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冷藏
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长期
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Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
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913
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠
英文名:Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
编号:WE0311
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:500ml
更多有关Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠关键词:Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×),Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×),WE0311
·BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)
编号:WE0324
英文名称:BCIP/NBT Kit(40×)
规格:40ml
BCIP是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
试剂盒组成:
| 组份 | 40ml |
| 40×BCIP | 1ml |
| 40×NBT | 1ml |
| BCIP/NBT Buffer | 40ml |
注意事项:
1、工作液应现配现用,配制好的工作液1小时内有效。
2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
4、NBT有毒,使用时请采取必要的防护措施。
5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、BCIP/NBT显色工作液配制:根据需要量,将40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的体积比混匀后,即为BCIP/NBT显色工作液。
2、显色:
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到BCIP/NBT显色工作液中),室温避光孵育3-10分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育3-10分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠关键词:Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×),Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×),WE0311
·HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0393
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, HRP Conjugated
规格:100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
IHC(1:100-200)
·2×BaHF MasterMix(含染料)
编号:WE0114
英文名称:2×BaHF MasterMix(With Dye)
规格:5ml
本品为由BaHF DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×,具有操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点,可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含的BaHF DNA Polymerase是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性,5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性,在普通PCR条件下,与BaldStar Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活需要在95℃下孵育10分钟,该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效,实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于常规的PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BaHF MasterMix含有BaHF DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;
4、2~8℃存放三个月,活性无明显改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)优惠。
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文献和实验(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
NaCl,然后缓慢加入 10 g CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),同时加热并搅拌,可加热至 65℃ 溶解,定容终体积至 100 mL。3. CTAB 沉淀液: 1% (w/v) CTAB,50 mM Tris.Cl (pH8.0),10 mM EDTA(pH8.0)4. 高盐 TE 缓冲液: 10 mM Tris.Cl (pH8.0),0.1 mM EDTA (pH8.0),1M NaCl【实验方法与步骤】1. 在所需量的 CTAB 抽提液中加入 2-巯基乙醇,使终浓度达 2% (v/v
-HCl,pH6.7;下层胶则是高浓度的小孔胶,称为分离胶或电泳胶,成胶的缓冲液是Tris-HCl,pH8.9。电泳槽中的电极缓冲液则是Tris-甘氨酸,pH8.3。可见,凝胶浓度、成胶成分、pH与电泳液缓冲系统各不相同,形成了一个不连续系统。 电泳时,蛋白质样品放置在浓缩胶上,为防止蛋白质样品在电极缓冲液中扩散,因而加入等体积的40%蔗糖或50%甘油与之混合,以提高密度;为观察蛋白质样品泳动的情况,样品中还加入溴酚蓝等示踪染料,这些有色物质的分子 比任何一种大分子物质泳动的速度都快,只要染料
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