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- 详细信息
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- 保存条件:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
- 保质期:
长期
- 英文名:
Herring Sperm DNA Solution
- 库存:
798
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买
品牌:百奥莱博
规格:1mL
英文名:Herring Sperm DNA Solution
产地:国产|进口
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
除BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买外,我公司正在打折促销以下产品:
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BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买关键词:鲱鱼精DNA溶液,Herring Sperm DNA Solution,BTN130908
·一站式GST标记蛋白质微量纯化套装(含溶菌酶和核酸酶)
编号:BTN111116B
英文名称:One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
规格:20次
重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶能提高重组蛋白的水溶性,所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合,并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立,是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的,其原理如下:

产品特点:
1.一站式套装,含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达GST 标记蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
2.专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。
3.只能在非变性条件下使用,只可用于纯化没形成包涵体的GST 标记蛋白。
4.每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
5.提供4mL浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose 介质,可吸附5-10mg GST 标记蛋白质。
6.本介质可以反复使用多次。
试剂盒组成:
| 成分 | 20次(A) | 20次(B) |
| 谷胱甘肽-Agarose介质,50% | 4ml | 4ml |
| 10×PBS缓冲液 | 100ml | 100ml |
| 溶液A | 1ml | 无 |
| GST洗脱缓冲液成分一 | 25ml | 25ml |
| GST洗脱缓冲液成分二 | 约80mg | 约80mg |
| 溶菌酶(20KU/mg) | 无 | 30mg |
| Benzonase(2U/μL) | 无 | 20μl |
| PMSF(10mg/mL) | 0.5ml | 0.5ml |
| 6mL层析柱(带筛板) | 1套 | 1套 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需低温运输。收到货后,介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:
1.每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照,在下面描述中就不再提醒。
2.本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供的10×PBS缓冲液而得。PBS缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌,注意防止污染。
3.GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中,摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液,分装成小份放-20℃保存,每次用一管。
一、重组蛋白的表达和细菌收集
1.37℃振荡培养20mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2.加IPTG 到终浓度为0.1mM,30℃振荡培养3小时或22℃振荡培养8小时(或过夜)。
3.4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清。
4.用1×PBS缓冲液重悬细菌沉淀,4℃ 5000g离心10分钟,弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
二、细胞裂解
5.如果用本产品A型,用1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(1mL 1×PBS缓冲液+50μl溶液A+ 25μl 10mg/mL的PMSF溶液)重悬细菌沉淀,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,一般选1K-10K 频率处理15次,每次20秒,间隔1分钟(必需放置在冰上)。裂解物不能粘稠,否则会堵塞层析柱。
6.如果用本产品B型,在1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(在20mL 1×PBS缓冲液中加入所有30mg 溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,取一管使用,剩余的-20℃放置)中加入25μl 10mg/mL的PMSF溶液和1μl Benzonase,用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置30分钟,得到细菌裂解物。
7.将超声或酶法细胞裂解物在13000 g 4℃离心10分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱,所得上清即含可溶性GST 标记蛋白。
三、层析柱的制备和GST蛋白纯化
8.摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据GST蛋白产量决定,100mL菌液一般使用200μL介质即可)。下列步骤各溶液的用量均针对200μL介质而定,如果介质用量不同,各溶液用量需相应调整。
9.用5mL预冷的1×PBS缓冲液洗柱。
10.将第7 步得到的上清液(含可溶性GST标记蛋白)上柱,让重力使上柱液自然流出,收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢,所以流速一定不能快,否则结合不充分。流速一般在0.2-1mL/分钟即可。如要提高GST 标记蛋白与介质的结合效率,可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用0.5-2mL 1×PBS缓冲液洗柱,收集并保存穿透液(含杂蛋白)。
12.用0.2-1mL GST洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含GST 标记蛋白)。由于可能含蛋白酶污染,所以穿透液不能在4℃放置,需立即用于后续处理(如浓度测定或SDS-PAGE电泳)或-80℃长期放置。
13.对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意:如果不预先脱盐,则只能用Bradford法或OD 检测法(1 OD280 约等于0.5mg/mL蛋白)测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD,所以在SDS-PAGE胶上,GST 标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。
附:GST柱的恢复(本试剂盒不含所需试剂)
1.用3倍体积的6M盐*(代"酸")胍处理柱子10分钟。
2.用3倍体积的超纯水处理柱子10分钟。
3.用3倍体积的缓冲液一(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH8.5)处理柱子10分钟。
4.用3倍体积的缓冲液二(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH4.5)处理柱子10分钟。
5.再重复3-4 步两次。
6.用3倍体积的超纯水处理柱子3次。
7.用3倍体积的1×PBS缓冲液处理柱子2次。
8.堵上漏口,加3倍体积的1×PBS缓冲液待用。若长时间不用,则第7步和第8步的1×PBS改成20%的乙醇。
BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买关键词:鲱鱼精DNA溶液,Herring Sperm DNA Solution,BTN130908
·亲和硅烷
编号:BTN90308
英文名称:Binding Silane
规格:25mL
本产品为一定浓度的Silane A174,其全名是3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷,CAS号是2530-85-0,分子量是280.35。主要用于制备PAGE胶时,处理其中一块玻璃板,使附着的凝胶不易被剥离。本产品最好跟剥离硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·卵白蛋白标准品(2mg/mL)
编号:BTN90610
英文名称:Ovalbumin Standard
规格:1mL
本产品是浓度为2mg/mL的卵白蛋白,用做蛋白测定的标准品。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
·CHAPS
编号:BTN131043
英文名称:3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate
规格:5g
CHAPS全名是(3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate),中文名是3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐,多一个羟基就是CHAPSO,全名是3-[(3- 胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2- 羟基-1- 丙磺酸盐。它们的特点是能够破坏非特异性蛋白相互作用。与非离子型去垢剂相比引起蛋白聚集的几率更小。电中性并且不会引起变性。可以通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)
编号:BTN131176
英文名称:FFPE direct RT-PCR Kit (RNA extraction-free)
规格:30次
CHAPS全名是(3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate),中文名是3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐,多一个羟基就是CHAPSO,全名是3-[(3- 胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2- 羟基-1- 丙磺酸盐。它们的特点是能够破坏非特异性蛋白相互作用。与非离子型去垢剂相比引起蛋白聚集的几率更小。电中性并且不会引起变性。可以通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·RecJf核酸外切酶
编号:BTN130629
英文名称:RecJf Exonulease
规格:1000U
RecJf作用于单链DNA,沿5´→3´方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达。其催化特性与野生型RecJ相同。与MBP的融合,增强了RecJf的溶解度。当底物为5´端突出了22个核苷酸的DNA时,经RecJf酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5´突出末端(1-5个核苷酸)和5´凹陷末端(1-8个核苷酸)。RecJf发挥活性时无需5´末端磷酸化。
产品特点:
1.特异性5´→3´单链DNA核酸外切酶;
2.从DNA上切下单磷酸脱氧核苷酸。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内产生0.05nmol可溶于TCA的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
我公司强烈推荐探针标记及检测系列产品,热情期待您的咨询选购BTN130908型鲱鱼精DNA溶液哪里买。
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文献和实验DNA ( 高压后的鲱鱼精 DNA,5 g/L ) ( 15 ) OLB ( 寡核苷酸标记缓冲液):2 ml ( 1.25 mol/L Tris-HCl,pH 8.0 和 0.125 mol/L MgCl2) ,36 μl β-巯基乙醇,10 μl dATP,10 μl dTTP,10 μl dGTP,5165 μl 的 2 mol/L 羟乙基哌嗪乙硫磺酸(pH 6.6 ),3099 μl 的 90 OD260 U 随机引物/μl ( 16 ) BSA ( 小牛血清白蛋白,50 mg
的因素是靶序列DNA的长度和组成,例如,在100μl反应体系中,4×dNTPs浓度若用20μmol/L,基本满足合成2.6μg DNA或10pmol的400bp序列。50μmol/L的4×dNTPs可以合成6.6μg DNA,而200μmol/L足以合成25μg/DNA。 购自厂商的dNTP溶液一般均未调pH,应用1mol/l NaOH将dNTP贮存液pH调至7.0,以保证反应的pH值不低于7.1。市购的游离核苷酸冻干粉,溶解后要用NaOH中和,再用紫外分光光度计定量。 (三)引物
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