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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pQE-60
- 库存:
现货
- 供应商:
上海盖宁生物
| 别名: | pQE60, pQE 60 |
|---|---|
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3431 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | C-His |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: |
pQE vectors and constructs can be maintained in any E. coli strain that is ampicillin-sensitive and carries the pREP4 repressor plasmid, or harbors the lacIq gene on the F-factor episome. 配套表达菌株为M15[pREP4].
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1286 | pQE-60 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
PubMed=9636188; DOI=10.1073/pnas.95.13.7556
Kaplan D.H., Shankaran V., Dighe A.S., Stockert E., Aguet M., Old L.J., Schreiber R.D.
Demonstration of an interferon gamma-dependent tumor surveillance system in immunocompetent mice.
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95:7556-7561(1998)
PubMed=9649128; DOI=10.1038/bjc.1998.361
Yi S., Chen J.-R., Viallet J., Schwall R.H., Nakamura T., Tsao M.-S.
Paracrine effects of hepatocyte growth factor/scatter factor on non-small-cell lung carcinoma cell lines.
Br. J. Cancer 77:2162-2170(1998)
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海盖宁生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
蛋白为44KD,融合后应为73KD,但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因?该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功,应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧?第1号和3号克隆已测序,表达框没有移码,基因全长正确。测序结果如下,请参考: AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
蛋白是相当重要的;同时可以纯化出那些完整表达的蛋白,一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70,融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的,但是设计的pQE80L系列就没有这种约束,它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同,它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
反应过夜。 3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。 4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。 5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:
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