BTN100947型环状DNA全基因组扩增试剂盒现货促销

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BTN100947型环状DNA全基因组扩增试剂盒现货促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多环状DNA全基因组扩增试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：环状DNA全基因组扩增试剂盒
产地：国产|进口
编号：BTN100947
规格：30次
品牌：百奥莱博
英文名：Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
本产品基于WGA的、专门用于环状DNA(如质粒)扩增的全基因组扩增试剂盒，优化后的反应体系对环状DNA全基因扩增有良好的效果，可以方便、简单、快速、经济的得到环状DNA样品的扩增产物。

产品特点：
1. 线状DNA清除剂可以清除残留的线状DNA，保留环状DNA，包括超螺旋DNA、带裂口(nick)的环状DNA和带缺口(gap)的环状DNA。
2. WGA采用基于phi29 DNA聚合酶的MDA法，能得到平均长度在10Kb以上的扩增产物，还具有高产量和高保真性的特点。
3.可以将环状DNA扩增上万倍，是保留珍贵痕量DNA样品的唯一办法。
4.可使用各种环状DNA样品，包括质粒DNA，环状病毒DNA，线粒体DNA等。
5. 操作简便快捷，恒温(30℃)反应，无须PCR仪即可实现扩增。
6.产物可用于多种后续试验，包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
线状DNA清除剂溶液A	100μl
线状DNA清除剂溶液B	30μl
WGA DNA变性液	75μl
WGA溶液A	150μl
WGA溶液B	300μl
Phi29 DNA聚合酶(10U/μL)	15μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、去除环状样品中的线状DNA(线状DNA量不超过5μg)
1.在干净塑料离心管中，按下表加入各成分(30μL体系)：

成分	样品	正对照	负对照
自备DNA样品(1-10μg)	(样品)	(用环状DNA)	(用线状DNA)
线状DNA清除剂溶液A	3μL	3μL	3μL
线状DNA清除剂溶液B	1μL	1μL	1μL
	补水到30μl	补水到30μl	补水到30μl

2. 加200μL石蜡油后，37℃保温16小时。注意：保温时间过短可能会形成短的DNA片段，影响后续反应，所以最好保温16小时。必须加石蜡油，否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4.电泳检测酶切效果。本产品不清除带裂口(nick)和带缺口(gap)的环状DNA(如质粒)，所以这些片段将不会消失。如果所含线状DNA超过5μg，则需要用非酶线性DNA清除剂清除或者稀释后用本法处理。
5. WGA扩增需要100pg-100ng的环状DNA，一般环状DNA的浓度都高于此范围，则需用超纯水将DNA稀释到40pg-40ng/μL，稀释过程中线状DNA清除反应中的成分也相应稀释，故一般不会影响后续WGA反应。如果样品中DNA浓度过低，则需要用微量核酸沉淀剂(需另买)沉淀后再溶解到适当体积的超纯水中，沉淀过程中线状DNA清除反应中的成分也被去除。

二、碱变性(对环状DNA，碱变性法一般优于热变性法，推荐用户使用)
6.在PCR塑料管中加入不超过2.5μL环状DNA样品。如果体积不足2.5μL，则用超纯水补齐。最好同时做一个不加样品的阴性对照。
7. 加入等体积(2.5μL)WGA DNA变性液，轻柔吹打混匀。
8.室温放置2分钟变性。
9. 加入5μl WGA溶液A，轻柔吹打混匀后立即进入第15步。注意：热变性的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入后续处理。

三、热变性法
10.在PCR塑料管中加入1-5μL纯化好的环状DNA，用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
11. 加入5μL WGA溶液A，轻柔吹打混匀。
12. 如果不足10μL，补水到10μL。
13.在PCR仪器上 95℃加热变性3～5分钟，其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。
14. 热变性结束后短暂离心(将蒸发到管壁的水甩下)，然后将样品管在冰上放置至少5分钟，立即进入第15步。注意：热变性的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入后续处理。

四、WGA反应
15.在10μL碱变性或热变性的DNA样品中，加入10μL的WGA溶液B，轻柔吹打混合均匀。
16. 加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，轻柔吹打混合均匀。
17. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
18. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
19. 立即取2-5μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
20.扩增的DNA可以用于后续试验或放冰箱长期保存。
关键词：BTN100947,环状DNA全基因组扩增试剂盒,Circular DNA Whole Genome Amplification Kit


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编号	名称
BTN100912B	长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉)
BTN160684-25K	SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒
BTN131227	10nt随机引物(0.5μg/uL)
BTN100835	胃蛋白酶抑制剂溶液(1mg/mL)
BTN130531	组织培养专用蛋白酶抑制剂
BTN130957	免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
BTN131029	胰蛋白酶(质谱级)
BTN3092	*化乙锭清除剂(EB清除剂)
BTN110801	核酸浓缩剂
BTN100408	8M盐*(代"酸")胍溶液
BTN120680	放线菌*(代"素")D
BTN80918	Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.5)(RNase-free)
BTN120625	ATP溶液(100mM)
BTN90502	AMV逆转录酶
BTN100907	10M*化*溶液(RNase-Free)
BTN131038	dUTP溶液，100mM
BTN91106	T7体外转录试剂盒
BTN81204	5×SDS-PAGE上样液
BTN120700	利福平溶液
BTN91104A	Denhardt溶液(同位素探针)
BTN130915	dCTP溶液(2.5mM)
BTN140383	农杆菌EHA105化学感受态细胞
BTN17-0270	限制性内切酶SpeI(BcuI)
BTN130609	一步式RT-PCR Mix
BTN120630	荧光素-12-dUTP溶液
BTN130884	糖蛋白蛋白纯化试剂盒
BTN131178	DNA Shuffling试剂盒
BTN111009	端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒)
BTN140234	SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)
BTN131281	乙醇-甲醛固定液
BTN130871	一站式MBP标签蛋白纯化套装
BTN130904	超级杂交液(Oligo探针)
BTN120419	大肠杆菌DNA连接酶
BTN60203	硫*(代"酸")新霉素干粉