN130606 | 工具酶 | 全血直接扩增Taq DNA聚合酶 |
| BTN140645 | 克隆与表达 | 大肠杆菌TB1感受态细胞 |
| BTN80935 | 核酸电泳和回收 | 剥离硅烷 |
| BTN131217 | 核酸扩增(PCR) | UTP溶液(2.5mM) |
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文献和实验, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
观察到。 三.实验材料 受体菌:E.coli K12 HB101 质粒:pGLO plasmid 转化液(CaCl2) 氨苄青霉素(amp) 阿拉伯糖(ara) 培养基:固体LB、液体LB 接种环、移液器等 四.实验步骤 1. 准备平板: 每组:1块LB平板,2块LB/amp平板,1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞:用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉,此即感受态细胞
实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞: 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,常用 RM 符号表示。转化方法:电击
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