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- 文献和实验
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- 保存条件:
凝血酶长期储存于是-70℃,可储存1年;
- 保质期:
长期
- 英文名:
Thrombin
- 库存:
400
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货凝血酶哪里买,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货凝血酶哪里买
编号:BTN120708
英文名:Thrombin
规格:1000U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
凝血酶特异性切割带有识别位点(Ler-Val-Pro-Arg-Gly-Ser)的目标蛋白。产品经过对融合蛋白切割活性的功能性测试,不含有任何杂蛋白酶。
储存条件:凝血酶长期储存于是-70℃,可储存1年;储存于是-20℃,可储存6个月,避免反复冻融。10×凝血酶buffer储存于是-20℃。
活性单位定义:在1× Thrombin buffer(20mM Tris-HCl,pH8.4、150mM NaCl、2.5mM CaCl2)中,20℃反应16小时,切割50μg融合蛋白底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
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北京现货凝血酶哪里买关键词:Thrombin,凝血酶,BTN120708
·终点显色法内毒素定量试剂盒
编号:BTN120415
英文名称:Chromogenic End-point TAL Kit
规格:32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎(TAL)的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子等跟凝血有关成分,当细菌内毒素激活C因子时会,起一系列酶促反应,激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的显色基质,使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA,λmax=405nm)。在一定时间内,pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关,据此,可以通过测定样品405nm的光吸收来用外标准法定量样品的内毒素浓度。其原理图如下(TAL和图中LAL相同):

本试剂盒就是基于上述原理开发而成,并进行了重大改进,增加了偶氮化试剂染色硝基*(代"*")胺(pNA)的步骤,此步使得反应的最终颜色变成玫瑰红色(λmax = 545nm),避免了深颜色样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰,结果更加准确可靠。
产品特点:
1.一站式,提供所需的试剂、内毒素对照和无热源的耗材,为用户省去繁琐的准备工作。
2. 灵敏度高,可以对浓度在0.1EU/mL-1EU/mL和在0.01EU/mL -0.1EU/mL两个浓度范围的内毒素样品进行定量。
3. 比经典的pNA法多一步偶氮化染色的步骤,处理样品的范围更广,结果更加稳定可靠。
4.样品中如含有β-葡聚糖,则需选用特异性显色基质鲎试剂盒,因为β-葡聚糖会产生G因子旁路反应,干扰内毒素检测。
5. 若样品含头孢类抗菌素或磺胺制剂,则需要选用不含偶氮化试剂的鲎试剂盒,因为上述成分也能跟本试剂盒中的偶氮染色剂发生偶联反应而干扰偶氮化显色。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 细菌内毒素标准品 15EU | 2支 |
| 鲎试剂 | 2支×1.7mL |
| 显色基质 | 2支×1.7mL |
| 偶氮化试剂1 | 2支×10mL |
| 偶氮化试剂2 | 2支×10mL |
| 偶氮化试剂3 | 2支×10mL |
| HCl(反应终止剂) | 50ml |
| 细菌内毒素检查用水 | 50ml×2瓶 |
| 除热原试管,10×75mm | 10×5支 |
| 除热原吸头,1ml | 10×4支 |
| 除热原吸头,0.2ml | 10×5支 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期两年。
使用方法:
一、样品的预处理
1.若样品的本底在545nm的吸光度值大于0.5,必须对样品进行稀释后再检测。
2.若样品颜色较深(例如溶血),或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质),必须设置样品空白管以扣除样品自身的颜色本底。样品空白管不加入鲎试剂,以等体积的细菌内毒素检查用水代替。其余操作同样品管。
3.本检测方法高度灵敏,故接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。实验过程应防止细菌的污染(内毒素即细菌的LPS)。
4.待测样品的pH值应在6.0–8.0之间,若超出此范围,需用自备的除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
二、试剂准备
5.细菌内毒素标准溶液配制(制备标准曲线用):取细菌内毒素标准品1支,按细菌内毒素标准品使用说明(见附2)稀释为10EU/mL的内毒素溶液,再稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液,最后按下表以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液,在A-D四个离心管中稀释成0.1、0.25、0.5、1.0 EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。注意:也可以选择0.01、0.025、0.05、0.1EU/mL的浓度梯度。注意:标准品浓度范围不同,后续显色实验的保温时间也不同。
| 成份 | A管 | B管 | C管 | D管 |
| 细菌内毒素检查用水(mL) | 0 | 0.5 | 0.75 | 0.9 |
| 1EU/ml内毒素溶液(mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
| 内毒素浓度(EU/mL) | 1 | 0.5 | 0.25 | 0.1 |
6.阴性对照用细菌内毒素检查用水。
7.配制鲎试剂、显色基质、偶氮化试剂等试剂的工作液。
(1)鲎试剂:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解,得鲎试剂工作液。注意不要用旋涡混匀剧烈振摇。鲎试剂工作液应在10分钟内用完。
(2)显色基质:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中,轻轻振摇使显色基质完全溶解,得显色基质工作液。显色基质工作液可在无污染的条件下于4℃贮存8小时以内。
(3)偶氮化试剂1:按标签标示量加反应终止剂(注意:不是细菌内毒素检查用水)于偶氮化试剂1瓶中,得偶氮化试剂1工作液。
(4)偶氮化试剂2:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂2瓶中,得偶氮化试剂2工作液。
(5)偶氮化试剂3:按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂3瓶中,得偶氮化试剂3工作液。偶氮化试剂工作液可于4℃贮存1周。
三、实验操作
8.取本试剂盒提供的无热原试管6管,按下表操作(每加一个试剂均需要充分混匀,或用移液器轻柔吹打混匀):NC为阴性对照,PC为阳性对照。
| 成份 | NC 1管 | PC 4管 | 样品 1管 |
| 细菌内毒素检查用水(μL) | 100 | - | - |
| 内毒素标准溶液(μL)(4种) | - | 每种分别100 | - |
| 待测样品(μL) | - | - | 100 |
| 鲎试剂工作液(μL) | 100 | 100 | 100 |
| 混匀,37ºC温育T1分钟 | |||
| 显色基质溶液(μL) | 100 | 100 | 100 |
| 混匀,37ºC温育T2分钟 | |||
| 偶氮化试剂1工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 偶氮化试剂2工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 偶氮化试剂3工作液(μL) | 500 | 500 | 500 |
| 混匀,静置5分钟,于λ545nm测OD值 | |||
特别注意:每个批次的T1和T2不同。对本批次。
四、数据处理
9.建标准曲线:Y=bX + a,其中Y为545nm处吸光值,X为内毒素浓度,b为直线斜率,a为Y轴截距。
10.当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效:
(1)标准曲线的相关系数r≥0.980,
(2)标准曲线最低点的Y值大于阴性对照的Y值,
(3)待测样品平行管的平均值在标准曲线的区间内。
附1:待测样品的干扰实验
当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时,须进行干扰实验。待测样品的干扰实验详见《中华人民共和国药典》2010细菌内毒素检查法》的“光度测定法干扰实验”。当鲎试剂、待测样品的来源、配方、生产工艺改变或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时,须进行干扰实验,步骤如下:
1.选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm),作为待测样品干扰实验中添加的内毒素浓度,配制含λm内毒素的待测样品阳性对照,测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs;
2.测量出未添加外源内毒素的待测样品溶液内毒素浓度,称为Ct;
3.计算该实验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm×100%
4.当R在50%~200%之间,则认为在此实验条件下待测样品溶液不存在干扰作用。
5.当R在50%~200%之外,需对待测样品进行系列稀释(稀释倍数不得超过最大有效 稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。
附2:细菌内毒素标准品使用说明
本品为白色疏松海绵状固体,系参照中国药品生物制品检定所的细菌内毒素工作标准品标定的大肠杆菌内毒素冻干品,供鲎实验中的鲎试剂灵敏度复核、干扰实验和各种阳性对照。其用法如下:
6.溶解:加入适量的细菌内毒素检查用水(BET水,最大加入量不得超过1mL),复溶后置涡旋混匀器上混匀15 min。
7.稀释:将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成各个不同浓度。每次稀释后必须在涡旋混匀器上混匀至少一分钟。每一步的稀释倍数均不得超过10倍。
8.本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测,禁止用于注射、口服等。
9.实验所用的器皿需经过处理,以除去可能存在的外源性内毒素,可以经250℃干烤至少60分钟处理,也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。
10.稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟,放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。
北京现货凝血酶哪里买关键词:Thrombin,凝血酶,BTN120708
·柱式植物油DNA提取试剂盒
编号:BTN101116
英文名称:Vegetable oil DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于从各种植物油样品中提取微量植物油DNA的产品。
产品特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外地在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的单拷贝的基因。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4.与PCR和荧光PCR 兼容。
5. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
6.适用于各种材料,包括花生油、色拉油、酱油、菜籽油等样品。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1.在1.5mL离心管中加入0.2mL液体植物油样品。
2. 加入0.6mL溶液A,室温振荡3~5分钟。注意:在4℃保存的溶液A会形成沉淀,用前需要加热到65℃使之彻底溶化。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。注意:不能只取水相。
4. 12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12000~15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-50μl DNA 洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中,室温放置2分钟。
8. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为植物油DNA。
9. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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