SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(POD显色)厂商

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名称：SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(POD显色)厂商
规格：100T
编号：QN1229
品牌：百奥莱博
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验，DAB显色。

试剂盒组份：
封闭液(5% BSA)——————————10mL
3% H2O2-—————————————10mL
Bio-羊抗兔IgG浓缩液-———————100μL
SABC-POD浓缩液——————————100μL
稀释液——————————————30mL
20×DAB显色液A——————————1mL
20×DAB显色液B——————————1mL

ABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin-Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物，大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

操作步骤:(以石蜡切片为例)
1、切片常规脱蜡至水(三次二甲*，三次乙醇)。
2、3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性过氧化物酶，蒸馏水洗3次。
3、可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸*缓冲液(pH 6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH 7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃放置10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。

4、滴加5% BSA封闭液，室温20分钟，甩去多余液体, 免洗。
5、用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 孵育2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
6、根据用量，用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:50-100稀释成工作液(1mL稀释液加入10-20μL Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。 滴加Bio-羊抗兔IgG工作液， 20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
7、根据使用量，用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1mL稀释液加入10μL SABC-POD浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液，20-37℃孵育30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
8、DAB显色：根据用量，用PBS(pH7.2-7.4)配制，按1mL PBS加入50μL 20×DAB显色液A，加入50μL 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上，室温显色，镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9、苏木素轻度复染。脱水，透明，封片。显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟，PBS漂洗两次，3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次，接上述第4步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，接上述第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。

SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(POD显色)厂商正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·葡聚糖T-500
编号：QN0149
英文名称：Dextran T-500
规格：10g
本品是一种多糖。存在于某些微生物在生长过程中分泌的粘液中。

别名：右旋糖酐
分子量：500000
储存条件：RT

·dNTPs Mix(10mM each)
编号：QN0966
英文名称：Dextran T-500
规格：500μl|1ml|5ml
高质量的dNTP对cDNA合成、测序和标记反应的成功非常重要。本产品经过严格的质量检测，纯度高达98﹪以上，不含RNase和DNase。dNTPs Mix是dATP、dGTP、dCTP和dTTP的等摩尔混合物，作为PCR反应底物时，用无菌超纯水稀释成适当浓度即可。

别名：dNTPs Mix(10mM each)
英文名称：dNTPs Mix(10mM each)
储存条件：-20
性状：液体

·吲哚丁酸(IBA)
编号：QN0214
英文名称：Indole--butyric acid
规格：5g
别名：氮茚基丁酸
CAS号：133-32-4
分子式：C12H13NO2
分子量：203.24
储存条件：2～8℃
性状：白色或浅黄色结晶
溶解性：溶于乙醇，参考浓度50mg/ml。

·L-乳酸脱*酶
编号：QN0484
英文名称：L-Lactic Dehydrogenase
规格：2.5KU
本L-乳酸脱*酶常用于检定丙*(代"酮")酸盐。

别名：L-LDH
CAS号：9001-60-9
分子量：140kDa(由四个亚基组成)
性状：类白色冻干粉或硫*(代"酸")铵的结晶悬浮液
类型：Type II
酶活性：≥300U/mg
pI：8.4～8.6
最适pH：7.5
储存条件：2～8℃

单位定义：37℃，pH 7.5，每分钟将1.0 μmol 丙*(代"酮")酸还原成L-乳酸的酶量为1单位。


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·矿物油
编号：QN0745
英文名称：Mineral oil
规格：100mL|500mL
别名：石蜡油
CAS号：8042-47-5
性状：无色透明油状液体
密度：0.84g/ml(25℃)
储存条件：室温密封保存

·鼠尾胶原蛋白Ⅰ型
编号：QN0329
英文名称：Rat tail tendon collagen type
规格：10mg/2ml
本品鼠尾胶原蛋白I型是通过Birkedal-Hansen的方法，通过醋酸抽提、*化*沉淀、磷酸*二*沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境，使细胞在三维环境中生长。

1，在使用我公司鼠胶原蛋白 I 型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
2，在 1mg/ml 浓度以上，pH 为 7 左右时可形成具有一定强度的三维胶，检查到 NIH-3T3 细胞在三维胶内正
常生长、PC-12 细胞在三维胶表面正常生长。

使用方法：

1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度：1-5ug/cm2
以包被浓度为 2 ug/cm2为例：用无菌 0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到 0.012mg/ml。
确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置 1小时后，用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。

2、三维胶原的制备
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/mL以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶，建议成胶浓度1-2mg/mL。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06×体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。
需要的溶液(均需要无菌、预冷)：10×PBS(可含10 mg/L的酚红用于pH指示)或10×培养液，0.1mol/L NaOH，0.1mol/L 乙酸(一般不用)，双蒸水
A． 不含细胞的三维胶原的制备(以配制1mL，1mg/mL三维胶为例)：将200μL鼠尾胶原蛋白I型(5mg/mL)加到置于冰浴的离心管中，加入 690μL H2O。然后加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12μL 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结)，立即混匀。再加入100μL 10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
B．含细胞的三维胶原的制备(以配制1 mL，1mg/mL三维胶为例)：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/mL)加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12μL 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结)，立即混匀。再加入23μL 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760μL的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

注意事项：鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。


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·鲁米诺
编号：QN0740
英文名称：5-Amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione
规格：1g
本品为化学发光试剂，常用于化学发光免疫分析，例如金属阳离子分析。

别名：3-*基*二甲酰肼;发光*
CAS号：521-31-3
分子式：C8H7N3O2
分子量：177.16
发光率检测：最适荧光波长为425nm(在60 mM K2S2O8，100 mM K2CO3，pH11.5溶液中检测化学发光率)
纯度：≥98% (HPLC)
性状：浅黄粉末
储存条件：常温避光保存

鲁米诺一种在犯罪现场检测肉眼无法观察到的血液，可以显现出极微量的血迹形态(潜血反应)。是一种比较稳定的人工合成的有机化合物。由于血红蛋白含有铁，而铁能催化过氧化*的分解，让过氧化*变成水和单氧，单氧再氧化鲁米诺让它发光。所以鲁米诺广泛应用于刑事侦查、生物工程、化学示踪等领域。

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