一站式miRNA柱式大提试剂盒厂家直销

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应一站式miRNA柱式大提试剂盒厂家直销，产品信息：

类别：RNA纯化

英文名：One-stop miRNA column large-scale extraction kit

产品名	产品编号	包装规格
一站式miRNA柱式大提试剂盒	BTN80906	5次

编号：BTN80906

品牌：百奥莱博

英文名：One-stop miRNA column large-scale extraction kit

规格：5次

产地：国产|进口

本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品，是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

 

试剂盒特点：

1.样品处理量大，一次最多可以处理2g的样品。

2.一步法直接分离纯化小RNA，比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。

3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。

4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。

5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。

6.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

 

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
离心吸附柱(大提)	10套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	5ml
说明书	1份

 

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织，可以在50mL塑料离心管中操作。

1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL)，然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。如果产生沉淀，需加热到65℃使其溶解后才能使用。

a)对贴壁细胞：吸尽培养液，按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。

b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。

c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。

d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。

e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。

2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中，然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。

3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。

4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附。

5. 12000～15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟，收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA，请按附录的方法操作，但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。

6.在穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约30mL。

7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中，每次转移后需要12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。

 注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。

8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心1分钟，弃穿透液。

9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。

10. 12000～15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。

11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中，加入0.5-1mL RNA 洗脱液。

12. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

 

附录：

1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。

2. 重复上步一次。

3.干甩一次。

4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液，室温放置2-3分钟。

5. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为大RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

一站式miRNA柱式大提试剂盒厂家直销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：一站式miRNA柱式大提试剂盒,BTN80906,One-stop miRNA column large-scale extraction kit

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编号	类别	名称
BTN131223	其他细胞生物学试剂	Zenker固定液
BTN121208	蛋白质研究	液体样品蛋白纯化回收试剂盒
BTN130307	核酸扩增(PCR)	25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)
BTN120307	工具酶	SP6 RNA聚合酶
BTN151203	探针标记及检测	生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
BTN90407B	克隆与表达	λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)
BTN80911	工具酶	蛋白酶K溶液
BTN100823	干粉培养基	SOC培养基
BTN100840	克隆与表达	嘌呤霉素干粉
BTN130923	核酸扩增(PCR)	LAMP扩增阳性对照
BTN60902	其他生化试剂	Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.0)(不含RNase)
BTN130630	细胞组织染色	糖原PAS染色液(真菌专用)
BTN60208	克隆与表达	硫*(代"酸")卡那霉素溶液
BTN140635	细胞及免疫学	XTT细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
BTN130664	蛋白质研究	极高热稳定单链结合蛋白
BTN140621	细胞及免疫学	基因转染增强剂
BTN160907	RNA纯化	植物RNA提取试剂盒2.0(无*仿柱式提取)
BTN90613	蛋白质研究	动物细胞核蛋白微量制备试剂盒
BTN131075	蛋白质研究	糖蛋白染色试剂盒
BTN70605	核酸电泳和回收	miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)
BTN120681	克隆与表达	两性霉素B
BTN100809	其他生化试剂	20×SSPE(pH7.4)
BTN91104B	探针标记及检测	Denhardt溶液(非同位素探针)
BTN90504	克隆与表达	大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞
BTN80922	RNA纯化	96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)

 

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