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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京UDG酶价格在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京UDG酶价格
编号:JN0059
规格:200U
产地:国产|进口
UDG酶分子量25KDa,能特异性识别DNA单链或双链中的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止DNA发生突变,是碱基切除 修复过程中的重要组分,对RNA无活性。
产品用途:
UDG酶常被用于消除PCR扩增中的残余污染。在PCR反应液配制时,将dUTP和dTTP 按一定的比例混用,使得扩增产物都含有脱氧尿嘧啶。在进行PCR扩增前,在PCR混合液添加UDG酶,并增加2分钟37℃~50℃的保温步骤即可消除以往PCR产物的残留污染,由于UDG在PCR循环中的94℃dU的PCR产物。
使用建议:
UDG酶在Taq酶反应缓冲液中同样具有活性。在PCR反应液中直接添加UDG酶即可,推荐用量为0.2U每50μl体系,在PCR循环程序前增加2分钟37℃ ~50℃保温及可完全消除多达1ng含UTP模板的污染。
应用示例:
UDG酶特异性降解含UTP的DNA模板
反应体系:
加入物 | 加入量 |
2×Taq MasterMix | 25μl |
500bp模板(含UTP) | 1ng |
500bp扩增引物对 | 终浓度0.2μM |
250bp模板(无UTP掺入) | 1ng |
250bp扩增引物对2 | 终浓度0.2μM |
dH2O | 至50μl |
50℃ | 2分钟(降解含UTP的 污染模板) |
94℃ | 4分钟(灭活UDG酶) |
30次循环 | 94℃,30秒 57℃,30秒 72℃,30秒 |
72℃ | 5分钟 |
4℃ | 保温 |
加入物 | 加入量 |
5×Taq Buffer with Mg2+ | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
下游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
dATP, dGTP, dCTP | 各0.2mM(终浓度) |
dTTP | 0.1mM(终浓度) |
dUTP | 0.2mM(终浓度) |
如全部使用dUTP替代dTTP | 0.4mM(终浓度) |
模板 | 1-50ng(质粒) |
10ng-1μg(基因组) | |
Taq | 0.25μl(1.25U ) |
ddH2O | 至50μl |
UDG酶 | 0.2U,如残余污染严重可适量增加酶用量 |
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