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SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应WE0287型SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)
编号:WE0287
规格:500ml
产地:国产|进口
英文名:SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
本产品为配制SDS-PAGE分离胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
编号 | 名称 |
WE0220 | X-gal溶液(20mg/ml) |
WE0374 | 罗丹明山羊抗大鼠IgG(H+L) |
WE0128 | 高效cDNA第一链合成试剂盒(微量样本) |
WE0160 | 超纯dNTP混合液(10 mM) |
WE0204 | 磁珠法游离DNA提取试剂盒 |
WE0251 | TOP10感受态细胞 |
WE0312 | PBS(pH7.5,10×) |
WE0254 | BL21(DE3)pLysS感受态细胞 |
WE0151 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针) |
WE0403 | 尿液DNA样本保存管 |
WE0364 | FITC标记驴抗山羊IgG(H+L) |
WE0219 | IPTG溶液(50mg/ml) |
WE0401 | 组织样本RNA样品保存管 |
WE0326 | 细胞周期与凋亡检测试剂盒 |
WE0358 | DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L) |
WE0140 | 实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ) |
WE0353 | 抗β-Actin单克隆抗体(植物) |
WE0143 | 快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料) |
WE0103 | Bes Taq DNA Polymerase |
WE0122 | FastStar热启动DNA聚合酶 |
WE0242 | UltraStain DNA Marker |
WE0243 | Super DNA Ladder |
WE0240 | 二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) |
WE0352 | 抗GST标签单克隆抗体 |
WE0296 | 一步法Western专用封闭液 |
WE0207 | 磁珠法唾液DNA提取试剂盒 |
WE0228 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Ion Torrent平台) |
WE0263 | 酵母蛋白抽提试剂盒 |
WE0398 | 游离DNA样本保存管(10ml) |
WE0356 | 抗GAPDH单克隆抗体 |
WE0216 | 50×TAE |
WE0268 | Protein A+G琼脂糖凝胶 |
WE0142 | 快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料) |
WE0327 | Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒 |
WE0330 | 抗His标签抗体琼脂糖介质 |
WE0137 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 |
WE0376 | HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ) |
WE0277 | SDS-PAGE快速电泳液 |
WE0384 | FITC标记山羊抗兔IgG(H+L) |
WE0331 | 抗GST标签琼脂糖介质 |
WE0372 | HRP标记驴抗山羊IgG(H+L) |
WE0144 | 实时荧光定量PCR的预混体系(探针法) |
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