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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Premixed BCIP/NBT Solution
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
100 mL
预混型BCIP/NBT溶液产品及特点
本产品是在BCIP/NBT底物显色试剂盒(CAT#:81224-100)的基础改良而得的升级产品,它具有下列特点:
1. 含有BCIP和NBT两种成分的混合液,不需混合和稀释,直接使用,十分方便。
2. 在碱性磷酸酶存在时形成暗紫色沉淀,具有和其他AP底物(包括分开提供的BCIP/NBT溶液)一样的灵敏度。
3. 稳定,使用精心优化的溶剂,在室温条件下可以保存一年。
4. 可用于Western Blot。
预混型BCIP/NBT溶液使用及效果
印迹膜或组织切片跟AP标记的二抗孵育后,用水洗涤膜,然后将其转移到本产品中(每cm2印迹膜或组织切片需要0.1mL 本产品),室温平缓摇晃5-30分钟显色,直到条带出现(具体时间靶蛋白浓度相关),然后将印迹膜或组织切片转移到水中终止反应。
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文献和实验和蒸汽,现已有可代替的核酸燃料 Goldview 等,建议实验室取缔。含此物质的废液处理请参考相关书籍。 ● 十二烷基硫酸钠(SDS):有毒,是一种刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。 ● X‐半乳糖(X‐gal):对眼睛和皮肤有毒性。应注意,X‐gal 溶液以 DMF 为溶剂,该物质刺激眼睛、皮肤和黏膜。慢性吸入可导致肝、肾损害。应在通风橱内操作。 ● TEMED:强神经毒性,防止
Buffer洗板5次,每个孔250 μl。(5)用PBS-0.5%FBS稀释Streptavidin-ALP(1:1 000),每个孔加100 μl,室温孵育1个小时。(6)用Wash Buffer洗板5次,每个孔250 μl。(7)在10 ml ddH2O中溶解一片BCIP/NBT即配成底物溶液,每个孔加100 μl。(8)把板放在黑暗中反应,直到有清楚的斑点显示出来。 (9)用大量的自来水清洗终止颜色反应。如果有必要,把板从盘里取出来漂洗干净底下的膜。(10)晾干板,用ELISpotreader
血清和 0.03% 三重氢核 X-100 )孵育 30 分钟; 25 )加入抗地高辛抗体( 1/200 的上述缓冲液,来自 Boehringer Mannheim ), 37 ℃孵育 3 小时; 26 )缓冲液 A 清洗 2 次,每次 10 分钟; 27 )缓冲液 B 清洗 2 次,每次 5 分钟; 28 )制成 NBT/BCIP 暗处保存 30-60 分钟,显微镜下进行观察,如果背景尚佳,显色时间可延长到 16 小时; 29 )停止缓冲液 B 的反应,用水进行简单的清洗
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