超快DNA-RNA两用转膜试剂盒北京现货促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")超快DNA-RNA两用转膜试剂盒北京现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：超快DNA-RNA两用转膜试剂盒北京现货促销
英文名：Rapid Nucleic Acid Blotting Kit
产地：国产|进口
规格：5次
编号：BTN121110
品牌：百奥莱博
本试剂盒是基于毛细管转膜法的Southern和Northern印迹膜制备试剂，专门用于从电泳得到的凝胶中制备用于Southern杂交和Northern杂交的印迹膜。其操作流程如下：


产品特点：
1.即开即用，提供制备5张13×20cm大小的Southern杂交和Northern杂交印迹膜所需要的印迹膜和溶液，不需要用户单独准备。
2.快速：转膜过程只需要1小时，整个过程只需要2.5小时(对DNA)或1.5小时(对RNA)。
3.跟硝酸纤维素膜、带电尼龙膜、中性尼龙膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4.A型提供硝酸纤维素膜，适用于400bp以上的靶分子，背景低。B型提供带电尼龙膜，适用于40bp以上的靶分子，结合力强。如需中性尼龙膜或PVDF膜，需另购。
5.使用优化的下向转膜法，不但效率比上行转膜法高30%左右，而且条带弥散度低、分辨率高。
可用琼脂糖胶(包括脉冲电泳胶，DNA电泳、RNA甲醛胶电泳和RNA戊二醛电泳)和DNA PAGE胶。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	660g
溶液B	100ml
溶液C	250ml
硝酸纤维素膜13×20cm	5张(仅A型提供)
带电尼龙膜13×20cm	5张(仅B型提供)
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：

一：Southern印迹膜的制备
1.按常规方法进行电泳(包括脉冲电泳)，本试剂盒不提供电泳所需试剂。如果进行常规的Southern杂交，建议使用0.7%琼脂糖进行电泳，分离酶切的基因组DNA。电泳时最好加电泳分子量对照、酶切对照(先将标记的全长lambda DNA或探针质粒与样品DNA的混合，再酶切)、阴性样品(不含检测片段的DNA样品)、杂交分子量对照(标记的1.lambda/Hind III)等。电泳后和荧光标尺并排拍照。
2.变性：首次使用时需配制变性液2.5L(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，搅拌缓慢中加入220g成分A和100mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)，将凝胶转移到一个至少10倍于胶体积的变性液中，脱色摇床上室温下摇晃处理60分钟(如果使用带正电尼龙膜，此步处理可以缩短到30分钟)。未用完的变性液可放瓶中室温保存。
3.转膜：如果使用带正点的尼龙膜，则直接用上步配制的变性液转膜，如果使用中性尼龙膜和硝酸纤维素膜，则需配置转膜液(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，缓慢搅拌中加入440 g成分A和2mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)。将凝胶转移到至少10倍于凝胶体积的转膜液中，脱色摇床上室温下摇晃处理15分钟。
4.测量凝胶的大小，然后借助尺子准确切出一张印迹膜，每边比凝胶大1mm，并切去一角，将印迹膜漂浮于去离子水上20分钟确保全部湿润，再按下图设置下行转膜体系(比上行转膜体系效率高30%)。图中membrane即印迹膜，transfer buffer即转膜液，吸水滤纸厚度为2-3cm，一般按每cm2印迹膜需要1mL转膜液的比例准备转膜液。对大的凝胶，可以同时使用两张滤纸分别跟两个容器的转膜液连接以便使转膜匀浆。

5.转膜1小时。结束后用铅笔标记核酸结合面以免搞错。注意：不要过夜转膜，否则信号将降低50%。
6.将印迹膜在中和液中处理10分钟，中和液的用量至少为0.5mL/cm2印迹膜。
7.可将凝胶放入EB(0.5μg/mL)溶液中染色30分钟后UV下观察残留核酸的量，反推转膜效率。此步也可跳过。
8.将印迹膜夹在两层滤纸中间80℃干燥15分钟以固定核酸(不需真空)，干燥时间不需延长，否则杂交信号可能会降低。
9.此时印迹膜可直接用于后续的核酸杂交实验或者在干燥状态下保存待用(可放数月)。

二：Northern印迹膜的制备
10.按常规方法进行电泳，本试剂盒不提供电泳所需试剂。本方法适用于甲醛变性胶和乙二醛变性胶，电泳后和荧光标尺并排拍照。
凝胶不需要变性和中和处理(也不能变性，否则RNA将会降解)，直接进入转膜步骤(同Southern印迹膜制备的第3到第9步)。

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·PreScissiom蛋白酶
编号：BTN130876
英文名称：PreScissiom Protease
规格：100U
PreScission蛋白酶是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶和谷胱甘肽S-转移酶(GST)组成的融合蛋白。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在5℃条件下反应16小时，能够切割100μg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

·即用型BGG蛋白标准品系列
编号：BTN131220
英文名称：Instant BGG Standard
规格：7×1mL
本产品为预稀释型BGG蛋白标准品。性质稳定，过滤除菌，是配合BCA试剂和Bradford 试剂测定蛋白浓度时的理想选择。

产品特点：
1．七个数据点，浓度范围为125-2000微克/毫升；
2．本产品可用于快速制备标准曲线或者微孔板曲线；
3．使用方便，无需自己准备梯度稀释液；
4．产品稳定，消除时间差异和操作差异。

产品组成：

成分	规格
BGG溶液，125μg/ml	1ml
BGG溶液，250μg/ml	1ml
BGG溶液，500μg/ml	1ml
BGG溶液，750μg/ml	1ml
BGG溶液，1000μg/ml	1ml
BGG溶液，1500μg/ml	1ml
BGG溶液，2000μg/ml	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期2年。

使用举例：(BCA法微孔板测定蛋白质浓度)
1．取各个稀释浓度的BGG蛋白标准品和待测蛋白质样品各25μl，加入到微孔板中。注：如果样品有限，则可取标准品和待测未知样品10μl
2．在每一个孔中加入200μlBCA 测定工作液(本世纪盒不提供)，并在震荡器上震荡30秒，使其充分混合
3．将微孔密封，在37℃孵育30分钟
4．将微孔板冷却到室温。使用微孔板读数仪，测量样品在562nm或该波长附近的吸光值
5．将各个标准品和待测蛋白质样品在562nm处的吸光值减去空白标准品在562nm处的平均吸光值
6．将BGG 标准品在562nm处经过空白校正的平均吸光值对其浓度(μg/mL)作图，绘制标准曲线。
 注：如果使用与微孔板读数仪相关联的曲线拟合算法，四参数(二次方程)或最佳曲线拟合将会比简单的线性拟合提供更加准确的结果。如果手工对这些结果作图，对于标准曲线上的各个点，采取点对点描画曲线的方法，比直接进行线性拟合的结果更好

注意：若采用Bradford法、BCA试管法等其他方法测定蛋白浓度，实验步骤略有差异，详细操作方法请参考蛋白质浓度测定实验工具书。

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