北京现货柱式藻类RNA大量提取试剂盒(国产,进口)

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货柱式藻类RNA大量提取试剂盒(国产,进口)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货柱式藻类RNA大量提取试剂盒(国产,进口)
规格：5次
品牌：百奥莱博
英文名：Algae RNA Column large-scale extraction kit
编号：BTN120504
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品，跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.样品处理量大，最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	150ml
溶液D	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为10mL，则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入后一批混合液，重复操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中，加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD 比值没有意义。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

北京现货柱式藻类RNA大量提取试剂盒(国产,进口)正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·DOP-PCR试剂盒
编号：BTN111109
英文名称：Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
规格：50次
DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR，是扩增全基因组的方法之一，它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物，通过两轮PCR(第一轮低温复性，第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA，但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势，在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。

产品特点：
1. 专门用于高度降解的DNA，方便，含有除模板DNA和引物以外的所有成份，简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度，使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶，降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间，平均500bp左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。

试剂盒组成：

成分	规格
DOP-PCR Magic Mix	750μl
DOP-PCR引物(20pmol/μL)	250μL
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，保存期限为12个月。不要反复冻融。

使用方法：

1.在一干净的PCR 管中，加入下列成分：

成分	阴性对照	样品
DOP-PCR MagicMix	25μL	25μL
基因组DNA模板(自备)或单个细胞	不加	10-100pg(或一个单个细胞)
DOP-PCR引物(20 pmol/μL)	5μl	5μl
补水到	50μl	50μl

2. 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。

预变性	95℃	5min
第一轮PCR(12个循环)	94℃	1min
	30℃	1.5min
	72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟)	3min
第二轮PCR(35个循环)	94℃	1min
	62℃	1min
	72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒)	2min
延伸	72℃	7min
	4℃	Forever

3.结束后取5-10μl直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液)，红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
4. 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。


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ARB10253 人乙醇脱*酶(ADH)检测服务 Human alcohol dehydrogenase,adh ELISA KIT
F030817 BIOTIN标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*BIOTIN
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PY02-209  疱肉牛肉粒  100克  
KT202 HotStart Taq MasterMix
ARB13095 小鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M1(M-AChRM1)Elisa方法检测 Mouse muscarinic acetylcholine receptor m1,m-achrm1 ELISA KIT
磷钼酸 Geldanamycin 51429-74-4
SJ0734 牛外周血细胞分离液
ARB12758 小鼠E*粘着蛋白/上皮性*黏附蛋白(E-CAd)Elisa分析 Mouse e-cadherin,e-cad ELISA KIT
ARB12641 大鼠游离三碘甲腺原*酸(TT3)免费代测 Rat tt3 ELISA KIT
BTN131136 Ficoll-Paque介质 Ficoll-Paque
63231-63-0 核糖核酸酵母
聚乙*(代"烯")醇 Sodium 1-decanesulfonate 9002-89-5
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BTN70606 一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装 One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
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ARB12493 大鼠神经元烯醇化酶(NSE)酶联免疫定量检测 Rat neurone specific enolase ，nse ELISA KIT
脱*乙酸 Glycine tert butyl ester hydrochloride 520-45-6
双(4-硝基*(代"*")基)磷酸酯 MOPSO sodiu*(代"m") salt 645-15-8
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ARB10072 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)定量分析 Human ccaat/enhancer binding protein deta,c/ebpδ ELISA KIT
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ARB12313 大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA代测服务 Rat clara cell protein,cc16 ELISA KIT

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