北京现货液相内毒素清除剂特价优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京现货液相内毒素清除剂特价优惠，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货液相内毒素清除剂特价优惠
品牌：百奥莱博
编号：BTN60607
规格：100次
英文名：Liquid endotoxin scavenger
去除液体生物样品(包括质粒DNA样品)中污染的内毒素(endotoxin)具有重要的临床意义，因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用。由于内毒素(化学本质为脂多糖，即lipopolysaccharides)是包括E.coli在内的革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分，并且带电性跟DNA 类似，所以从E.coli细胞中提取的质粒DNA和重组蛋白质药物中常常含有大量的内毒素污染，并且很难用用常规方法(包括硅胶膜吸附，离子交换吸附、凝胶排阻过滤、*化铯超速离心)去除。本产品就是专门用于高效去除生物样品中的内毒素污染。

产品特点：
1. 简单快速，一次处理只需要20分钟左右，不需要复杂仪器设备。
2.高效，一次处理可以去除90%以上的内毒素，经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2 EU(endotoxin unit，约0.1 ng LPS)/mL以下。
3.适用范围广，可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
4. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
5. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
如果使用前本产品有分层，冰浴后振荡混匀。

一：用于体积小于500μl的DNA/RNA样品
1.在一干净的离心管中加入500μl的样品。如果不足500μl,可以用水或TE补足。
2. 加入50μl的3 M 醋酸*(pH5.2)，混匀后冰浴5分钟。
3. 加入50μl预冷的本产品，充分混匀后冰浴10分钟。
4. 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)
5.室温12000～15000×g离心2分钟(不能低温离心)，离心后上层为无色透明，下层为淡蓝色。
6. 将上清转移到新的离心管中。
7. 如果需要，可以重复步骤3～6。
8. 加1倍体积的异丙醇或两倍体积的乙醇，混匀，12000～15000×g离心30分钟。
9. 弃上清后用70%酒精洗2次。
10. 空气干燥沉淀后加入100μl 无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
11. 测定DNA和内毒素的含量，与未纯化的样品比较。
二：用于体积大于500μl的DNA/RNA样品
整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力。
三：整合到碱变性法质粒DNA 制备过程中
整个操作同上，只是：
1.样品必须是加溶液III离心后得到的上清液或最后得到的质粒溶液。
2. 如果处理的是加溶液III离心后得到的上清液，可以略去第2 步操作。
3.处理后的溶液需要用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度，然后上柱，以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。
4. 洗脱DNA 所用水或溶液必须无内毒素污染。
四：对蛋白质和其它生物样品
整个操作同上，只是：
1． 略去第2 步操作，加3 M 醋酸*(pH5.2)只为沉淀核酸。
2． 第4 步改为37℃保温以免蛋白质变性，溶液呈混浊状或分相一般需要20-30分钟。
3． 略去第8 步和以后操作。

疑难解答：
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和*化铯超速离心)也不能将其有效分离。

除北京现货液相内毒素清除剂特价优惠外，我公司正在打折促销以下产品：

·核糖核酸酶HII
编号：BTN130675
英文名称：RNase HII
规格：250U
核糖核酸酶HII(RNase HII)为核糖核酸内切酶，适用于在双链DNA内部切刻核糖核酸的5´末端，产生5´磷酸和3´羟基末端。RNase HII还可以在冈崎片段的RNA 部分进行多处切割。其反应示意图如下：


产品特点：
➤ 重组酶
➤ 除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A)
➤在cDNA第二链合成时除去mRNA
➤ 无核酸内切酶、核酸外切酶和RNase污染。

产品组成：

 

成分	规格
RNase HII(5000U/mL)	12.5μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指1×反应体系中，37℃条件下，30分钟产生与切刻100pmol人工合成双链RNA底物相同的荧光信号所需的酶量。该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。


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·BCA法蛋白定量试剂盒
编号：BTN80815
英文名称：BCA Protein Assay Kit
规格：500次
本产品是基于BCA法(bicinchoninic acid，二奎啉甲*(代"酸")法)蛋白检测原理开发的蛋白质浓度测定产品，BCA法跟Lowry法的第一步完全相同，就是在碱性条件下，蓝色的Cu2+被蛋白质还原成紫色的Cu+。此反应类似Cu2+与Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2，双缩尿)发生的反应，故又叫Biuret反应(Biuret反应本省就可以测定蛋白质浓度，目前仍然是医院血液蛋白定量的方法)。第二步，Cu+与BCA发生反应形成水溶性的紫色化合物，通过分光在562nm处测定紫色化合物的量就可以精确定量蛋白质浓度。BCA 检测灵敏度比Biuret反应高100倍左右。


产品特点：
1．对各种常见的去污剂不敏感，但对Cu的还原剂和螯合剂比较敏感。
2．比Lowry法更加简单快捷，45分钟内完成测定。
3．试剂稳定，室温可以放置两年。工作液1 天内有效。
4．线性范围在 20～2000μg/mL。如果需要范围在0.1-10ug/mL，需要选用超敏BCA。
5．最小测量体积为1-20μL。
6．终产物稳定，变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7．可以检测最短到双肽，而Bradford法需要一定大小的蛋白质。
8．有常规(试管)和微量(96孔板)两种检测模式。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	2ml
BSA标准品(2mg/mL)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存)，有效期两年。

使用方法：

一：96 板操作模式
1．取一块96孔板，先进行编号(编号可以根据样品数增加)，并按照下表加入BSA 标准，待测样品和溶解待测样品的缓冲液(可以用水替代)：

编号	BSA 标准(2ug/uL)	待测样品(μL)	样品缓冲液(μL)	总体积(μL)	蛋白含量(μg)
0	0	0	20	20	0
1	1	0	19	20	2.0
2	2	0	18	20	4.0
3	4	0	16	20	8.0
4	8	0	12	20	16.0
5	12	0	8	20	24.0
6	16	0	4	20	32.0
7	20	0	0	20	40.0
样品1	0	X	补到20	20	未知
样品N	0	Y	补到20	20	未知

2．计算BCA工作液需要量：根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.2mL BCA工作液的比例，计算所需BCA工作液的用量，然后加上10%损耗作为实际需要配制的量。例如：计算出需要5mL工作液，实际按不少于5.5mL的量配制。
3．配制BCA工作液：按50体积溶液A加1体积溶液B(50:1)的比例将二者充分混合，所得溶液即BCA工作液。比如：5mL溶液A+100μl溶液B。
注意：取用溶液A和溶液B前需要充分摇匀，溶液B非常容易形成沉淀，需要65℃加热溶解后才能使用。当把溶液B刚加入到溶液A中时，最初会出现淡绿色沉淀，轻微晃动沉淀即会消失，工作液最后成绿色，可以室温放置12 天，但需要将容器的盖子拧紧。
4．将10倍体积(即0.2mL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
5．37℃放置30分钟。
6．冷至室温，10分钟内完成后续测定，否则化学反应还在继续进行，使光吸收值慢慢升高，每10分钟会升高2.5%左右。
7．在562nm下比色测定样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定，可用接近的波长检测，如570nm。
8．将编号为0号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品，其读数变成零)中扣除。
9．以0-7 号样品的BSA含量(μg，见上表最右行)为横坐标，以样品的吸光值为纵坐标，绘出BSA的标准曲线。
10．再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后的值)标在标准曲线上，其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量，除以样品稀释液总体积(20μl)，乘以样品稀释倍数即为样品浓度(μg/μL)。

二：试管测定模式
1、基本操作同上，只是操作改在编号的玻璃试管中进行，同时BSA 标准品(2ug/uL)的使用量从低到高改为0、5、10、20、40、60、80、100μL，样品的总体积从20μL 改为100μL，BCA工作液的用量从每个样品0.2mL 改为2mL。

三：注意事项
1．BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以，如果蛋白质浓度较低，可以改在60℃孵育30分钟或更长。
2．待测样品浓度在20～2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3．在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响：

名称	在此浓度下不受影响
Ammonium Sulfate	1.5 M
Brij-35	5.0%
CHAPS	5.0%
EDTA	10mM
Hepes	100mM
Glycine，pH2.8	100mM
Guanidine HCl	4.0 M
Tween 20、60、80	5.0%
SDS	5.0%
Sodium Acetate pH5.5	200mM
Sodium Chloride(NaCl)	1.0 M
Sucrose	40%
Sodium Hydroxide(NaOH)	0.1 M
NP-40	5.0%
Triton X-100	5.0%
Urea	3.0 M

4．本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响，所以需确保EDTA浓度不高于10mM，二硫苏糖醇不高于1mM，β-巯基乙醇不高于1mM，没有任何EGTA，否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。


北京现货液相内毒素清除剂特价优惠关键词：Liquid endotoxin scavenger,液相内毒素清除剂,BTN60607

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