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长期
- 英文名:
Trypsin-EDTA Solution
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729
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售胰酶细胞消化液 细胞生物学试剂,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:胰酶细胞消化液
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Trypsin-EDTA Solution
编号:RFT187
胰酶细胞消化液含0.25%胰酶(Trypsin)和0.02%EDTA,不含Ca2+和Mg2+。该消化液已经过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用方法:
1、贴壁细胞的消化:
a.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来;此时吸除胰酶细胞消化液;加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
e.如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化:不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
储存条件:4℃,有效期12个月。
关键词:RFT187,Trypsin-EDTA Solution,胰酶细胞消化液
我公司的胰酶细胞消化液 细胞生物学试剂,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
| 编号 | 名称 |
| RFT036 | 土壤基因组DNA提取试剂盒 |
| RFT004 | 1kb plus DNA ladder(300~10000bp) |
| RFT097 | 5×加A反应液 |
| RFT085 | Western二抗稀释液 |
| RFT021 | DNA Marker IV(500~7000bp) |
| RFT041 | 66KD蛋白Marker |
| RFT019 | DNA Marker II(100~1200bp) |
| RFT080 | Western湿转转膜液 |
| RFT165 | BL21(DE3)化学感受态细胞 |
| RFT052 | 双色预染宽分子量蛋白质Marker(10~170kD) |
| RFT034 | RNA提取试剂 |
| RFT016 | 5kb plus DNA ladder(100~5000bp) |
| RFT173 | 即用型潮霉素B溶液 |
| RFT195 | 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) |
| RFT105 | Oligo(dT)18 Primer |
| RFT095 | 2×Taq PCR MasterMix |
| RFT169 | c-Myc标签抗体 |
| RFT064 | 30%丙稀酰胺溶液(19:1) |
| RFT043 | 彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2~45kD) |
| RFT108 | 2×ligation solution MasterMix |
| RFT065 | 30%丙稀酰胺溶液(29:1) |
| RFT051 | 宽分子量蛋白Marker(10~200KD) |
| RFT005 | 200bp DNA ladder(200~3000bp) |
| RFT060 | 10%过硫酸铵 |
| RFT101 | 高保真平末端pfu DNA聚合酶 |
| RFT082 | BCIP/NBT即用型显色液 |
| RFT191 | 50×TAE |
| RFT086 | Western封闭液I(BSA) |
| RFT107 | RNase抑制剂 |
| RFT013 | 2kb DNA ladder(100~2000bp) |
| RFT152 | EB染色液 |
| RFT194 | 蛋白酶抑制剂混合物(100×) |
| RFT062 | 1M Tris(pH6.8) |
| RFT053 | QuickLan蛋白染色液 |
| RFT089 | Western一抗稀释液 |
| RFT114 | JM110化学感受态细胞 |
| RFT026 | λDNA/HindIII(125~23130bp) |
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文献和实验适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清
。 Q:检测凋亡用的细胞能否固定? A:甲醛固定液会造成结果假阳性,因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是,Annexin V 检测的样本为外周血时,勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q:有没有更好的办法处理贴壁细胞,来做流式凋亡实验? A:检测贴壁细胞时,若消化时间不易控制,建议用 Accutase 细胞消化液,对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q:Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒,该如何选
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