Rosetta(DE3)感受态细胞折扣价

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名称：Rosetta(DE3)感受态细胞折扣价
规格：100μl×10支
编号：WE0250
品牌：百奥莱博
英文名：Rosetta(DE3)Competent Cell
  本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

 

组份	0.1ml×10支
Rosetta(DE3)Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。

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橙黄Ⅰ Glycylglycine 523-44-4
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正己*(代"胺") 4-Methoxyazobenzene 111-26-*(代"2")
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DR0301 多功能DNA纯化回收试剂盒
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53123-88-9 Rapamycin 雷帕霉素
亚硫基二乙酸 Actidione 123-93-3
ARB11164 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)elisa检测操作说明书 Human hepatitis g virus igg,hgv-igG ELISA KIT
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Rosetta(DE3)感受态细胞折扣价关键词：Rosetta(DE3)Competent Cell,Rosetta(DE3)感受态细胞,WE0250

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PC4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶)
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PY02-120  改良MC培养基  250克  
ARB10318 人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)Elisa定量检测 Human neutrophil activating protein-2,nap-2 ELISA KIT
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D-(+)-苹果酸 Methyl red sodiu*(代"m") salt 636-61-3
BTN3091 液相RNase清除剂 Solution RNase Erasol
BL1222 0.4% TTC染色液
乳果糖 FITC 4618-18-2
F030411 胶体金标记山羊抗小鼠IgA抗体 Goat Anti-Mouse IgA*GOLD
F040322 绵羊IgG抗原 Sheep IgG
002019 肝素*抗凝牛血 100ml|500ml
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硫*(代"酸")银 2-Mercaptopyridine N-oxide sodiu*(代"m") salt 10294-26-5
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