志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格厂家

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志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格厂家是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒等细菌PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

名称：志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格厂家
编号：SYA003
等级：科研试剂
规格：48次/盒
产地：国产|进口
英文名：Fluorescent PCR detection kit for Shigella
一、简介：
志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰氏阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。人类及其它动物对志贺氏菌易感，10-200个细菌即可致病。本方法为荧光PCR检测方法，反应在同一管内进行，操作简单，并有效防止了污染，能对样品中或预培养液中的志贺氏菌进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。志贺氏菌的探针报告基团为FAM，淬灭基团为None。

二、用途：
该试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及食品中志贺氏菌的检测。

三、试剂盒组成：(50T/Kit)
组份 数量 规格
志贺氏菌荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX) 1管 750μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Shig-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品采集与预培养参照《中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验(GB 4789.5-2012)》要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取(用户可根据需要选择商业化DNA提取试剂盒)
6.2.1 培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μl DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Shig-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(Shig-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明Shig核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Shig核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Shig qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明Shig核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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·肠炎沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA063
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肠出血性大肠杆菌(O104:H4)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA083
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·锦鲤疱疹病毒(KHV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA514
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA543
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·高致病性猪蓝耳病病毒(hp-PRRSV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA409
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·弓形虫(Toxoplasma gondii)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA466
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽滑液支原体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA390
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·贝氏柯克斯体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA133
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适合于检测全血等样本中的贝氏柯克斯体通用，用于贝氏柯克斯体通用感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

本试剂盒用一对贝氏柯克斯体通用特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对贝氏柯克斯体通用的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组分	数量	规格
贝氏柯克斯体反应液(qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
贝氏柯克斯体阳性对照(PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管，取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合物	1 µL	N×1µL
总量	15 µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

1循环

50℃ for 2 min预变性

1循环

95℃ for 10 minPCR扩增

40循环

95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明贝氏柯克斯体核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明贝氏柯克斯体核酸阴性。
➤如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行贝氏柯克斯体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明贝氏柯克斯体核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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HC0037 黑色细胞培养板 20块/包 (平底)
SJ0748 人中性粒细胞和白细胞分离液
D-半胱*酸 Tetraheptylammonium bromide 921-01-7
ARB10606 人血红素氧化酶1(HO-1)检测服务 Human heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
ARB11593 人副流感病毒(HPIV)抗原酶标法分析 Human parainfluenza virus ,hpiv ELISA KIT
BL0612 琼脂糖凝胶CL-6B Sepharose CL-6B
大豆卵磷脂 Polystyrene 8002-43-5
PY04-018  西红柿浸出液  40ml/瓶  每瓶添加于100mlBBL琼脂培养基中，用于食品微生物中双歧杆菌的菌落计数及菌种鉴定 
二*胍 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 102-06-7
ARB10723 人异丙肾上腺素(Iso-Hyd)Elisa方法检测 Human isoprenaline hydrochloride,iso-hyd ELISA KIT
2-(环己*(代"胺"))乙磺酸 2-Sulfobenzoic acid 103-47-9
ARB12096 大鼠双*睾酮(DHT)代做ELISA实验 Rat dihydrotestosterone,dht ELISA KIT
62758-13-8 Resazurin sodiu*(代"m") salt刃天青
ARB11204 人组织蛋白酶K(cAth-K)含量分析 Human cathepsin k,cath-k ELISA KIT
BTN51206 Taq DNA聚合酶 Taq DNA Polymerase
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·脊髓灰质炎病毒3型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA207
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫亚I型(FMDV-I)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA483
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·轮状病毒B型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA198
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪伪狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA630
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·玉米转基因Bt176单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA268
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·狂犬病(RV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA462
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·尼帕病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA772
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
简介
本试剂盒用一对尼帕病毒特异性引物，结合特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对尼帕病毒 RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中尼帕病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于检测疑似感染病人的静脉血等标本中的尼帕病毒RNA。可用于尼帕病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
尼帕病毒荧光qRT-PCR反应液(NIPAH-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(NIPAH-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(NIPAH-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(NIPAH-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(NIPAH-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明NIPAH核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明NIPAH核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行NIPAH qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明NIPAH核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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