食管癌cDNA组织芯片30点，cDNA-HEsoS030PG

基因芯片实验原理与方法（一）

就可以在基片上制作出近百微米的小探针点．每平方厘米可排布近20000个探针，克服了喷墨打印技术制备探针阵列密度较小的缺点。 寡核昔酸芯片的杂交和检测分析：样品处理和杂交检测方法与cDNA芯片是一致的。由于寡核昔酸阵列多需要区分单碱基突变．因此严格控制杂交液盐离子浓度、杂交温度和冲洗时间是杂交实验成败的关键。 cDNA芯片（cDNA Chip） 概念：在玻璃片、硅片、聚丙烯膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜等固相载体上固定的成千上万个cDNA分子组成cD4A微阵列。制作cDNA芯片最常用的固相载体是显微镜载玻片

做PCR达人，从引物设计开始

图 引物设计总体上包含三个程序：模板的获得、同源性分析以及引物筛选。模板的获得有多种来源，根据实验目的来定，这里不多作讨论。同源性分析的目的是看引物与模板有没有非特异性结合位点，特别要避免非特异性结合位点的3’末端完全配对。为最大程度确保获得较好的PCR结果，引物筛选需要满足以下几项基本原则：   01 引物长度：18-30 nt  大多数应用的最短引物长度为18个核苷酸，引物长度的上限并不是很重要，主要与反应效率有关。引物越长，退火结合到靶DNA上形成稳定双链模板的速率越

细胞组分的分析方法――核酸序列的原位杂交

015mol/L柠檬酸钠，pH7．4，等于1×)中浸泡过夜。 (2)捞出硝酸纤维素膜，空气干燥。 (3)将标记后的探针进行适当稀释，95℃水浴加热2-5min，使DNA变性。 (4)将变性后的DNA探针马上冰浴10min。 (5)将探针点在晾干的硝酸纤维素膜上，每个斑点点4μl。 (6)晾干后，将点样的硝酸纤维素膜夹在滤纸中间，80℃烘烤2h。 (7)用0．01mol/L PB，pH8．2洗涤3次，每次15min。 (8)将与胶体金相连的链霉