DNA粘转平试剂盒折扣价

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名称：DNA粘转平试剂盒折扣价
产地：国产|进口
规格：20次
编号：BTN60107
英文名：DNA Polishing Kit
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3´到5´的聚合酶活性和5´到3´外切酶活性，将3´或5´突出的DNA片段转化成平末端，用于克隆工作。

产品特点：
1. 简单，精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分，不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。

产品组成：

 

成分	规格
Pfu DNA Polymerase(3U/μL)	20μl
2×Polishing Buffer	0.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。

使用方法：

1. DNA片段的准备：
无论是来源Taq，Tth,T7，Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段，还是用限制性内切酶制备的DNA片段，粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法，离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应：

在一个干净的离心管中，分别加入
3´或5´突出的DNA片段	10-500ng
2×Polishing Buffer	25μL
Pfu DNA polymerase	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时。

注意：如果不使用热盖式PCR 仪器加热，则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后，样品可以放-20℃长期保存，也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系，一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性，所以不必去除。但文献报道，去除后连接效率更高。

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四氮唑蓝 CBZ-L-Pyroglutamic acid 1871-22-3
F030638 FITC标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
ARB11026 人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)尿液中含量检测 Human urokinase-type plasminogen activator,upa/plau ELISA KIT
C0801 兔血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
830-81-9 1-Naphth 1 acetate  乙酸－1－奈脂
D0402 脱纤维马血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
胆固醇氧化酶 STAB 9028-76-6
ARB11048 人表皮角蛋白(EK)Elisa定量检测 Human epidermal keRatin,ek ELISA KIT
乳清酸 N,N-Diethylformamide 65-86-1
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正己*(代"胺") 4-Methoxyazobenzene 111-26-*(代"2")
ARB14099 小鼠瘦素受体(LEPR)代做ELISA实验 
9025-49-4 酸性蛋白酶(1：50000)
亚铁"青"化* Anion exchang resin 13601-19-9
F050302 人IgG抗体 Human IgG
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·即用型LB平板培养基(含Tet)
编号：BTN130848D
英文名称：LB Petri Dish(Tet)
规格：10块
本产品为即用型LB平板培养基，A型为无抗生素LB平板，B型为LB-Amp平板，C型为LB-Kan平板，LB-Tet平板。

储存条件：低温运输及保存，有效期半年。

·大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
编号：BTN140430
英文名称：E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达10⁹。本产品具有四环素抗性。

菌株基因型为：F- {proAB+ lacIq lacZΔM15 Tn10(TetR)Δ(ccdAB)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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BL1333 通用引物 ITS1
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