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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 库存:
723
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒厂家直销,是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒厂家直销
编号:SYA169
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
关于甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒厂家直销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·肠集聚性大肠杆菌(EAEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA094
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·水痘-带状疱疹病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA245
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪流感抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA641
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA665
等级:科研实验专用
规格:96次/盒
·铜绿假单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA036
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Pseudomonas aeruginosa
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对铜绿假单胞菌特异性引物,对铜绿假单胞菌DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的铜绿假单胞菌(PA),用于铜绿假单胞菌(PA)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
铜绿假单胞菌PCR反应液(PA-PCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PA-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 如使用原始样本进行检测,样本(菌落、菌苔等)应新鲜采集并使用灭菌生理盐水悬浮原始样本。
6.1.2 如需在增菌后进行PCR检测,则应使用选择性增菌液对原始样本进行增菌。
6.1.3 应避免样本间交叉污染。
6.1.4 样本采集后应及时检测,也可保存于-20±5℃待检,长期保存应置于-70℃一下,样本应尽量避免反复冻融。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:建议采用相关标准方法进行前增菌,并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(PA-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PA-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PA-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明PA核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PA核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行PA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PA核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒厂家直销关键词:百奥莱博,甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒,SYA169
·非洲猪瘟病毒(ASFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA421
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对非洲猪瘟病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对非洲猪瘟的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于动物病料、鼻咽拭子、血液等样本中非洲猪瘟病毒的特异检测。适用于非洲猪瘟病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。最低检测限:500copies/mL,稳定性:批内及批间差异系数≤3% 。
三、试剂盒组成:(48T)
小盒(扩增试剂盒)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 非洲猪瘟病毒荧光qPCR反应液(ASFV-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 阳性对照(ASFV-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
大盒(提取试剂盒)
| 组份 | 规格 | 数量 |
| FD1试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
| FD2试剂 | 500μL/管 | 1管 |
| FD3试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
| FD4试剂 | 30mL/瓶 | 1瓶 |
| FD5试剂 | 2mL/管 | 2管 |
| 吸附柱及收集管 | 48套/包 | 1包 |
四、储存条件及有效期
小盒于-20℃以下保存,有效期为6个月;大盒室温避光保存,有效期12个月。
五、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
请查看配套提取试剂盒说明书
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(ASFV-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| ASFV反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(ASFV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(ASFV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(2)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明ASFV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明ASFV核酸阴性。
(3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行ASFV qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明ASFV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒厂家直销关键词:百奥莱博,甲型/乙型/丙型流感病毒三重荧光PCR检测试剂盒,SYA169
BL0284 F-12
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HC0141 螺旋口不锈钢酒精灯(防泄漏防爆)
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文献和实验余种。值得注意的是:该公司2009年6月先后通过甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的质量管理体系考核、取得甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的注册受理通知书。2009年6月17日国家食品药品监督管理局医疗器械监管司王宝亭司长、王兰明专员光临我公司并对甲型H1N1流感病毒检测试剂盒文号申报工作进行指导。2009年6月首批428套甲型H1N1流感病毒检测试剂盒配发至全国213个流感检测网络实验室PS:今年甲型流感这一试剂的开发和应用,让金豪公司赚得盆满钵满
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