- ￥1000
- 盖宁生物
- 上海
- GN1621
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pTALETF_v2 (NG)
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 质粒类型: | Tale ToolBox kit |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8901 bp |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素)，Chloramphenicol (氯霉素) |
| 备注: | 克隆菌株为ccdB Survival |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1621 | pTALETF_v2 (NG) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
PubMed=28408844; DOI=10.2147/OTT.S128416
Townsend M.H., Anderson M.D., Weagel E.G., Velazquez E.J., Weber K.S., Robison R.A., O'Neill K.L.
Non-small-cell lung cancer cell lines A549 and NCI-H460 express hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase on the plasma membrane.
Onco Targets Ther. 10:1921-1932(2017)
PubMed=28601559; DOI=10.1016/j.cels.2017.05.009
Bekker-Jensen D.B., Kelstrup C.D., Batth T.S., Larsen S.C., Haldrup C., Bramsen J.B., Sorensen K.D., Hoyer S., Orntoft T.F., Lindbjerg Andersen C., Nielsen M.L., Olsen J.V.
An optimized shotgun strategy for the rapid generation of comprehensive human proteomes.
Cell Syst. 4:587-599.e4(2017)
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*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
酶切位点； 直接克隆虽然省事，但是还不如先走T载体克隆，然后再连接到你的目的载体上了！ robustandy 首先，确定一下你的片断浓度，根据你这个片断大小应该不难连接。 注意片断纯化质量， 如果含有乙醇可能不好连接。 重要的是，你应该按照片断的摩尔比去优化，而不是片断的质量比。载体用50ng 应该就足够了，以这个量去计算你加入连接片断的量大概至少需要18.6ng。如果是单酶切的话，可能是载体去磷酸化不彻底，如果是双酶切可能是残余的未完全
在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验，所以我这里写的T载体构建只能算是入门级，给新手提供一点思路，有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb，用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系：5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA） ddH2O up to 50 ul
体系 37度3小时 4ul pCDNA3.1载体（500 ng/ul） 1ul BamHI 1ul EcoRI 2ul 10×buffer 12 ul H2O 酶切完成后胶回收（见附录） 处理好的目的片段与载体连接反应体系： 6ul PCR 酶切回收片段（约50ng/ul） 1ul 酶切好的载体（约50ng/ul） 2ul ligase buffer 1ul T4ligase 10ul H2O 以上连接液在16℃过夜。 转化 (感受态细胞: DH5a),具体步骤见
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