胃癌cDNA组织芯片60点，cDNA-HStmA060CS0

做PCR达人，从引物设计开始

标记（生物素、荧光、地高辛和Eu3+等）、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。   2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时，根据不同的实验目的，需要注意一些相应的事项，总结如下：   01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物，而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求： 确保模板是cDNA

细胞组分的分析方法――核酸序列的原位杂交

015mol/L柠檬酸钠，pH7．4，等于1×)中浸泡过夜。 (2)捞出硝酸纤维素膜，空气干燥。 (3)将标记后的探针进行适当稀释，95℃水浴加热2-5min，使DNA变性。 (4)将变性后的DNA探针马上冰浴10min。 (5)将探针点在晾干的硝酸纤维素膜上，每个斑点点4μl。 (6)晾干后，将点样的硝酸纤维素膜夹在滤纸中间，80℃烘烤2h。 (7)用0．01mol/L PB，pH8．2洗涤3次，每次15min。 (8)将与胶体金相连的链霉

基因芯片技术知识概要

较简单，只需将预先制备好的寡核苷酸或cDNA等样品通过自动点样装置点于经特殊处理的玻璃片或其它材料上即可。 1、原位光蚀刻合成　寡聚核苷酸原位光蚀刻合成技术是由Affymetrix公司开发的，采用的技术原理是在合成碱基单体的5'羟基末端连上一个光敏保护基。合成的第一步是利用光照射使羟基端脱保护，然后一个5'端保护的核苷酸单体连接上去，这个过程反复进行直至合成完毕。使用多种掩盖物能以更少的合成步骤生产出高密度的阵列，在合成循环中探针数目呈指数增长。某一含n个核苷酸的寡聚核苷酸，通过4×n个化学