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Caspase-3活性测定试剂盒

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  • ¥780 - 2380
  • 江蓝纯
  • BC3830
  • 2025年07月10日
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      江蓝纯

    • 规格

      20T/50T/100T

    规格:20T产品价格:¥780.0
    规格:50T产品价格:¥1380.0
    规格:100T产品价格:¥2380.0
    Caspase-3是凋亡过程中主要的终末剪切酶,因而也是研究多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特异水解多种凋亡关键蛋白如PARP,介导细胞核染色质固缩、凋亡小体生成、核DNA断裂。试剂盒测定原理基于Caspase-3特异水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA),释放硝基苯胺pNA。游离硝基苯胺pNA呈在405 nm具有大吸收峰,用普通可见光分光光度比色方法测定。根据pNA标准管吸光度OD值和标准曲线,计算来自底物肽释放的pNA浓度,得到Caspase-3水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50或100次样品测定。

    适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-3活性。

    组成与储存:
    1. 裂解缓冲液: 20 ml ,4 ºC
    2. 反应缓冲液: 10 ml ,4 ºC
    3. 2 mM Ac-DEVD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光
    4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光
    以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

    所需仪器:
    酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
    工作波长:大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

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      一、原理与意义该方法通过比色法测定p硝基苯胺(pNA)含量,它来自于Ac-DEVD-pNA与Caspase-3(CPP 32)的反应产物,因为游离的pNA显黄色,在405 nm下有吸收峰。最后,根据处理组与空白对照组的倍增关系来反应组织Caspase-3活性的高低。Caspase-3在哺乳动物体内启动细胞凋亡过程,根据组织Caspase-3活性的高低可在一定程度上反映处理因素有无诱发体内细胞凋亡。二、试剂组成与配制1、反应缓冲液(PH 7.5):100 mM Hepes 缓冲液、20%甘油

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