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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
- 保质期:
长期
- 英文名:
Oligo Rapid Renaturing Solution
- 库存:
364
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Oligo快速复性液促销的品牌:百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Oligo快速复性液等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称:Oligo快速复性液促销
产地:国产|进口
编号:BTN130204
规格:1mL
英文名:Oligo Rapid Renaturing Solution
品牌:百奥莱博
本产品是精心优化的、专门用于Oligo快速复性的试剂,广泛用于以单链Oligo为材料制备Adaptor、Linker和其他双链Oligo分子,跟各种后续的分子生物学实验兼容,包括文库构建、抑制性差减杂交、AFLP等。本产品即可用于DNA-DNA Oligo复性,也适用于RNA-RNA Oligo和DNA-RNAOligo复性。还适用于带修饰碱基的Oligo的复性。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
Oligo快速复性液促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·电泳级甘油
编号:BTN90503
英文名称:Glycerol
规格:250mL
甘油又名丙三醇,是一种无色、无嗅、味甘的粘稠液体。熔点:18.17℃;沸点:290℃(分解);相对密度:1.261g/mL;折射率:1.474。可混溶于乙醇,与水混溶,本产品为电泳级,可以用于下列实验:
1. 灭菌处理的、DNase-free的甘油,浓度为50%,比100%取用更加方便。
2.可以加入到P A G E中,增加其对不同构型的分子的分辨率(如SSCP,tricine-SDS-PAGE胶)。
3.可以用于配置各种电泳上样液。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·柱式BAC载体DNA提取试剂盒
编号:BTN90607
英文名称:BAC carrier DNA column extraction kit
规格:50次
BAC是专门用于克隆长片段插入片段的载体,可以插入的片段一般在30-300 Kb,平均长度为130 Kb。但用常规的质粒DNA提取方法提取15 Kb以上的质粒DNA效果都不尽人意,为此本公司对常规的方法进行了诸多改良。
试剂盒特点:
1. 使用于不超过 100 kb的大型质粒DNA,包括BAC、PAC、P1和Cosmid等。如果超过100 kb,建议使用沉淀法或离子交换法。
2. 每 mL细菌培养液可纯化到50-150 ng左右的BAC和其他大型质粒DNA。
3. 安全,无酚*仿等危险的有机物抽提。
4. 柱式操作,比经典的沉淀法操作简单,重复性好,每次都能获得理想效果。
5. 得到的DNA 纯净,可以直接用于PCR、酶切和测序,不需要再纯化。
6.超值,性价比高。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.75ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(RNase A溶液需要4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 接种单个菌落到 2-5mL LB培养基中,37℃摇晃过夜培养。注意:不要使用Terrific Broth或2×YT培养基等高营养培养基,因为这样得到的菌液细菌密度太高,纯化BAC时,蛋白质和RNA污染较多,反而会影响BAC的产率。
2. 12000~15000×g 4℃离心5分钟,弃上清(培养基),再短暂离心,吸弃残留液体(培养基),得到细菌沉淀。
3. 用 250μL溶液A(第一次用前需先将全部RNase A溶液加入到13mL溶液A中,摇匀后再取用。未用完的溶液A最好在4℃保存)重悬细胞沉淀,必要时用枪头充分吹打使菌体重悬已保证没有成团的细菌块。
4. 冰上放置5分钟。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可。此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染BAC DNA。
6. 冰上放置4分钟。注意:一定要严格控制时间,时间超过4分钟,BAC产率将大大降低。
7. 加入350μL溶液C,轻柔颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生。
8. 冰上放置5分钟。
9.室温 12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。
10. 静置 2分钟以让BAC DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
11.室温 12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。
12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
13. 重复上步1次。
14.室温 12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA 洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
16.室温 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即BAC DNA。
17. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多BAC DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA 洗脱液来洗脱。
18. 得到的BAC DNA即可用于后续的检测或实验。
其他处理:
1. 如果要制备无内毒素BAC DNA,则需要用液相内毒素清除剂(需要另购)处理BAC DNA溶液。或者在提取BAC DNA之前,用菌体内毒素清除剂(需要另购)处理细菌。
2. 如果有基因组 DNA污染,可以用线状DNA 清除剂(需要另购)将其酶解。
3. 如果有 RNA污染,可以加入RNase酶解,然后用酚*仿抽提,再用乙醇沉淀。
4. 如果有蛋白质污染,可以用酚*仿抽提,再用乙醇沉淀。
Oligo快速复性液促销关键词:Oligo快速复性液,BTN130204,Oligo Rapid Renaturing Solution
·AMV逆转录酶
编号:BTN90502
英文名称:AMV Reverse Transcriptase
规格:200U
AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV),其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成,也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板,具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性,DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性,最适反应温度在42-55℃,最高可达60℃,如果使用焦磷酸*,最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。
产品特点:
1.高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。
2.反应温度可升高到60℃,可有效打开RNA二级结构,适用于二级结构复杂的RNA模板。
3.可合成长至10-12kb的cDNA。
4.可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。
5.本酶具有内源性的RNase H活性,所以最好不要用于cDNA文库的构建。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| AMV 逆转录酶(10U/μL) | 20μl |
| 5×AMV Buffer | 200μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以poly(rA)为模板,以oligo(dT)12-18 为引物,在37℃温度下,在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。
使用方法:(合成1st-strand cDNA)
1.按下表配制RT反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA |
500-2000ng 50-500ng 0.05pg-500ng |
| 注:RNA样品不能有基因组DNA污染。 | |
| Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物 |
1μL 1μL 15-20pmol |
| 注:随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比 | |
| RNase-free水 | 补水到11μL |
2.70℃保温5分钟后立即冰浴。
3.严格按下表顺序加入各成分:
| 5×AMV Buffer(本产品提供) | 5μL |
| RNase Inhibitor(40U/μL,自备) | 1μL |
| 焦磷酸* 40mM(预热到42℃) | 2.5μL |
| dNTP(10mM each,自备) | 2.5μL |
| AMV逆转录酶 | 1-3μL(=10-30U) |
4.补水使反应终体积为25μL。
5.42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*,反应温度可以提高到42-55℃,最高可达60℃。
6.70℃保温10分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用,不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物,一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。
Oligo快速复性液促销关键词:Oligo快速复性液,BTN130204,Oligo Rapid Renaturing Solution
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-(2-乙磺酸) PCBA 7365-45-9
18883-66-4 Streptozocin (STZ) 链脲佐菌素
金属硫蛋白 Vancomycin HC1
9048-46-8 牛血清白蛋白Ⅴ Albumin BovineⅤ
M0104 化学发光底物
NF-210 羊抗人C4血清
F060101 艾滋抗原
85-86-9 Sundan 苏丹Ⅲ
PY04-095 利福平 1mg/支×10支 每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中,用于弯曲杆菌的选择性分离培养
9012-36-6 Agarose 琼脂糖(西班牙分装)
ARB12918 小鼠白细胞介素2(IL-2)尿液中含量检测 Mouse interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
9014-01-1 碱性蛋白酶(1:200000)
2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸二*盐 Penicillin&Streptomycin&Neomycin solution,γ-Irradiated 74299-50-6
F030634 FITC标记山羊抗人IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*FITC
F030825 BIOTIN标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*BIOTIN
BL0283 DMEM/F-12
ARB12241 大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)elisa检测 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,vegfr-2/flk-1 ELISA KIT
羟基*酚蓝二* Butyl Sepharose 4FF 165660-27-5
盐*(代"酸")丫黄素 Potassium L-Aspartate 8063-24-9
ARB11088 人罗丹纳(RyR)Elisa定量检测 Human ryanodin receptor,ryr ELISA KIT
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文献和实验我做了一点RACE PCR的工作,应lhailzhj 主任的邀请,在这里作一点介绍,望广大战友补充和修正,谢谢!近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA
1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物(GSP)起始。 在实际应用中,RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步
近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。(相关阅读:精华vol 687
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