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- 技术资料
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-20℃
- 保质期:
6个月
- 库存:
857
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒报价的品牌:百奥莱博,是优质的病毒PCR检测试剂盒产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒报价
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
编号:SYA174
规格:48次/盒
除人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒报价外,我公司正在打折促销以下产品:
·布鲁氏杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA115
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液等样本中的布氏杆菌(BS),用于布氏杆菌(BS)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对布氏杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对布氏杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 布氏杆菌反应液(BS-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 布氏杆菌阳性对照(BS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:死亡或扑杀动物,取头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液。
二、样品处理:
➤组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;
➤阴道拭子样品、精液、关节炎和水囊瘤液直接取100μL于1.5mL灭菌离心管中。
三、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
四、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
五、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BS-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明BS核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明BS核酸阴性。
➤如果35<Ct值,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行BS qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明BS核酸阳性;否则判为样本阴性。
六、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒报价关键词:百奥莱博,SYA174,人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒
CV0401 pBLUE-T 载体连接试剂盒
L-酪*酸叔丁酯 Calcium DL-malate 16874-12-7
ARB13039 小鼠补体片断3A(C3A)Elisa方法检测 Mouse complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
ARB12750 小鼠CD3分子(CD3)elisa检测 Mouse cluster of differentiation 3,cd3 ELISA KIT
PY04-095 利福平 1mg/支×10支 每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中,用于弯曲杆菌的选择性分离培养
9012-36-6 Agarose 琼脂糖(西班牙分装)
ARB12918 小鼠白细胞介素2(IL-2)尿液中含量检测 Mouse interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
丙*(代"烷")磺酸* Benzil 14533-63-2
2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸二*盐 Penicillin&Streptomycin&Neomycin solution,γ-Irradiated 74299-50-6
F030634 FITC标记山羊抗人IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*FITC
植酸*盐水合物 Acridone 123408-98-0
BL0283 DMEM/F-12
ARB12241 大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)elisa检测 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,vegfr-2/flk-1 ELISA KIT
人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒报价关键词:百奥莱博,SYA174,人副流感病毒1型荧光PCR检测试剂盒
·鹅源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA309
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·乙型流感病毒(IFVB-V1)分型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA196
英文名称:IFVB-V1 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·手足口病肠道病毒(EV71)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA211
英文名称:EV71 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·蜡样芽孢杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA011
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Bacillus cereus
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对蜡样芽胞杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对蜡样芽胞杆菌的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的蜡样芽胞杆菌(BC),用于蜡样芽胞杆菌(BC)感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
BC反应液(BC-qPCR MIX) 1管 672μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
BC阳性对照(BC-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
水样便取0.5-1mL;疑似污染的食物取1g。
6.2 样品前处理
水样便13000 rpm离心 2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100µL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100µL。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(BC-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(2) 在试验成立的条件下,Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线,表明BC核酸阳性。
(3) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明BC核酸阴性。
(4) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(5) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行BC 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明BC核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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