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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pGEM-3
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
1ug/5ug
载体基本信息
| 出品公司: | Ybscience |
|---|---|
| 载体名称: | pGEM-3 |
| 质粒类型: | 克隆载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 2867 bp |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素 |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | -- |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | -- |
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
Sequence 2867 BP; 711 A; 739 C; 727 G; 690 T; 0 other;
gaatacaagc ttgcatgcct gcaggtcgac tctagaggat ccccgggtac cgagctcgaa
ttccggtctc cctatagtga gtcgtattaa tttcgataag ccagctgcat taatgaatcg
gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgta ttgggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta tcaaaaagga
tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa agtatatatg
agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct
gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact acgatacggg
agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc
cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt ggtcctgcaa
ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta agtagttcgc
cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt
cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc
ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc agaagtaagt
tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt actgtcatgc
catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc tgagaatagt
gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata
gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga
tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac tgatcttcag
catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa
aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt tttcaatatt
attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga
aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gacgtctaag
aaaccattat tatcatgaca ttaacctata aaaataggcg tatcacgagg ccctttcgtc
tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
accatatcga cgctctccct tatgcgactc ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt
gaggccgttg agcaccgccg ccgcaaggaa tggtgcaagg agatggcgcc caacagtccc
ccggccacgg ggcctgccac catacccacg ccgaaacaag cgctcatgag cccgaagtgg
cgagcccgat cttccccatc ggtgatgtcg gcgatatagg cgccagcaac cgcacctgtg
gcgccggtga tgccggccac gatgcgtccg gcgtagagga tctggctagc gatgaccctg
ctgattggtt cgctgaccat ttccggggtg cggaacggcg ttaccagaaa ctcagaaggt
tcgtccaacc aaaccgactc tgacggcagt ttacgagaga gatgataggg tctgcttcag
taagccagat gctacacaat taggcttgta catattgtcg ttagaacgcg gctacaatta
atacataacc ttatgtatca tacacatacg atttaggtga cactata
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文献和实验zhangyuxianggx 各位大侠好!现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上,老师就说让构建载体,具体是什么意思啊?我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒,但是不知下一步该怎么做?恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
片段。 3.目的片段的克隆 纯化的片段连接到克隆载体pGEM-Tvector,转化导入宿主菌E.coliDH5α,通过蓝白斑筛选,PCR扩增鉴定后测序,获得的含所需要的目的片段的质粒。 (1)pGEM®-TEasy载体系统 I.描述 pGEM®-TEasy载体系统可用于PCR产物的克隆。这种载体是通过EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM®-TEasy载体,并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率,因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化,并且为
,产生1000个菌落。转化率为: 产生菌落的总数/铺板DNA的总量。 铺板DNA的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数。具体而言转化用10ng DNA,用SOC稀释到1000u后含10 ng DNA,用1/10铺板,共用1 ng DNA。转化率为:1000克隆X103 ng /铺板1 ng DNA ug=106cfu/ ug转化pGEM-T应用108cfu/ ug感受态细胞,如没有菌落或少有菌落,感受态细胞的转化率太低。 C)如用pGEM-T正对照,或PCR产物,产生>20-40蓝斑(用指定
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