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pDONR221-P1P4

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  • YB-10113
  • 2025年07月10日
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    • 英文名

      pDONR221-P1P4

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      大量

    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pDONR221-P1P4

    载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    载体名称: pDONR221-P1P4 、pDONR221 P1-P4
    质粒类型: Mltisite-Gateway载体;DONR载体
    高拷贝/低拷贝: 低拷贝
    启动子:
    克隆方法: Gateway;BP反应
    载体大小: 4774bp
    5' 测序引物及序列: M13/pUC fwd 5'CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG 3'
    3' 测序引物及序列: M13/pUC rev 5' AGCGGATAACAATTTCACACAGG 3'
    载体标签:
    载体抗性: 卡那霉素,氯霉素(仅空载体)
    真核筛选标记:
    克隆菌株: 阳性筛选用DB3.1 ,阴性筛选用OmniMAX2-T1
    备注:
    pDONR221-P1P4载体是MultiSite Gateway载体,

    是研究启动子的理想工具。
     
    病毒/非病毒: 非病毒
     

    载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pDONR221-P1P4载体图谱



    pDONR221-P1P4多克隆位点

    pDONR221-P1P4 载体特征

    载体简介

    pDONR221-P1P4使用方法
     

    载体序列

    LOCUS       Exported                4774 bp ds-DNA     circular SYN 10-AUG-2016
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    KEYWORDS    pDONR221-P1P4
      AUTHORS   Biofeng Lab.
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..4774
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         terminator      268..295
                         /note="rrnB T2 terminator"
                         /note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB 
                         gene"
         terminator      387..473
                         /gene="Escherichia coli rrnB"
                         /note="rrnB T1 terminator"
                         /note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB 
                         gene"
         primer_bind     537..553
                         /note="M13 fwd"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         protein_bind    570..801
                         /gene="mutant version of attP"
                         /bound_moiety="BP Clonase(TM)"
                         /note="attP1"
                         /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction 
                         (pDONR(TM)201 version)"
         CDS             complement(1197..1502)
                         /codon_start=1
                         /gene="ccdB"
                         /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"
                         /note="ccdB"
                         /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 
                         propagated in standard E. coli strains."
                         /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK
                         VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"
         CDS             complement(1852..2505)
                         /codon_start=1
                         /gene="cat"
                         /product="chloramphenicol acetyltransferase"
                         /note="CmR"
                         /note="confers resistance to chloramphenicol"
                         /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
                         KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
                         LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
                         DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGG"
         promoter        complement(2506..2608)
                         /note="cat promoter"
                         /note="promoter of the E. coli cat gene encoding 
                         chloramphenicol acetyltransferase"
         protein_bind    complement(2753..2984)
                         /gene="mutant version of attP"
                         /bound_moiety="BP Clonase(TM)"
                         /note="attP4"
                         /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction"
         promoter        complement(3016..3034)
                         /note="T7 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
         primer_bind     complement(3039..3055)
                         /note="M13 rev"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         CDS             3168..3977
                         /codon_start=1
                         /gene="aph(3')-Ia"
                         /product="aminoglycoside phosphotransferase"
                         /note="KanR"
                         /note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418 
                         (Geneticin(R)) in eukaryotes"
                         /translation="MSHIQRETSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYGKP
                         DAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGKTA
                         FQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDASD
                         FDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGIAD
                         RYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
         rep_origin      4124..4712
                         /direction=RIGHT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
    ORIGIN
            1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
           61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
          121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
          181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
          241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
          301 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
          361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
          421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
          481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
          541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggcccca aataatgatt ttattttgac tgatagtgac
          601 ctgttcgttg caacaaattg atgagcaatg cttttttata atgccaactt tgtacaaaaa
          661 agctgaacga gaaacgtaaa atgatataaa tatcaatata ttaaattaga ttttgcataa
          721 aaaacagact acataatact gtaaaacaca acatatccag tcactatgaa tcaactactt
          781 agatggtatt agtgacctgt agtcgaccga cagccttcca aatgttcttc gggtgatgct
          841 gccaacttag tcgaccgaca gccttccaaa tgttcttctc aaacggaatc gtcgtatcca
          901 gcctactcgc tattgtcctc aatgccgtat taaatcataa aaagaaataa gaaaaagagg
          961 tgcgagcctc ttttttgtgt gacaaaataa aaacatctac ctattcatat acgctagtgt
         1021 catagtcctg aaaatcatct gcatcaagaa caatttcaca actcttatac ttttctctta
         1081 caagtcgttc ggcttcatct ggattttcag cctctatact tactaaacgt gataaagttt
         1141 ctgtaatttc tactgtatcg acctgcagac tggctgtgta taagggagcc tgacatttat
         1201 attccccaga acatcaggtt aatggcgttt ttgatgtcat tttcgcggtg gctgagatca
         1261 gccacttctt ccccgataac ggagaccggc acactggcca tatcggtggt catcatgcgc
         1321 cagctttcat ccccgatatg caccaccggg taaagttcac gggagacttt atctgacagc
         1381 agacgtgcac tggccagggg gatcaccatc cgtcgcccgg gcgtgtcaat aatatcactc
         1441 tgtacatcca caaacagacg ataacggctc tctcttttat aggtgtaaac cttaaactgc
         1501 atttcaccag cccctgttct cgtcagcaaa agagccgttc atttcaataa accgggcgac
         1561 ctcagccatc ccttcctgat tttccgcttt ccagcgttcg gcacgcagac gacgggcttc
         1621 attctgcatg gttgtgctta ccagaccgga gatattgaca tcatatatgc cttgagcaac
         1681 tgatagctgt cgctgtcaac tgtcactgta atacgctgct tcatagcata cctctttttg
         1741 acatacttcg ggtatacata tcagtatata ttcttatacc gcaaaaatca gcgcgcaaat
         1801 acgcatactg ttatctggct tttagtaagc cggatccacg cggcgtttac gccccccctg
         1861 ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg ccgacatgga agccatcaca
         1921 aacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg catcagcacc ttgtcgcctt gcgtataata
         1981 tttgcccatg gtgaaaacgg gggcgaagaa gttgtccata ttggccacgt ttaaatcaaa
         2041 actggtgaaa ctcacccagg gattggctga gacgaaaaac atattctcaa taaacccttt
         2101 agggaaatag gccaggtttt caccgtaaca cgccacatct tgcgaatata tgtgtagaaa
         2161 ctgccggaaa tcgtcgtggt attcactcca gagcgatgaa aacgtttcag tttgctcatg
         2221 gaaaacggtg taacaagggt gaacactatc ccatatcacc agctcaccgt ctttcattgc
         2281 catacggaat tccggatgag cattcatcag gcgggcaaga atgtgaataa aggccggata
         2341 aaacttgtgc ttatttttct ttacggtctt taaaaaggcc gtaatatcca gctgaacggt
         2401 ctggttatag gtacattgag caactgactg aaatgcctca aaatgttctt tacgatgcca
         2461 ttgggatata tcaacggtgg tatatccagt gatttttttc tccattttag cttccttagc
         2521 tcctgaaaat ctcgataact caaaaaatac gcccggtagt gatcttattt cattatggtg
         2581 aaagttggaa cctcttacgt gccgatcaac gtctcatttt cgccaaaagt tggcccaggg
         2641 cttcccggta tcaacaggga caccaggatt tatttattct gcgaagtgat cttccgtcac
         2701 aggtatttat tcggcgcaaa gtgcgtcggg tgatgctgcc aacttagtcg actacaggtc
         2761 actaatacca tctaagtagt tgattcatag tgactggata tgttgtgttt tacagtatta
         2821 tgtagtctgt tttttatgca aaatctaatt taatatattg atatttatat cattttacgt
         2881 ttctcgttca acttttctat acaaagttgg cattataaga aagcattgct tatcaatttg
         2941 ttgcaacgaa caggtcacta tcagtcaaaa taaaatcatt atttgccatc cagctgcagg
         3001 gcggccgcga tatcccctat agtgagtcgt attacatggt catagctgtt tcctggcagc
         3061 tctggcccgt gtctcaaaat ctctgatgtt acattgcaca agataaaaat atatcatcat
         3121 gaacaataaa actgtctgct tacataaaca gtaatacaag gggtgttatg agccatattc
         3181 aacgggaaac gtcgaggccg cgattaaatt ccaacatgga tgctgattta tatgggtata
         3241 aatgggctcg cgataatgtc gggcaatcag gtgcgacaat ctatcgcttg tatgggaagc
         3301 ccgatgcgcc agagttgttt ctgaaacatg gcaaaggtag cgttgccaat gatgttacag
         3361 atgagatggt cagactaaac tggctgacgg aatttatgcc tcttccgacc atcaagcatt
         3421 ttatccgtac tcctgatgat gcatggttac tcaccactgc gatccccgga aaaacagcat
         3481 tccaggtatt agaagaatat cctgattcag gtgaaaatat tgttgatgcg ctggcagtgt
         3541 tcctgcgccg gttgcattcg attcctgttt gtaattgtcc ttttaacagc gatcgcgtat
         3601 ttcgtctcgc tcaggcgcaa tcacgaatga ataacggttt ggttgatgcg agtgattttg
         3661 atgacgagcg taatggctgg cctgttgaac aagtctggaa agaaatgcat aaacttttgc
         3721 cattctcacc ggattcagtc gtcactcatg gtgatttctc acttgataac cttatttttg
         3781 acgaggggaa attaataggt tgtattgatg ttggacgagt cggaatcgca gaccgatacc
         3841 aggatcttgc catcctatgg aactgcctcg gtgagttttc tccttcatta cagaaacggc
         3901 tttttcaaaa atatggtatt gataatcctg atatgaataa attgcagttt catttgatgc
         3961 tcgatgagtt tttctaatca gaattggtta attggttgta acactggcag agcattacgc
         4021 tgacttgacg ggacggcgca agctcatgac caaaatccct taacgtgagt tacgcgtcgt
         4081 tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc
         4141 tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc
         4201 cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac
         4261 caaatactgt tcttctagtg tagccgtagt taggccacca cttcaagaac tctgtagcac
         4321 cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc tgctgccagt ggcgataagt
         4381 cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga taaggcgcag cggtcgggct
         4441 gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac gacctacacc gaactgagat
         4501 acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt
         4561 atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg
         4621 cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt
         4681 gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt
         4741 tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgtt

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