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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
人IgM
- 亚型:
IgM
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
HRP
- 适应物种:
人
- 保质期:
二年
- 抗原来源:
人
- 目录编号:
WE0376
- 级别:
多克隆
- 库存:
345
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
山羊
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
IgM
- 抗体英文名:
Goat Anti-Human IgM(Fc5μ), HRP Conjugated
- 抗体名:
HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)厂家在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Goat Anti-Human IgM(Fc5μ), HRP Conjugated
规格:100μl
产地:国产|进口
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别人的IgM重链的Fc5μ片段,与人的IgA、IgG,人免疫球蛋白轻链无交叉反应,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化的检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:人IgG(Fc5μ)
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:100-200)
北京现货HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)厂家正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Tris-甘*酸蛋白电泳液(pH8.3, 10×)
编号:WE0283
英文名称:Tris-Glycine SDS Buffer(pH8.3, 10×)
规格:500ml
·DNATrans转染试剂
编号:WE0255
英文名称:DNATrans Transfection Reagent
规格:500μl
DNATrans是一种高效的阳离子脂质体转染试剂,适用于多种细胞的DNA转染。对于大多数细胞系包括原代细胞都有较高的转染效率,并且对细胞毒性极低。本转染试剂可应用于瞬时转染、稳定转染、共转染、高通量DNA转染,基因表达和基因功能研究。
实验前准备及重要注意事项
1、DNATrans Transfection Reagent使用前应先震荡摇匀。
2、转染效率与细胞密度有很大关系, 不同实验间应保持一个基本的传代步骤,确保转染时细胞没有长满或处于静止期。一般贴壁细胞转染的最佳细胞密度是80%-90%,悬浮细胞的最佳细胞密度为3-5×105细胞/ml,用于转染的最佳细胞度应根据不同的细胞类型或用途而异。
3、转染时不要在培养基中加入抗生素,否则会导致细胞死亡。
使用方法:
1、对于大部分的细胞系, DNA与DNATrans Transfection Reagent的比例在1:2至1:3时转染效率较高。为了提高转化效率、表达水平并且减少细胞毒性,实验应在细胞密度较大时进行转染。以下操作以24孔板每孔细胞的DNA转染操作为例。
a. 贴壁细胞:转化前一天,在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基,并于每孔中接种0.5-2×105个细胞,待细胞长至80%-90%满时进行转染。
b. 悬浮细胞:在细胞转染之前,在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基,并于每孔中接种3-5×105个细胞。
2、转染当天,首先准备转染复合物,对于每孔细胞按照以下用量配制:
a. 取适量DNA,加入25μl无血清培养基,并轻轻的混合均匀。
b. 取适量DNATrans Transfection Reagent,加入25μl无血清培养基,轻轻混匀,并于室温孵育5分钟。
c. 孵育5分钟之后,将稀释的DNA和稀释的DNATrans Transfection Reagent混合(使DNA以及DNATrans Transfection Reagent的终总体积为50μl),轻轻混合均匀,并在室温下孵育20分钟(溶液可能会出现絮状,但不会影响转染效率)。
注意:该混合物在室温下可以稳定保存6小时。
3、将步骤1中24孔板中培养的细胞生长培养基更换成450μl无血清培养基,然后将步骤2中50μl转染复合物加入到24孔板内,轻轻前后推动24孔板以混匀。
4、将细胞置于含5% CO2,37℃条件下培养4-6小时后,更换成500μl生长培养基。
5、18-48小时后进行转染基因表达的检测。
6、对于稳定的细胞系:在转染24小时后,细胞按照1:10的比例传代,第二天可加入筛选培养基进行筛选。
注意:
1)该说明为一个24孔的用量,若同时转几个孔,配制转染复合物的量需加倍;若转染其他类型孔板,DNA和DNATrans Transfection Reagent用量见附表,该附表用量以293T细胞为转染细胞时的标准用量。
2)转染4-6小时后也可以不更换生长培养基,但由于DNATrans Transfection Reagent具有一定的细胞毒性,作用时间过长可能使某些细胞出现大量死亡现象,建议更换生长培养基。
3)优化条件:想要得到更高的转染效率,应优化转染条件:培养物、DNA浓度、细胞数和细胞与DNA复合物的孵育时间等条件都应进行优化。
附表:293T细胞转染参考数据
| 培养板 | 每孔表面积 | 铺板用培养基体积 | DNA和稀释体积 | DNATrans Transfection Reagent和稀释体积 |
| 96孔 | 0.3cm2 | 200μl | 0.13μg至10μl | 0.5μl至10μl |
| 24孔 | 2cm2 | 500μl | 0.8μg至25μl | 2μl 至25μl |
| 12孔 | 4cm2 | 1ml | 1.6μg至50μl | 4μl至50μl |
| 35 mm | 10cm2 | 2ml | 4.0μg至100μl | 10μl至100μl |
| 6孔 | 10cm2 | 2ml | 4.0μg至100μl | 10μl至100μl |
| 60 mm | 20cm2 | 5ml | 8.0μg至500μl | 20μl至500μl |
| 10 cm | 60cm2 | 10ml | 24μg至800ml | 60μl至800μl |
储存条件:2~8℃,避光
北京现货HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)厂家关键词:山羊抗人二抗,人IgM二抗,HRP标记抗人IgM二抗,人IgM抗体,HRP标记二抗
·Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号:WE0325
英文名称:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin V-FITC与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)不能通过完整的活细胞,但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色, 因此通常将Annexin V与PI配合染色, 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| Propidium Iodide,PI | 500μl |
| Annexin V-FITC | 250μl |
注意事项:
1、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
2、需自备PBS和去离子水。
3、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4、PI对人体有刺激性,请注意适当防护。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按 1:3 稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例
储存条件:2~8℃,避光保存
北京现货HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)厂家关键词:山羊抗人二抗,人IgM二抗,HRP标记抗人IgM二抗,人IgM抗体,HRP标记二抗
D-葡萄糖醛酸内酯 DL-Serine 32449-92-6
BL1092 澳洲胎牛血清
碱性蓝26 D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride 2580-56-5
ARB13323 山羊雌二醇(E2)elisa检测
PY02-145 改良Skirrow氏琼脂基础 250克
37224-29-6 Sephadex G-75 medium(葡聚糖凝胶G-75)
BL0411 Lipopolysaaah aricles 脂多糖
NF-262 冻干抗人AFP血清
2′-脱氧腺苷 Bromocresol green 16373-93-6
ARB12621 大鼠维生素B12(VB12)Elisa定量检测
BTN130544 AEBSF溶液 AEBSF Solution
65-23-6 Vitamin B6 维生素B6
BL1392 SABC山羊IgG-AP kit
BL0804 山羊IgG抗原干粉(原装)
ARB14052 猴白介素6(IL-6)酶联免疫定量检测 Monkey interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
EM101 甲基化特异性PCR试剂盒
ARB14022 植物玉米素核苷(ZR)elisa检测说明书 Plant zeatin riboside,zr ELISA KIT
144-02-5 Barbitone sodiu*(代"m") 巴比*(代"妥")*
PY08-051 BCYE-CYS琼脂(不含L-半胱*酸盐*(代"酸")盐) 9CM 10皿/盒,用于分离培养军团菌属细菌
*铂酸 Casein Na salt 18497-13-7
ARB11716 人集聚蛋白(AgrIn)尿液中含量检测 Human agrin ELISA KIT
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文献和实验FITC荧光二抗?――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光
和1:400,即100μl和500μl的FITC标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E031210)最终使用液是 10ml和50ml,而100μl和500μl的Dylight 488标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E032210)最终使用液是40ml和200ml,可见,即使不考虑Dylight更高的荧光强度、更好的光学 稳定性和特异性,但就价格来说,Dylight荧光二抗也具有更高的性价比。下图为EarthOx原装进口DyLight 488标记,针对不同种属的二抗产品,艾美捷均提供现货包装:
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注:以下方法是一个
,通过预染蛋白marker来确定电泳停止时间。 (4) 湿转法,转膜条件:300mA恒流;0.45um孔径PVDF膜,转膜时间1h。转膜完成后丽春红染色试剂对膜进行染色,观察转膜效果。 (5) 封闭:将膜完全浸没于5%BSA-TBST中,水平摇床孵育2h(RT)。 (6) 一抗孵育:5%BSA-TBST稀释一抗, 4℃水平摇床孵育过夜。 (7) 次日,洗膜:TBST洗3次,每次10min。 (8) 二抗孵育:5%BSA-TBST稀释二抗:山羊抗兔,山羊抗鼠IgG(H+L)HRP
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