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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)报价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)等细菌PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)报价
编号:SYA050
产地:国产|进口
规格:48次/盒
等级:科研试剂
我公司的超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)报价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·铜绿假单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA036
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Pseudomonas aeruginosa
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对铜绿假单胞菌特异性引物,对铜绿假单胞菌DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的铜绿假单胞菌(PA),用于铜绿假单胞菌(PA)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
铜绿假单胞菌PCR反应液(PA-PCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PA-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 如使用原始样本进行检测,样本(菌落、菌苔等)应新鲜采集并使用灭菌生理盐水悬浮原始样本。
6.1.2 如需在增菌后进行PCR检测,则应使用选择性增菌液对原始样本进行增菌。
6.1.3 应避免样本间交叉污染。
6.1.4 样本采集后应及时检测,也可保存于-20±5℃待检,长期保存应置于-70℃一下,样本应尽量避免反复冻融。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:建议采用相关标准方法进行前增菌,并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(PA-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PA-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PA-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明PA核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PA核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行PA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PA核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)报价关键词:百奥莱博,超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL),SYA050
·结核杆菌(TB)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA488
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介
本试剂盒用一对结核杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对结核杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
该试剂盒适合于检测外周血等样本中结核杆菌DNA,用于结核病等疾病的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(40T/Kit)
组份 数量 规格
TB反应液(TB-qPCR MIX) 1管 560μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合液(Enzymes MIX) 1管 40μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
TB阳性对照(TB-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-18℃以下保存,有效期为12个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 适用标本类型:痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水,其他肺外感染可取血、相应部位分泌液或组织细胞等。
6.1.2 标本采集
6.1.2.1 组织:取发病组织约1g,置入1.5mL洁净EP管,立即送检;
6.1.2.2 血液:无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;
6.1.2.3 液体标本:取0.5-1mL左右,置入1.5ml洁净EP管,立即送检;
6.2 样本前处理:
6.2.1 脑脊液和胸、腹水:13000rpm离心3min沉淀集菌,去上清;
6.2.2 痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本:经4%NaOH(痰和碱的比例为1:4,尿、支气管灌洗液和碱的比例为1:1)处理15min;尿标本加5%鞣酸、5%乙酸各0.5mL于锥形量筒内静置,处理后吸去上清,沉淀直接用于提取结核杆菌DNA或者经酸中和后接种培养,然后再对培养物提取DNA。
6.3 DNA提取
6.3.1 对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(TB-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TB-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(TB-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明结核杆菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明结核杆菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行结核杆菌real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明结核杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL)报价关键词:百奥莱博,超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌荧光PCR检测试剂盒(ESBL),SYA050
葡萄糖酸* DTE 3632-91-5
C0601 山羊血清(无菌过滤)
ARB11897 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶标法分析 Human phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,ampk ELISA KIT
焦锑酸* Acetyl CoA trilithiu*(代"m") salt 12208-13-8
RN0701 EASYspin 组织/细胞RNA快速提取试剂盒
水杨酸*酯 5-HIAA 118-55-8
68157-60-8 *吡*脲 Forchior fennron(KT-30 cppu)
2,4-二羟基*乙酮 Salicylanilide 89-84-9
高岭土 Ammonium ceric sulfate 1332-58-7
ARB10162 人S蛋白100P(S-100P)免费代测 Human s-100p ELISA KIT
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ARB10446 人甲胺喋呤(MTX)酶联免疫定量检测 Human methotrexate,mtx ELISA KIT
*酚绿B Cerium(III) acetate hydrate 19381-50-1
ARB11780 人新型隐球菌抗原(CN)酶标法分析
ARB14101 羊脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)Elisa定量检测
ARB11345 人类风湿因子(RF)含量检测 Human rheumatoid factor,rf ELISA KIT
F050312 小鼠IgA抗体 Mouse IgA
606-68-8 NADH Na2 还原型辅酶Ⅰ二*
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