北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商
规格：100mL
产地：国产|进口
编号：BTN101106
品牌：百奥莱博
英文名：Precipitated TMB Chromogenic Kit
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方，辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物，适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。即开即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

产品特点：
1．相对于DAB来说，灵敏度高。
2．色泽稳定，无须避光显色。
3．色带为蓝色，便于观察。
4．无毒环保，可以放心使用。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、免疫印迹染色
1．准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2-5分钟，直至深蓝色沉淀出现。
4．用镊子夹起固相膜，放入去离子水中清洗。
5．空气中晾干。
6．拍照记录。

二、免疫化学染色
1．准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．室温下，小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4．室温下孵育5-10分钟，或直至样本出现深蓝色。
5．小心移去切片上显色工作液。
6．室温下，小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7．小心移去切片上的PBS缓冲液。
8．放上盖玻片或封片。
9．(选择步骤)进行甲基绿复染。
10．立即在一般光学显微镜下观察：阳性呈现深蓝色。

注意事项：
1．加入1滴溶液A和1滴溶液B，可按比例增减
2．如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深
3．固相膜显色后数小时将会褪色，不能永久存在。
4．该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5．染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。

疑难解答：
Q：在ELISA底物反应过程中，为何有些孔呈蓝色，而另外的孔呈蓝绿色？
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象，不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的，建议降低二抗的浓度。
Q：ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀？
A：HRP浓度过高，建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q：如何降低背景读数？
A：建议降低一抗或二抗浓度，延长封闭时间。

更多有关北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·包涵体中量纯化试剂盒
编号：BTN90509
英文名称：Inclusion Body Midiprep Kit
规格：5次
本产品是我们公司包涵体微量纯化试剂盒(BTN90508)的中量提取升级产品，用于中量，快速的提取高质量的包涵体。

产品特点：
1．中量提取，一次可以处理30-50mL的菌液，一次中量提取相当于10-20次微量提取。
2．操作简单快速，整个过程只要四十分钟左右。
3．大规模提取，可以在15-50mL离心管中完成。
4．能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白所占比重达到60%以上。
5．细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法，裂解更加温和。
6．得到的包涵体可以用于重折叠。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	250ml
包涵体溶解液	25mL
溶菌酶	3g
Benzonase(1U/μL)	125μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，但溶菌酶和Benzonase需要低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

准备工作：
将3g溶菌酶全部加入到25mL溶液A中溶解，然后根据每次的需要量(一次大量提取需要5mL)分成1mL/只放-20℃待用。每次只取用一管含溶菌酶的溶液A。
包涵体中的重组蛋白一般比溶解状态中的蛋白质更能够抵抗微量内源性蛋白水解酶的降解，如果实验发现得到的重组蛋白确有降解，则需要在溶液A中新鲜加入自备的蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。

一、细胞裂解和包涵体的纯化：
1．在蛋白诱导期结束时，转移30mL菌液到一个干净的塑料离心管中。
2．5000-7,000rpm室温离心3分钟，小心弃上清。
3．加入5mL含溶菌酶的溶液A重悬细胞。
4．室温放置10-20分钟裂解细菌，其间可以用手轻弹离心管混匀。
5．-20℃冷冻至凝固。凝固有利于裂解细菌，所以一定要凝固到细菌溶液变成固体。
6．室温水浴解冻。如果裂解充分，细菌释放出的DNA将使裂解物十分粘稠。如果不粘稠，说明裂解不充分，需要重复3-6步，否则完整细菌将和包涵体一起沉淀，影响包涵体的纯度。如有条件最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
7．加入25μL的Benzonase(1U/μL)，脱色摇床上摇晃直到裂解液不再粘稠，一般需要30分钟左右(检查方式是将裂解物倾倒转移到另一离心管中，在转移过程中看其是否粘稠)。
8．5000-7,000rpm 4℃离心5分钟，小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白，可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
9．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
10．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清,可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
11．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
12．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清作为包涵体第二次洗涤的对照样品。一般洗涤两次就能够得到足够纯净的包涵体，如果需要更多洗涤，需要用户单独购买包涵体洗涤液(溶液B)。
13．得到的沉淀即为包涵体，可以长期放置在冰箱待用或直接进入包涵体的溶解步骤。

二、包涵体的溶解：
1．在包涵体沉淀中加入5mL包涵体溶解液，用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果低温放置，包涵体溶解液会产生沉淀，必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2．室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3．20000g 4℃离心20分钟，小心收集上清，保留不溶性沉淀。注意：检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有，说明包涵体没有完全溶解，需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4．得到的蛋白质溶液可以用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件，所以本公司不能提供统一的复性溶液，需要用户自己摸索。
 注意：包涵体纯化过程中引入了溶菌酶、DNase和RNase等外源蛋白质，在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。


北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商关键词：Precipitated TMB Chromogenic Kit,BTN101106,沉淀型TMB显色试剂盒

Hotstart Taq酶 Trypsin(bovine pancreas) 
N-乙酰-L-异亮*酸 DL-5-HTP 3077-46-1
丁二酸铵 CMPI 2226-88-2
ARB12951 小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)含量分析 Mouse serum amyloid a,saa ELISA KIT
ARB14144 人β淀粉样蛋白(Aβ)ELISA代测服务 
9010-66-6 玉米蛋白 Zein
ARB10359 人心房利*肽(h-ANP)ELISA检测服务 Human atrial natriuretic Peptide,h-anp ELISA KIT
ARB11327 人胆囊收缩素(CCK)elisa检测操作说明书 Human cholecystokinin,cck ELISA KIT
CYB162032 羊抗人C3(抗血清) 0.5ml
321-30-2 腺嘌呤硫*(代"酸")盐 Adenine Sulfate
BL0789 羊IgG抗原(干粉)
DP203 超薄产物纯化试剂盒
D-亮*醇 HAP 53448-09-2
ARB11531 人脑源性神经营养因子(BDNF)血清中含量检测 Human brain derived neurotrophic facor,bdnf ELISA KIT
BTN70502 石蜡包埋组织DNAOUT FFPE DNAOUT
CYB163053 羊抗牛IgG-FITC
ARB14189 山羊基质金属蛋白酶-13(MMP-13)elisa检测 
北京BTN101106型沉淀型TMB显色试剂盒厂商关键词：Precipitated TMB Chromogenic Kit,BTN101106,沉淀型TMB显色试剂盒

KT201 Taq PCR Mastermix
γ-*基丁酸 HVA 56-12-2
ARB13307 小鼠髓过氧化物酶(MPO)定量分析 Mouse myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
头孢噻呋* 3,4-Benzopyrene 104010-37-9
大豆异黄酮 Iodoacetic acid 574-12-9
四盐*(代"酸")精胺 DL3000 DNA Marker 306-67-2
596-09-8 二乙酸荧光素 Fluorescein diacetate
ARB12029 大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)含量测试 Rat beta-site app-cleaving enzyme 2,bace2 ELISA KIT
ARB13802 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)酶免分析 Guinea pig ovalbumin specific igg,ova sigG ELISA KIT
PY08-044  营养肉汤 30ml  瓶，用于一般营养不苛求细菌的培养
BTN131066 磷酸化蛋白富集试剂盒 Phosphate Protein Enrichment Kit
ARB13766 鸭抗凝血素抗体(APT1/APT2)Elisa方法检测 Duck anti-prothrombins antibodies,apt1/apt2 ELISA KIT
SJ0800 Erythritol   赤藓糖醇

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