RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)哪里买

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名称：RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)哪里买
规格：3000U
英文名：RNase Inhibitor From Mouse
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本品是鼠源重组蛋白，分子量为50 kDa，可以特异性抑制 RNase A、B和C活性。它与RNase以1:1的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH或来源于曲霉属的RNase 无效。此外，与下列聚合酶共同使用时，该抑制剂不会抑制聚合酶的活性，如：Taq DNA聚合酶、AMV或M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA聚合酶(SP6、T7或T3)。

重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱*酸，已证实，人源中的半胱*酸能导致抑制剂对氧化敏感甚至失活。因此，小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比，抗氧化能力显著提高，且在 DTT浓度较低(< 1mM)时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT的反应中更具优势，如实时 RT-PCR。

产品特点：
1. 抑制常见真核 RNase；
2.与Taq聚合酶、AMV或M-MuLV 反转录酶兼容；
3.在较宽的pH范围内均有活性(pH5-8)；
4. cDNA 合成和RT-PCR；
5. 体外转录/翻译；
6.酶催化的RNA 标记反应。

活性定义：1 单位指抑制 5 ng RNase A 50%活性所需要的小鼠 RNase 抑制剂的量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2,3´-环单磷酸盐的水解来进行。

RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)哪里买正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·丝状真菌线粒体DNA提取试剂盒
编号：BTN130831
英文名称：Filamentous fungal mitochondria DNA extraction kit
规格：15次
线粒体是重要的、负责能量产生的极其重要的细胞器。对丝状真菌线粒体进行生化，遗传和分子生物学研究都需要先进行线粒体纯化。本产品就是基于密度梯度离心的，专门用于从丝状真菌叶片中纯化完整线粒体、再从中纯化线粒体DNA的试剂盒。

试剂盒特点：
1. 即用型试剂盒，用户不需要单独配制各种溶液。
2. 所得线粒体可用于后续的SDS-PAGE、Western、ELSIA、蛋白组分析、线粒体DNA和线粒体RNA纯化。
3. 本产品足够15次线粒体纯化和15次线粒体DNA提取，每次可处理10-20g菌丝体，能得到1-5mg左右线粒体。
4. 已经成功用于Aspergillus candidus、Aspergillus nidμLans、Magnaporthe oryzae、Neurospora crassa、Penicillium chrysogenum、Rhizopus stononifer等丝状真菌。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	250mL×2
成分B	150g
溶液C	120ml
带柄尼龙滤膜	1个
通用线粒体DNA溶液A	10ml
通用线粒体DNA溶液B	5ml
通用线粒体DNA溶液C	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：纯化DNA提取用的线粒体的要求比纯化功能研究用的线粒体的要求要低，但整个操作还是最好在冰上或者在冷室进行，所用器皿和溶液最好在4℃预冷，离心最好要在4℃进行，离心力以g而不是rpm计算。

一：菌丝的摇瓶培养
1. 使用合适的丝状真菌培养基，接种孢子至终浓度为2×10E6/mL。一般100mL液体培养基可以得到0.8-1.2g菌丝体，而本方法一次可以处理10-20g菌丝体，故最好一次培养1-2升。
2.在合适的温度(如25℃、30℃或37℃，根据真菌不同而不同)250rpm/min摇晃培养16-20小时。
3. 用多层纱布或多层过滤纸过滤收集菌丝，用冰浴的自备去离子水洗涤菌丝三次去除残留的培养基。
4. 用吸水纸吸干菌丝的水分，称重后立即使用。如果在-80℃或液氮长期放置，线粒体回收效率将减低。

二：线粒体粗提液的制备
5. 制备溶液A工作液：每次提取需150mL溶液A工作液，制备方法是将20mL溶液A和130mL自备去离子水混合，冰上预冷即可。
6.在200mL烧杯中，加入100mL预冷的溶液A工作液，再加入新制备的菌丝体，然后全部转移到Waring匀浆机(家用果汁匀浆机)中，低速匀浆10秒，避免起泡沫。用玻璃棒把菌丝按入匀浆机底部后，再低速匀浆10秒。注意：还可以选择Dounce玻璃匀浆器，Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等方法，但它们单次处理量一般都较小，需多份处理再汇集。
7. 用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液，用预冷的200mL量筒收集穿透液。
8. 将剩下的菌丝体转移到Waring匀浆机中，再加入40mL预冷的溶液A工作液，低速匀浆10秒，用上步的带柄尼龙滤膜过滤，用预冷的200mL量筒收集穿透液。注意：带柄尼龙滤膜后可反复使用。
9. 将穿透液分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个约35mL)。
10.在水平转子离心机上4℃ 4000g离心10分钟，小心转移上清(含线粒体的部分)到4个新的离心管中。沉淀含细胞核和未裂解的细胞，可以弃之不用。如果要用于纯化细胞核DNA，则可以放-80℃长期保留。
11. 将含上清液的4个离心管在4℃ 10000g离心20分钟。
12. 每个离心管中加2.5mL预冷的溶液A工作液重悬线粒体沉淀并汇集(共约10mL)，此为线粒体粗提液。
13. 如果直接用线粒体粗提液提取线粒体DNA，容易有细胞核DNA污染。
 具体步骤是：在水平转子离心机上4℃ 10000g离心7分钟，小心弃上清，沉淀为线粒体，直接用于第三步的线粒体DNA提取。
14. 如果需要高纯度、无污染的线粒体DNA，则需要用密度梯度离心法将完整的线粒体和其他细胞碎片进一步分离。具体见下步线粒体精提液的制备。

三：线粒体精提液的制备(密度梯度离心法)
15. 制备重液和轻液：将4.1克成分B干粉加到6.3mL溶液C中，充分摇晃混匀得10mL重液。将4.1克成分B干粉加到6.3mL去离子水中，充分摇晃混匀得10mL轻液。
16.在50mL塑料离心管中先加入10mL重液，再在其上轻轻加上10mL轻液，最后加上第11步所得的约10mL线粒体粗提液。
17. 加平衡离心管后在水平转子冷冻超速离心机上4℃ 43000g离心2小时，重液和轻液间的带为完整线粒体。
18. 用广口吸管小心将线粒体转移到新的离心管中，加入等倍体积的预冷的溶液C，轻柔混匀。取少量在相差显微镜下检查线粒体完整性。
19.在水平转子离心机上4℃ 19000 g离心20分钟，小心将上清吸出后，线粒体沉淀可以直接用于DNA提取。

四：线粒体DNA提取
20. 将600μL通用线粒体DNA提取试剂盒溶液A加入到上步得到的线粒体沉淀中并吹打混匀，然后转移到1.5mL离心管中。
21. 65℃放置5分钟。
22. 加入300μL通用线粒体DNA提取试剂盒溶液B，震荡混匀10-30秒。
 注意：溶液B非常粘稠，可以将其预热到65℃并剪掉一截枪头后再取。
23. 加入200μL自备的*仿，震荡混匀10-30秒。
24. 12000g室温离心3分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。
25.小心转移上清液(约0.8mL)到一个新的1.5mL离心管中，避免触及中间层的白膜，可留少量上清不取。
26. 加入1倍体积的通用线粒体DNA提取试剂盒溶液C，颠倒30次混匀。
27. 12000g室温离心5分钟，小心弃上清液。
28.在离心管中加入1mL自备的75%乙醇，震荡30秒。
29. 12000g室温离心1分钟，小心弃上清液。
30. 12000g室温离心半分钟，残留液体将汇集在管底。
31. 用洗液枪吸弃管底残留液(约50μL)。
32. 加50-100μL自备的TE缓冲液，溶解DNA沉淀即得线粒体DNA溶液。直接取5-10μL电泳检测，其余放直接使用或放-80℃冰箱备用。


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·镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶)
编号：BTN100101
英文名称：Ni-Agarose Resin
规格：2mL
本产品就是专门用于纯化带有His标记的蛋白质实验。基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法，其原理是用基因重组的方法使待纯化蛋白的N 端或C 端携带一段His序列(一般是6个His)，然后利用偶联了Ni离子的琼脂糖与His的亲和作用而将His-标记蛋白与其他蛋白质分开，与Ni-琼脂糖结合的蛋白最后用咪唑溶液洗脱即可。Ni-琼脂糖中的Ni与蛋白质中His 结合示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，非常方便。
2．介质为交联的琼脂糖，可以反复使用。
3．Ni偶联牢固，含有5个Ni 螯合位点，Ni密度达到20-40μmol/mL。
4．结合量大，每mL介质可以结合20-30mg的蛋白质。
5．专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
6．有效pH范围广，在pH3-10之间均可使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

相关参数：

特点	基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便
基质	6%的交联琼脂糖凝胶
配体	Ni2+
配体密度	20-40 umol/ml
吸附载量	20-30mg蛋白/ml
介质颗粒大小	45～165um
最大流速	300cm/h
PH范围	3～10，在位清洗时pH范围可到2～11
保存温度	2～8℃
保存液体	20%乙醇

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