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BAL 31核酸酶
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一年
BAL 31 Nuclease
大量
联迈生物
50U
BAL 31核酸酶产品及特点:
BAL 31 Nuclease(BAL 31核酸酶)是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA,没有单链时也作用于双链DNA,表现出从DNA两端同时降解的5′→3′及3′→5′的外切酶活性(Trimming活性),最终产物为5′-P单核苷酸。 该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶,在切刻、缺口、双链 DNA单链区和双链 RNA 的单链区进行切割。其工作原理图如下:
BAL 31核酸酶本产品具有下列特点:
1. 从两端逐步对双链 DNA 进行切割。
2. EGTA 使本酶失活。
3. 限制性酶切图谱的构建。
BAL 31核酸酶备注
1. 单链Endonuclease活性在反应温度从30℃降到20℃时,大约下降到1/10左右,而双链Exonuclease活性大约残留1/3左右。
2. Endonuclease活性不受盐浓度影响,但Exonuclease则是盐度越高活性低。
3. Trimming 活性的最适盐浓度在200 mM NaCl左右,若低于此浓度有时表现Nicking活性。
4. 分解活性对碱基的依存性较高,由于GC rich领域不易被分解,在酶切时,需选择末端限制酶位点。
5. 反应中因各种酶活性的反应分配(Distributive)关系,对酶浓度有较大的依存,所以对稀释不表现线性关系。因此当酶反应速度过时,应降低反应温度。
6. 本酶需要Ca2+的存在,通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时,该酶对于单链DNA表现出最大活性。相反对于双链DNA,其活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时,有时会发生随机分解。因此,建议在盐浓度200~600 mM的范围内进行反应。
7. 通过本酶产生的末端的平滑率只有10%左右,为了提高连接效率,建议通过T4DNA Polymerase进行修复。
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