- ￥750
- 盖宁生物
- 上海
- GN1346
- 2025年10月30日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pHIL-S1
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8260 bp |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´； |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体标签: | N-PHO1分泌信号肽 |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | HIS4 |
| 备注: |
利用PHO1信号肽，分泌表达蛋白。
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1346 | pHIL-S1 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pHIL-S1载体的详细信息如下： • pHIL-S1载体大小8,260 bp，是融合表达载体。 • 载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I. • 利用PHO1分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。 • 在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。 • 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。 • 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) •为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) •将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
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文献和实验*发表【中文论文】请标注：由上海盖宁生物科技有限公司提供；
*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32
或S1作图精确定位TSS 引物延伸及s1核酸酶 保护 2)启动子区域(顺式作用元件)的确定 a)生物信息 学预测启动子区域 b)克隆5’-flanking sequence，并连接到报告基因 载体中 c)缺失、突变 d)荧光素酶活性分析 e)确定转录调控区域(启动子区域) 3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定 a)生物信息学预测转录因子结合位点 b)实验证实转录
体质粒，所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体，目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的，又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHILS，pAO815，pHILD2和pPICz等，其中pPIC9，pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体，而pAO815，pHILD2和pPICz为胞内型表达载体，不同载体除具有各自特殊的基因组件外，还具有一些共同的序列，如这些载体都包括一个表达盒（cassette）和一
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