总蛋白STPS

操作篇：Western Blot 蛋白样品制备

做 WB 之前，蛋白质的提取至关重要，成也提取败也提取。现在开讲; 一、单层贴壁细胞总蛋白的提取： 1.倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 2.每瓶细胞加 3 ml 4℃ 预冷的 PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动 1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。将 PBS 弃净后把培养瓶置于冰上。 3.按 1 ml 裂解

免疫信号增强试剂盒：杜绝背景 只要信号

。下面是来自使用者的反馈数据： 1、蛋白含量低，得到的WB信号弱--SignalBoostTM可以增强信号，检测到低丰度蛋白： 样品：K562细胞全细胞裂解液。 （Lane 1: 25μg总蛋白；Lane 2: 5μg总蛋白；Lane 3: 2.5μg总蛋白） 一抗：anti-PKC（Ab－2）小鼠单抗（MC5）（货号OP74），分别用5%脱脂奶粉PBST溶液（图A）和SignalBoost Solution 1（图B）按照1：1000比例稀释。 二抗：Rabbit anti

天然蛋白纯化思路解析

没有太多要求，任何层析都可以无缝衔接。   我们来看个具体晋级路线帮助增强自信。从微生物提取胰凝乳蛋白酶α-chymotrypsin。 α-Chymotrypsin 属于丝氨酸蛋白酶的一种，在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的羧基处水解肽键。 表1. α-Chymotrypsin参数和对纯化设计影响表   样品前处理使用超声方法进行菌体破碎，然后提取胞内总蛋白至合适 pH 值的缓冲液中，蛋白酶较不稳定，应同时考虑纯度和蛋白回收率之间的平衡关系。 图3. 样品处理流程图     纯化策略设计为： pl