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- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
1年
- 库存:
600
- 供应商:
简石生物
备注好收件人收货可以优先发货
产品规格: 5次 50次
Highlights
- 可在15分钟内快速从土壤,粪便等样品中提取到微生物的基因组DNA。
- 获得的基因组DNA产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、测序等分子生物学实验。
- 无需使用蛋白酶K。
- 此产品仅供科研使用。
产品组成:
| 试剂盒组成 | 保存 | 50次 | |
| 土壤裂解管 | 室温 | 50个 | |
| 裂解液 | 室温 | 40 ml | |
| 基因组DNA裂解液 | 室温 | 100ml | |
| 基因组DNA洗涤液1 | 室温 | 30 ml | |
| 基因组DNA洗涤液2 | 室温 | 50 ml | |
| 过滤柱(桔色盖) | 室温 | 50个 | |
| 基因组DNA洗脱液 | 室温 | 20 ml | |
| 2号柱 收集管(2ml) |
室温 | 50个 | |
| 室温 | 200个 | ||
| PCR抑制物去除剂 | 室温 | 50个 |
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。
注意事项:
- 环境温度低时基因组DNA裂解液或者基因组DNA洗涤液1可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
特性:
- 样品:可有效的从150mg以内的哺乳动物粪便,250mg以内土壤中有效的提取到细菌,真菌,病毒,线粒体和宿主DNA.
- DNA 纯度: 获得的基因组DNA产量高、纯度好, 可以直接用PCR,高通量测序等各种分子生物学实验。
- 基因组DNA大小: 一般经过震荡后,可回收到15-20 kb大小左右的基因组DNA。
- 基因组DNA回收情况: 可从100µl (最少50µl)洗脱液中可回收到25µg左右的基因组DNA。
- 操作温度: 室温 (15-30°C)。
操作步骤:
可选步骤:添加β巯基乙醇到DNA结合液中,终浓度为0.5% 例如:500ul到100ml的基因组DNA裂解液中。
- 直接添加150mg以内的哺乳动物粪便或250mg以内土壤样品到裂解管中,然后添加750ul的裂解液到裂解管中,在涡旋仪上最大速下振荡5分钟以上混匀。(如果使用高频振荡器时间可以适当缩短)
- 首先把过滤柱(桔色盖)的下端拧断并套在一个收集管中。然后将上一步所得上清(约400μl)加到过滤柱中,在8,000 x g的离心力下离心1分钟。丢弃过滤柱。
- 添加1200μl的基因组DNA裂解液到上一步的收集管中充分混匀。
- 将2号柱套在一个新的收集管里。
- 从步骤3中吸取800μl混合液加到2号柱中,在10,000 x g下离心1分钟,倒掉收集管中废液。
- 重复步骤5。
- 2号柱套在一个新的收集管内,添加200μl的基因组DNA洗涤液1到2号柱中,在≥10,000 x g下离心1分钟。 无需倒掉收集管中的废液,即可直接进行下一步。
- 添加500μl的基因组DNA洗涤液2到2号柱中,在≥10,000 x g下离心1分钟。
可选步骤:将收集管中的废液倒掉,并将2号柱套回收集管中,在≥10,000 x g下额外离心2分钟,尽量除去洗涤液, 以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。
- 将PCR抑制物去除剂下端拧断并套在一个收集管内,在≥8,000 x g下离心3分钟。
注意:如果PCR抑制物去除剂里面的液体变干,可以补充添加400-600μl纯净水。
- 将2号柱移至干净的1.5ml离心管中直接添加≥ 50μl的基因组DNA洗脱液到柱基质上(洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好),室温下放置2-5分钟,在≥8,000 x g下离心1分钟来洗脱基因组DNA。
将PCR抑制物去除剂套在一个干净的1.5ml离心管中,把洗脱的基因组DNA放入去除剂内,并在8,000 x g下离心1分钟,得到的DNA可进行后续PCR等试验。
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文献和实验方法。故本采用试剂盒和相关文献的方法作为参考,对垫料总DNA的提取进行摸索。 样品采集自中国人民解放军73121部队福建福州新店养猪场,垫料使用时间3-5个月。分别采用土壤总DNA提取试剂盒法、粪便总DNA提取试剂盒法、淤泥总DNA提取试剂盒法、SDS法、CTAB 法和SDS-CTAB结合法提取养猪发酵床垫料微生物总DNA,对6种方法提取的DNA的浓度和纯度进行比较评价。 采用土壤总DNA提取试剂盒法提取四种垫料的DNA,所得到的DNA浓度最低,质量也很低,并且纯度也很低
文献速递:传染病监控新方式?利用废水监测网络追踪腹泻病毒和痘病毒
于全市污水处理厂 (WWTP) 的每月腹泻病毒(诺如病毒基因组 I 和 II 以及轮状病毒)监测。通过 16 个月的临床监测,观察到废水中腹泻病毒浓度与粪便标本检出率之间存在显著相关性。废水中的诺如病毒浓度最高出现在冬季,这与香港诺如病毒爆发的季节性模式一致。此外,研究者们还建立了一种基于微小颗粒的方法来监测废水中的 DNA 病毒,并在香港首例 MPOX 患者入院时,在服务于约 16,700 人的污水处理厂的废水中检测到 MPOX 病毒的微弱信号。基因组测序为结果的有效性提供了确证证据。他们的研究
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