北京BTN90902型细菌总蛋白质微量提取试剂盒多少钱

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百奥莱博专业生产供应北京BTN90902型细菌总蛋白质微量提取试剂盒多少钱，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京BTN90902型细菌总蛋白质微量提取试剂盒多少钱
英文名：Bacterial Total Protein Miniprep Kit
品牌：百奥莱博
编号：BTN90902
规格：30次
本试剂盒适用于细菌天然总蛋白的快速微量提取，可用于各种后续实验研究。

产品特点：
1．可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液或冰冻菌体沉淀。
2．在 1.5mL塑料离心管中操作，适用于大规模的快速筛选。
3．采用温和的中性裂解成分，蛋白保持天然活性。
4．产率是5-10mg蛋白质/mL细菌。
5．无须昂贵设备，无需溶菌酶、超声波破碎等复杂的操作步骤，离心分离即可得到，简单便捷。
6．得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法和及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	1.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

1．取 1mL 过夜培养的细菌，12000rpm离心1分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体。如为冰冻保存的菌体沉淀可直接进行第2 步。
2．每 10mg 湿重菌体沉淀加入0.5mL溶液A和50μL溶液B，吹打混匀。
3．冰上放置30分钟至1小时至菌液变清。
4．4℃ 12000 g离心1分钟。
5．将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分样品到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

欲咨询购买北京BTN90902型细菌总蛋白质微量提取试剂盒多少钱，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·RNase喷雾清除剂
编号：BTN130983
英文名称：Air RNase Scavenger
规格：120mL
本产品是特殊的气相RNase灭活剂，它含有多种成分，能高效灭活空气中的汗液，灰尘，唾液沫等RNase污染，保障RNA工作环境的清洁。

产品特点：
1.高效，超细喷雾，本产品能在10分钟内将空气中的RNase彻底灭活，效力和速度远远高于常用的DEPC。
2. 无毒，跟强致癌的DEPC不同，本产品对人体没有任何毒害。
3. 使用简单方便，即开即用，无需单独配制，浓度经过精心调制，与家用空气清新剂使用方法相同，直接喷在实验室空气中即可。
4. 喷雾瓶有扣锁，可防止误喷。

储存条件：室温运输及保存，有效期两年。

使用方法：
1. 将本产品均匀喷雾在封闭实验室空气中。
2. 关闭门窗，15分钟内即可将空气中的RNase彻底灭活。
3. 灭活空气中的RNase后，即可进行各种RNA相关实验操作。

·一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞)
编号：BTN90801B
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(B)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。
 

成分	规格
即用型蓝白T载体(50ng/μL)	20μl
对照插入片段(50ng/μL)	5μl
T4快速连接缓冲液，2×	100μl
T4 DNA连接酶(5U/μL)	30μl
超纯水	1ml
高效感受态细胞	100μL×10只(只B型有)
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。感受态细胞需要干冰运输，-70℃保存，有效期6个月。

自备试剂：插入片段。

使用方法：

一：PCR产物的纯化和定量注意事项
1. 由于PCR体系中有大量会抑制DNA连接反应的dATP、还有一些可能在电泳胶上不一定会显示出来的非特异性扩增产物和引物二聚体，所以PCR产物必须用胶回收方法制备才能用于本试剂盒的连接。可以分别使用本公司柱式DNArc(BTN60202)和PAGE DNArc(包括柱式PAGE DNArc)从琼脂糖胶和PAGE胶上纯化回收PCR片段。具体操作见相关产品使用手册。
2. 琼脂糖胶回收的电泳缓冲液最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
3. 为避免UV对DNA的伤害，切胶最好在日光下进行(使用百奥莱博的绿如蓝染料的话，可以直接在黑色背景下看见DNA条带，不需要紫外光)。如果使用EB或其他染料，必须在紫外下切胶时，最好选择长波(360nm)紫外灯并以最快速度切胶，文献报道短波UV(300nm和240nm)会使DNA连接效率降低400多倍。使用短波UV时，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)减少伤害。
4. PCR片段的体积越小越便于后续操作。洗脱PCR片段时，用最少量的洗脱液洗脱。
 本试剂盒要求PCR回收片段的浓度最好为50ng/μL。如果浓度不够，最好用醇沉淀法沉淀后直接在管内设置连接反应，也可以使用本公司的核酸浓缩剂(BTN110801)直接浓缩。
5. 为准确定量回收的PCR产物同时又节约样品，最好使用微量分光光度计(只需用1μL样品测量)。如果分光光度计需要大量样品，建议使用电泳法定量：将回收的PCR片段与浓度已知的DNA Marker在含EB或绿如蓝染料的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的相对荧光强度而估测PCR产物的浓度。

二：连接反应
1. 短暂离心装有蓝白T载体、连接缓冲液和T4连接酶的离心管。
2.在三个离心管中加入下列成分(注意，对照可以不做，在出现问题时再做)：

成份	样品管	阳性对照管	自连对照管
T4快速连接缓冲液，2×	5μl	5μl	5μl
蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)	Xμl(见注)	不加	不加
对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)	不加	1.5μl	不加
T4 DNA连接酶(5U/μL)	1-1.5μL	1-1.5μL	1-1.5μL
超纯水	补到10μL	补到10μL	补到10μL

注: 如何根据T载体的用量计算PCR纯化片段的最佳用量？
第一：确定插入片段与载体的最佳摩尔比，在本产品的T载体的长度固定(3Kb)时，最佳摩尔比跟插入片段的长度关系如下：

插入片段长度	与载体的摩尔比
1Kb以下	2:1或3:1
跟T载体接近(±1Kb)	1:1
比T载体长1Kb或更多	1:2或1:3

第二：根据选定的最佳摩尔比按下面方程式计算用量：

本产品提供的T载体长度为3 Kb，推荐用量为50ng，如果PCR片段长度为0.5 Kb，最佳摩尔比设定为3:1，则其用量为:

3. 用移液器吹打连接反应液使之混匀，然后放置在16℃孵育30分钟-过夜。
4. 65℃5分钟灭活连接酶后直接用于转化或-20℃保存。

三：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
1. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
2. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。
3.在冰上放置30分钟。
4. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
5. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
6. 将100μL复苏涂布到含Amp的LB琼脂平板上(也可加上X-gal和IPTG)。
7.室温4,000rpm离心剩余的900μl复苏细胞5分钟，弃去800μl上清，用剩余100μL培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
8. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
9. 倒置平皿，于37℃培养，12～16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组总共会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR回收片段的质量。
10. 按常规方法筛选重组子。

MCS位点：



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·IPTG溶液
编号：BTN80909
英文名称：IPTG Solution
规格：1.5mL
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·Oligo(dT)纤维素
编号：BTN131231
英文名称：Oligo(dT) Cellulose
规格：25mg
本产品是共价交联的Oligo(dT)纤维素亲和基质，可用于分离纯化带有poly(A)结构的真核生物mRNA，本产品结合能力大于400 A260 U/g。

储存条件：常温运输，4℃保存、有效期两年。

·动物线粒体总蛋白提取试剂盒
编号：BTN130891
英文名称：Animal mitochondrial Total Protein Extraction Kit
规格：50次
本产品是共价交联的Oligo(dT)纤维素亲和基质，可用于分离纯化带有poly(A)结构的真核生物mRNA，本产品结合能力大于400 A260 U/g。

储存条件：常温运输，4℃保存、有效期两年。

·T4 RNA连接酶1
编号：BTN130622
英文名称：T4 RNA Ligase 1
规格：1000U
本酶催化 3´→5´磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5´-磷酸末端和3´-羟基末端连接。伴随着ATP水解为AMP和PPi作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。

产品特点：
1．连接单链RNA和DNA
2．用 5´-[³²P] pCp进行 RNA 3´末端标记
3．RNA和DNA分子内及分子间的连接
4．合成单链寡脱氧核苷酸
5．蛋白质中掺入非天然*基酸
6．无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶污染。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指 37℃条件下，30分钟内将1nmol的5´-[³²P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。


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