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一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格

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  • ¥120 - 1940
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN61202-DSG
  • 2025年07月09日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      常温运输及保存

    • 保质期

      一年

    • 英文名

      One-step DNA extraction kit

    • 库存

      263

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格
    规格:10mL
    英文名:One-step DNA extraction kit
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN61202
    本试剂盒是专用于从各种常见的样品中快速提取用于PCR扩增的DNA。

    试剂盒特点:
    1.操作简单,只用一步(约5-10分钟)即可以得到用于PCR扩增的DNA 模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的Chelex100提取方法和*酚/*仿方法快。
    2.兼容性广,可以用于几乎所有的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
    3.环保健康,不使用任何有毒有害的试剂。
    4.尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    一步式广谱DNA提取试剂 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 将约2μl液体样品(如全血、细胞培养液)或2mg的固体样品(如动物组织,约半粒芝麻大小)加入到50μl 本产品中。
    注意:样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节,如果样品DNA含量少,则用量要增加,但总液体样品用量最好不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量最好不要超过1mg/10μl的比例。下面是部分常见生物样品的DNA含量:
    材料 DNA含量
    精液 150-300μg/mL
    血液 20-40μg/mL
    精斑 20-30μg/cm2
    唾液 1-10μg/mL
    血斑 250-500 ng/cm2
    口腔拭子 100-1500 ng/拭子
    组织 50-500 ng/mg
    阴道拭子 10-3000 ng/拭子
    骨头 3-10 ng/mg
    拔出的带发根头发 1-750 ng/发根
    尿液 1-20 ng/mL
    自然脱落的带发根头发 1-10 ng/发根

    2. 80℃加热5分钟后。
    注意:此步的条件可以根据样品的质地稍做调节。如果是液体样品,室温处理1-3分钟即可。如果是难以破裂的细胞和材料(如酵母、石蜡组织切片、血斑),则保温时间可以延长到10-30分钟。
    3. 简短振荡混匀后取裂解物直接进行PCR(裂解物体积最好不要超过PCR 体积的1/10)。
    4.其余同常规操作。

    疑难解答:
    Q: 本产品与美国BioVenture的GeneReleaser 有何区别?
    A: 本产品处理简单,只需要80℃加热5分钟即可;而GeneReleaser 加热处理复杂而繁琐,共需要9 步处理,累计时间需要10 余分钟量(具体是65℃ 30s,8℃ 30s,65℃ 90s,97℃ 180s,8℃ 60s,65℃ 180s,97℃ 60s,65℃ 60s,80℃放置),手工操作时十分难以控制。
    Q: 用本产品提取的DNA 能否用电泳方法检测?
    A: 由于DNA含量太少,不能用电泳方法检测。


    一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·蛋白酶K溶液
    编号:BTN80911
    英文名称:Proteinase K Solution
    规格:5mL
    本产品是浓度为10mg/mL的蛋白酶K溶液,可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·一站式MBP标签蛋白纯化套装
    编号:BTN130871
    英文名称:One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack
    规格:2mL
    MBP(麦芽糖结合蛋白,Maltose Binding Protein)标签蛋白大小为40 kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。MBP融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化,结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除MBP融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高,易于纯化等优点。在现代分子克隆中MBP常作为融合蛋白被广泛应用。本产品就是专门用于分离纯化MBP融合蛋白的试剂盒,其原理如下:
    一站式MBP标签蛋白纯化套装原理

    产品特点:
    1.一站式套装,含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱,操作非常方便。
    2.提供 2mL直链淀粉-琼脂糖介质,其最大载量为10mg MBP蛋白/mL介质。
    3.采用麦芽糖温和洗脱,无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
    4.本介质可以反复使用多次。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    直链淀粉-琼脂糖介质 2ml
    1 M Tris-HCl(pH7.4) 25ml
    0.1 M EDTA溶液 25ml
    2 M NaCl溶液 50ml
    蔗糖 20g
    PMSF(10mg/mL) 1ml
    0.1mM MgCl2溶液 50ml
    0.1 M麦芽糖溶液 25ml
    层析柱(6mL) 1支
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存,但介质需4℃保存,PMSF需要-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据MBP蛋白产量决定,其最大载量为10mg MBP蛋白/mL介质,请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中)。
    2.用5倍柱体积(柱体积指的是填料介质的体积,下同)自备去离子水洗柱,共3次。
    3.用5倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱,进行平衡,使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。结合缓冲液的配方如下(以10mL为例):
    成分 用量 在结合缓冲液中的浓度
    1M Tris-HCl(pH7.4) 0.2mL 20mM
    0.1M EDTA溶液 0.1mL 1mM
    2M NaCl溶液 1mL 200mM
    自备去离子水 8.7mL -

    4.4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清,将细胞沉淀(约100mg)悬于2mL冰冷的现配的细胞洗涤液中,4℃ 5000g离心15分钟收集细胞沉淀后,再次悬于2mL冰冷的细胞洗涤液中。(最好用不加诱导物的菌液做对照样。)细胞洗涤液的配方如下(以10mL为例):
    成分 用量 在细胞洗涤液中的浓度
    1M Tris-HCl(pH7.4) 0.1mL 10mM
    2M NaCl溶液 0.15mL 30mM
    自备去离子水 9.75mL -

    5.制备细胞裂解物:
    1)如果所用载体不带MBP信号肽序列(如pMAL-c2)
    a)超声破碎细胞,功率30 W,保持细胞低温(0℃),直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。(超声参数需根据仪器型号自行摸索,但裂解物必须不粘稠,否则会堵塞层析柱。)
    b)为使溶液澄清,向上述细胞洗涤液中加入35μl PMSF(10mg/mL)。
    c)4℃下13000-15000g离心30分钟,以去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱,收集上清样品,留样做 SDS-PAGE电泳对照,其余样品用于纯化MBP融合蛋白,直接进入第6步。
    2)如果所用载体带MBP信号肽序列(如pMAL-p2)
    a)4℃ 5000g离心15分钟收集细胞,沉淀悬于1mL冰冷的现配的细胞裂解液中。细胞裂解液的配方如下(以10mL为例):
    成分 用量 在细胞裂解液中的浓度
    1M Tris-HCl(pH7.4) 0.3mL 30mM
    0.1M EDTA溶液 0.01mL 0.1mM
    蔗糖 2g 20%(m/V)
    自备去离子水 加水到10mL -

    b)加入25μl PMSF(10mg/mL),室温搅动15分钟,于4℃ 13000-15000g离心10分钟收集细胞。
    c)旋动细胞沉淀,加入2mL冰冷的0.1mM MgCl2溶液,4℃搅动10分钟。
    d)休克细胞4℃ 13000-15000g离心10分钟,在上清中加入10mM Tris-HCl(pH7.4)(可将1 M Tris-HCl,pH7.4稀释100倍配制而成)至pH为7.4。
    e)上清用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,滤液用100倍体积的10mM Tris-HCl(pH7.4)(配方如上)4℃透析。
    f)收集透析后样品,留样做 SDS-PAGE电泳对照,其余样品用于纯化MBP融合蛋白,直接进入第6步。
    6.将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中(保证目的蛋白与介质充分接触,以提高目的蛋白的回收率),收集流出液。
    7.用10-15倍柱体积的结合缓冲液(配方见上表)进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
    8.使用5-10倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白,收集洗脱液(即目的蛋白组分)。麦芽糖洗脱液的配方如下(以10mL为例):
    成分 用量 在麦芽糖洗脱液中的浓度
    1M Tris-HCl(pH7.4) 0.2mL 20mM
    0.1M EDTA溶液 0.1mL 1mM
    0.1M麦芽糖溶液 1mL 10mM
    自备去离子水 8.7mL -

    9.将纯化得到的样品(包括流出液、洗杂液和洗脱液)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。
    10.填料介质清洗:依次使用3倍柱体积的结合缓冲液和5倍柱体积的去离子水平衡介质,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。本介质可重复使用。
    蛋白酶切割释放靶蛋白(可选步骤,所用试剂需自备)
    11.用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
    1)加入自备的凝血酶、肠激酶或Xa因子(根据融合蛋白中的位点选择)。每毫升介质中加入50单位的溶于1mL PBS溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀,室温下振荡2-16小时。
    2)4℃以500 g离心5分钟,上清小心转移到新离心管中。
    3)用传统的层析方法或SDS-PAGE电泳分离靶蛋白和蛋白酶。


    一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格关键词:BTN61202,One-step DNA extraction kit,一步式复杂样品DNA提取试剂盒


    ·中等RIPA裂解液
    编号:BTN131007
    英文名称:RIPA Lysis Buffer(Medium)
    规格:250mL
    RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
    产品名称 RIPA裂解液(强) RIPA裂解液(中) RIPA裂解液(弱)
    有效裂解成分 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS 1% NP-40,0.25% deoxycholate
    裂解强度 温和
    对膜蛋白的提取 很好 较好 一般
    对胞浆蛋白的提取 很好 很好 很好
    对核蛋白的提取 很好 较好 较好
    胞浆磷酸化蛋白提取 很好 很好 很好
    细胞核转录因子提取 很好 很好 很好
    含蛋白酶抑制剂
    含磷酸酯酶抑制剂
    主要用途 WB,IP WB,IP WB,IP,co-IP


    储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    对于培养细胞样品:
    1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    2. 裂解细胞
    2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
    2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
    3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

    对于组织样品:
    1. 把组织剪切成细小的碎片。
    2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
    4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
    注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

    备注:
    1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。


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    ·Real-Time PCR稀释液
    编号:BTN130816
    英文名称:Diluent for Real-Time PCR
    规格:1mL
    本制品是制作标准曲线时用于梯度稀释DNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或模板RNA如果用水或TE稀释时,由于受Microtube的吸附作用等原因的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品稀释DNA或RNA样品时,即使稀释至低浓度也能够准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。

    储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。

    注意事项:为避免样品间的交叉污染,最好适量分装或小份后保存。

    ·烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
    编号:BTN130643
    英文名称:Alkyladenine DNA Glycosylase
    规格:500U
    人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)作用于烷基化和氧化了的DNA 损伤位点,包括3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙*(代"烯")基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG催化 N-糖苷键的水解断裂,释放受损碱基。其反应示意图如下:
    烷基腺嘌呤DNA糖基化酶反应示意图

    产品特点:
    1.单细胞凝胶电泳(彗星试验);
    2.碱洗脱;
    3.碱解旋。

    产品组成:
    组份 规格
    hAAG(10000U/mL) 50μL
    10×Buffer 1mL
    使用手册 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    活性定义:1单位是指在10μl反应体系中,37℃条件下,1小时从1pmol含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链产生一个AP位点所需的酶量。

    热失活:65℃,20分钟。



    我公司生产供应销*(代"售")的DNA纯化正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购一步式复杂样品DNA提取试剂盒厂家价格

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