北京Ni琼脂糖凝胶促销

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名称：北京Ni琼脂糖凝胶促销
品牌：百奥莱博
编号：WE0272
英文名：Ni-Agarose Resin
规格：10ml
  该镍柱纯化系统对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力，能够高效一步纯化带有6个组*酸亲和标签的蛋白。该系统具有4个Ni2+螯合位点，较只有3个螯合位点的Ni-IDA结合Ni2+更为牢固，有效防止纯化过程中Ni2+脱落且增强对His标签蛋白的结合能力，提高纯化效率。较高的基团密度，大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下，对来源于各种表达系统(如杆状病毒，哺乳细胞，酵母以及细菌)中的His标签蛋白，均有很好的纯化效果。本产品已螯合镍离子，可直接使用，方便，快捷。

支持物：CL-6B琼脂糖凝胶
载量：20-30 mg His标签蛋白/ml填料
粒径：50-160μM

注意事项：
1、缓冲液中不建议使用 β-巯基乙醇、DTT或EDTA。
2、整个纯化过程中切忌凝胶脱水变干。
3、为提高纯化效率，首先确定Binding Buffer和Elution Buffer中咪唑的最佳使用浓度。可以使用线性或梯度浓度的咪唑(20-500 mM)洗脱蛋白，并通过SDS-PAGE或Western Blotting来检测目的蛋白的纯度。
4、为避免柱子被堵塞，请使用高纯度的试剂配制缓冲液，并通过0.45μM过滤器过滤。建议将裂解液进行离心，或者使用0.45μM过滤器过滤。
5、柱再生时，保证每步洗完后都要用足够的去离子水冲洗至中性。

使用方法：

I 缓冲液的准备
1、可溶性蛋白纯化缓冲液配方：

 

成分	Tris-HCl(PH 7.9)	咪唑	*化*
Soluble Binding Buffer	20 mM	10 mM	0.5 M
Soluble Elution Buffer	20 mM	500 mM	0.5 M

2、包涵体蛋白纯化缓冲液配方：

成分	Tris-HCl(PH 7.9)	咪唑	*化*	尿素/盐*(代"酸")胍
Inclusion Body Binding Buffer	20 mM	5 mM	0.5 M	8 M/6 M
Inclusion Body Elution Buffer	20 mM	500 mM	0.5 M	8 M/6 M

II 组装层析柱
1、将Ni-Agarose Resin填料混匀后加入层析柱，室温静置10分钟，待凝胶与溶液分层后，把底部的出液口打开，让乙醇通过重力作用缓慢流出。
注意：
1)填料的上层是乙醇保护层，将填料和乙醇一起混匀，以每ml填料纯化20-30mg His标签蛋白计算，取需要的填料与乙醇的混合液加入层析柱。
2)本实验是通过重力作用使溶液流出，如果溶液不流出，可以给柱子一个外力，例如用大拇指对柱口轻轻按压一下，迫使其流出。
2、向装填好的柱中加入5倍柱体积的去离子水将乙醇冲洗干净后，再用10倍柱体积的Binding Buffer平衡柱子，平衡结束后即可上样。
注意：柱体积指的是填料的体积。

III 可溶性蛋白的纯化
1、收集菌体后，每100 mg菌体(湿重)加入1-5ml细菌裂解液，超声裂解菌体。10000×g离心10分钟后，收集上清。
2、将上清液过柱，流速为10倍柱体积/小时。
3、使用15倍柱体积的Soluble Binding Buffer冲洗柱子，收集流穿峰。
4、使用5倍柱体积的Soluble Elution Buffer洗脱，收集洗脱峰。
5、洗脱后，依次使用3倍柱体积的Soluble Binding Buffer和5倍柱体积的去离子水洗涤柱子，再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没)，封柱后2～8℃保存。

Ⅳ 包涵体蛋白的纯化
1、收集菌体后，每100 mg菌体(湿重)加入1-5ml 细菌裂解液，超声裂解菌体。
2、离心，弃上清，将沉淀重悬于Soluble Binding Buffer 中(如有需要，可进行超声波处理，超声前可加入1-5 mM 磷酸酶抑制剂混合物)。
3、重复操作2，直至包涵体清洗干净(呈较洁净的乳白色状)。
4、将沉淀重悬于Inclusion Body Binding Buffer中，冰浴1小时，使包涵体溶解。
5、10000×g离心20分钟，将上清以孔径为0.45μM的滤膜过滤。
6、将蛋白溶液负载上柱，流速为10倍柱体积/小时。
7、使用15倍柱体积的Inclusion Body Binding Buffer冲洗柱子，收集流穿峰。
8、使用5倍柱体积的Inclusion Body Elution Buffer洗脱，收集洗脱峰。
9、洗脱后，依次使用3倍柱体积的Inclusion Body Binding Buffer和5倍柱体积的去离子水洗涤柱子，再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没)，封柱后2～8℃保存。
注意：在纯化包涵体蛋白时，所有缓冲液均含有变性剂，需要降低Binding Buffer中的咪唑浓度(5 mM或更低)。洗脱时，若蛋白在较高pH下洗脱失败，可以选用低pH缓冲液作为洗脱缓冲液(pH6.5，pH5.9或pH4.5)。

Ⅴ 柱再生
当填料使用多次后，结合效率会有所下降(表现为流速变慢或填料失去蓝绿色)，可以用以下方法再生，提高填料的使用寿命和蛋白质的结合效率。
1、使用2倍柱体积的6M盐*(代"酸")胍冲洗后，使用3倍柱体积的去离子水冲洗。
2、使用1倍柱体积2% SDS冲洗。
3、依次使用1倍柱体积的25%、50%、75%和5倍柱体积100%乙醇冲洗，再依次使用1倍柱体积的75%、50%、25%的乙醇冲洗。
4、使用1倍柱体积的去离子水冲洗。
5、使用5倍柱体积含50 mM EDTA缓冲液(PH8.0)冲洗。
6、使用3倍柱体积去离子水，3倍柱体积20%乙醇冲洗。
7、封柱后2～8℃保存。
8、再次使用前，需首先使用10倍柱体积去离子水冲洗，然后使用5个柱体积的50 mM NiSO4再生，3个柱体积的Binding Buffer平衡。

储存条件：2～8℃，避免冷冻

欲咨询购买北京Ni琼脂糖凝胶促销，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·人类基因组DNA
编号：WE0226
英文名称：Human Genomic DNA
规格：20μg
本产品是一类高纯度的基因组DNA提取物，琼脂糖凝胶(0.7%)电泳检测显示该DNA提取物大小在15Kb以上，且基本无降解，可广泛应用于PCR、酶切、杂交、微阵列分析等分子生物学实验。

·DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)
编号：WE0233
英文名称：NGS Library Quantification Kit for Ion torrent
规格：1ml|5ml
  本产品是采用染料法(SYBR Green I)对NGS建库后的产物进行实时荧光定量PCR(qPCR)。试剂盒提供了qPCR过程所需的反应混合液，DNA引物混合物、标准品以及样品稀释液，试剂体系完整，操作简单方便。反应混合物中所含的荧光染料SYBR Green I 可以与所有的双链DNA结合；使用的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的全新高效热启动聚合酶，酶的激活需在95℃下孵育10 min。该产品特异性强、扩增效率高，能够对构建的文库浓度进行快速准确的定量。
  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
  不需要ROX校正的仪器： Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyler iQ，iQ5，CFX96等。
  需要Low ROX校正的仪器： ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System， QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system， Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
  需要High ROX校正的仪器： ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。


北京Ni琼脂糖凝胶促销关键词：Ni-Agarose Resin,Ni琼脂糖凝胶,WE0272

BL1320 4×dNTPs(100mM)
F030635 FITC标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)*FITC
邻菲啰啉 Gemcitabine 5144-89-8
BTN131152 兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate
ARB10186 人αL岩藻糖苷酶(AFU)酶标法分析 Human alpha-l-fucosidase,afu ELISA KIT
ARB11623 人粘蛋白/粘液素7(MUC7)Elisa方法检测 Human mucin-7,muc7 ELISA KIT
甲基-β-环糊精 Alizarin 128446-36-6
ARB11674 人维生素K1(VK1)ELISA代测服务 Human vitamin k1,vk1 ELISA KIT
麦芽糖酶 Tween 20
鲁米诺单*盐 Cholesterol esterase from pseudomonas sp 20666-12-0
ARB11673 人维生素E(VE)含量分析 Human vitamin e,ve eELISA KIT
ARB13191 小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)定量分析 Mouse ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
α-*乙酸* Boc-D-Asp-OH 15165-79-4
PY02-140  TTC琼脂基础  250克  
葡聚糖凝胶LH-60 VBT
ARB10316 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量测试 Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,ngal ELISA KIT
ARB13697 兔补体蛋白3(C3)ELISA代测服务 Rabbit complement 3,c3 ELISA KIT
BL1212 抗酸染色液(试剂盒)
BTN100830 低pH缓冲液套装 Low pH Buffer Set
肌激酶 Sodium oleate 9013-02-9
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ARB13565 兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)尿液中含量检测 Rabbit soluble intercellular adhesion molecule-1,sicam-1 ELISA KIT
聚丙*(代"烯")酸* 1-Naphtyol 9003-04-7
D-正亮*酸 DL-Trytophan 327-56-0
4-N,N-二甲基*基偶氮*-4`-异硫"青"酸酯 Phloroglucinol 7612-98-8
ARB12238 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA代测服务 Rat vascular endothelial cell growth factor c,vegf-c ELISA KIT
56-40-6 甘*酸 Glycine
1185-53-1 三(羟甲基)*基甲*(代"烷")盐*(代"酸")盐 TRIS-HCl
108321-42-2 G-418 遗传霉素
ARB11754 人蜗牛同源物2(SNAI2)ELISA检测服务 Human snail homolog 2,snai2 ELISA KIT
ARB11278 人骨粘连蛋白(ON)代做ELISA实验 Human osteonectin,on ELISA KIT
ARB11101 人金属硫蛋白(MT)elisa检测操作说明书 Human metallothionein,mt ELISA KIT
L-脯*酸苄酯盐*(代"酸")盐 C12E10 16652-71-4
C0101 胎牛血清(无菌过滤)

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