Caspase 3 活性检测试剂盒价格

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Caspase 3 活性检测试剂盒价格在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Caspase 3 活性检测试剂盒价格
品牌：百奥莱博
英文名：Caspase 3 Activity Assay Kit
规格：20次|100次
编号：YT140
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain，有时被写作caspase-3或caspase 3，属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily)，是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9，并可以直接特异性剪切许多caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)，ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)，gelsolin和fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外，caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatin condensention)，DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。

本Caspase 3 活性检测试剂盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 3催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 3酶活性的标准品。

试剂盒组分：
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl

注意事项：
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。
2. Ac-DEVD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)，可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基*(代"*")胺)有毒，请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。

储存条件：-20℃。

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·磷酸化CENP-A(Ser7位点)抗体
编号：YT661
英文名称：anti-Phospho-CENP-A(Ser7) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。

本Phospho-CENP-A(Ser7)抗体识别Ser7被磷酸化的CENP-A，可以检测内源性的Phospho-CENP-A(Ser7)蛋白水平，不识别其它组蛋白，包括histone H3。

染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架，由四种核心组蛋白(histones)组成，包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制，细胞中组蛋白和类组蛋白(variant histone or histone like protein)的互换，也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere
proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C，是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A，也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p)，是重要的类组蛋白，和histone H3的*基端有62%的同源性，它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3，和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的*基端47个*基酸残基没有相似性，CENP-A的*基末端可以结合核小体之间的
linker DNA，协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase)，在histone H3被磷酸化后，可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase)，在histone H3去磷酸化之前，会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异，提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点，但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷，导致胚胎致死，通常不超过胚胎发育的第6.5天。

组份：
Phospho-CENP-A(Ser7)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IF
交叉反应性：人，猴
CENP-A分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:25),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·β-Catenin抗体
编号：YT656
英文名称：total β-catenin antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的人β-catenin Ser37附近一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本β-Catenin抗体识别的是总β-catenin(total β-catenin)，可以检测内源性的β-catenin，未发现和α-catenin和γ-catenin有交叉反应。

β-catenin是Wnt信号通路下游的重要的效应蛋白，在早期胚胎发育过程和肿瘤发生过程中起重要作用。肌酸激酶1(CK1)可磷酸化β-catenin Ser45。在Ser45被磷酸化后，β-catenin可以被糖原合成酶激酶3(GSK-3)所磷酸化。GSK-3β通过磷酸化β-
catenin Ser33，Ser37 和Thr41，从而促进β-catenin的泛素化降解。研究发现，在多种肿瘤中β-catenin的这些磷酸化位点会发生突变，β-catenin蛋白稳定性水平大大提高。Wnt信号通路激活，会导致β-catenin的磷酸化水平下降，导致其蛋白稳定性增加和蛋白水平的升高，β-catenin会转移到细胞核内和TCF相互作用，促进下游相关基因表达。

组份：
β-Catenin抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
宿主：兔
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人β-catenin Ser37附近一段多肽
β-Catenin分子量：～92kD
应用：WB,IP,IHC-P,ChIP
推荐稀释比例：WB（1:1000）,IP（1:200）,IHC-P（1:200）,ChIP（1:25）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·PPAR凝胶迁移突变探针(10μM)
编号：YT247
英文名称：PPAR Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－PPAR的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。这里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

PPAR consensus oligo的序列如下：
5"-CAA AAC TAG GTC AAA GGT CA-3"
3"-GTT TTG ATC CAG TTT CCA GT-5"

EMSA突变探针－PPAR中PPAR的公认的结合位点发生了突变，从而使PPAR无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和PPAR的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和PPAR的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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